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文檔簡介
1、目的:
ELISA方法一直是臨床診斷HBV感染的傳統(tǒng)手段,通過檢測病毒HBV DNA的表達(dá)物(HBsAg,HBeAg)及應(yīng)答系統(tǒng)(HBsAb,HBeAb,HBcAb)來診斷慢性乙肝,并通過肝功的標(biāo)志物(谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT等)的水平判斷疾病的進(jìn)展。隨著實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)的應(yīng)用,定量測定HBV DNA可以真實(shí)反映體內(nèi)乙肝病毒感染和復(fù)制及病毒載量情況,更有利于臨床治療和療效觀察。
HBV cccDNA
2、是HBv前基因組RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物最原始的模板,也是HBV持續(xù)感染的關(guān)鍵因素及HBv復(fù)制最特異的指標(biāo),但由于其存在于肝細(xì)胞核內(nèi),限制了其定量檢測的,有研究指出,肝內(nèi)HBV cccDNA與血清HBsAg及血清HBV-DNA水平顯著相關(guān),反應(yīng)了HBsAg檢測的重要性。但是HBV的突變使得HBsAg陽性率降低,從而降低了HBsAg的檢測的靈敏度。通常并不把HBsAg作為慢性乙肝治療的主要檢測指標(biāo),Da Silva,L.C等觀察21例病人接受乙肝抗
3、病毒治療后的反應(yīng)指出聯(lián)合應(yīng)用HBV DNA及HBeAg在慢性乙肝病人抗病毒治療的監(jiān)測有重要價(jià)值。
本研究通過酶聯(lián)免疫分析(ELISA)法及熒光定量PCR(FQ-PCR)分別定量檢測HBV血清學(xué)標(biāo)志物(HBV-M)(HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb)和HBV-DNA含量,同時(shí)檢測肝功能標(biāo)志物ALT水平,探討乙型肝炎病毒HBV-DNA含量與血清標(biāo)記物HBeAg、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的相關(guān)性及其對肝病患
4、者診斷和預(yù)后預(yù)測的意義。
方法:
慢性乙肝患者523例,正常對照65例。采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法檢測乙肝患者血清學(xué)標(biāo)記物(HepatitisB virus marker,HBV-M包括HbsAg、HbsAb、HbeAg、HbeAb及HbcAb),其血清學(xué)模型包括以下四種組合,A組:HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)(大三陽);B組:HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(
5、+)(小三陽);C組:HBsAg(+)、HBcAb(+);D組:HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(FQ-PCR)檢測血清中HBV-DNA含量,酶法測定血清ALT水平。
結(jié)果:
A組HBV-DNA陽性率為92.55%,明顯高于B組78.97%(x2=189.60,P<0.001)和C組50.98%(x2=234.15,P<0.001),A、B、C三組ALT水平均高于對照組
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