潰瘍性結腸炎發(fā)病和激素耐藥機制的研究.pdf

1、目的:
　　 1.探討食物過敏在潰結發(fā)病中的作用;
　　 2.檢測潰結患者接受糖皮質激素治療前后結腸黏膜MDR1基因mRNA及P糖蛋白(P-gp)的表達,探討潰結患者發(fā)生激素耐藥的機制。
　　 方法:
　　 1、初治潰結患者121例,健康對照47例,采用ELISA法檢測潰結患者及健康對照者血清14種食物過敏原特異性IgG抗體及IgE抗體。將血清食物sIgG檢測陽性的潰結患者隨機分為剔除sIgG陽性食物的飲

2、食控制組和不予剔除sIgG陽性食物的非飲食控制組,兩組患者均接受潑尼松(1mg/kg/d)和5-氨基水楊酸制劑的綜合治療,隨訪兩個月比較兩組患者療效差異。
　　 2、潰瘍性結腸炎患者在接受激素治療前及治療8周后均接受結腸鏡檢查并留取腸黏膜標本,采用免疫組織化學方法檢測腸黏膜P糖蛋白(P-gp)的表達情況,采用逆轉錄-PCR方法檢測腸黏膜MDR1基因mRNA表達水平,使用Leica QwinV3圖像分析軟件半定量分析PCR條帶,計

3、算MDR1/β2-MG密度比值反映MDR1-mRNA表達水平。比較激素治療前后腸黏膜MDR1-mRNA和P-gp表達變化,以及治療后激素敏感患者與激素耐藥患者MDR1-mRNA和P-gp表達差異。
　　 結果:
　　 1.血清食物特異性抗體IgG(SIgG)&IgE(SIgE)的檢測結果及剔除致敏食物對療效的影響:
　　 潰瘍性結腸炎患者中79例出現SIgG陽性,總陽性率為65.29％(79/121);健康對照組

4、僅8例食物SIgG陽性,總陽性率僅為17.02％(8/47)。二組比較差異有統(tǒng)計學意義。潰瘍性結腸炎患者中出現1種食物SIgG陽性率15.70％(19/121),2種食物SIgG陽性率25.62％(31/121),3種或3種以上食物SIgG陽性率為23.97％(29/121),即有49.59％的潰結患者同時有2種或2種以上食物SIgG陽性;而對照組僅出現1種食物SIgG陽性。潰瘍性結腸炎患者組中有49例出現對至少一種食物過敏原sIgE陽

5、性,陽性率為40.50％(49/121);健康對照組只有2例出現sIgE陽性反應,陽性率僅為4.26％(2/47)。治療2個月后,飲食控制組患者總有效率高于非飲食控制組。
　　 2.免疫組織化學染色結果:
　　 潰結患者激素治療前腸黏膜P-gp的總陽性表達率為8.26％(10/121),健康對照者腸黏膜P-gp表達陽性率為43.33％(13/30),潰結患者激素治療前P-gp的陽性表達率顯著低于健康對照組。治療8周后P-

6、gp的總陽性表達率為35.54％(43/121),激素治療后潰結患者腸黏膜P-gp表達高于治療前水平。治療8周后依據激素療效分為激素敏感患者(n=85)和激素耐藥患者(n=36),激素敏感患者中P-gp的陽性表達率為17.65％(15/85),激素耐藥患者P-gp的陽性表達率為77.78％(28/36)。激素耐藥患者P-gp表達率顯著高于激素敏感患者。
　　 3.逆轉錄-PCR反應結果:
　　 潰結患者激素治療前腸黏膜M

7、DR1-mRNA表達水平為0.12±0.03,健康對照者腸黏膜MDR1-mRNA表達水平為0.68±0.06。初治潰結患者激素治療前MDR1-mRNA表達水平低于健康對照者,差異有統(tǒng)計學意義。治療8周后潰結患者腸黏膜MDR1-mRNA表達平均水平為0.57±0.04,治療后患者腸黏膜MDR1-mRNA表達高于治療前水平。治療8周后激素敏感患者MDR1-mRNA表達水平為0.46±0.05,激素耐藥患者MDR1-mRNA表達水平為0.89