Exend in-4對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的脂肪細(xì)胞胰島素抵抗的影響及其機(jī)制探討.pdf

1、目的：外周脂肪組織胰島素抵抗與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激密切相關(guān)，本實(shí)驗(yàn)利用內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑衣霉素（TM）誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞發(fā)生胰島素抵抗。同時(shí)以Exendin-4進(jìn)行干預(yù)、牛磺熊脫氧膽酸（TUDCA）作為陽性對照，觀察脂肪細(xì)胞中胰島素刺激的葡萄糖消耗改變情況，進(jìn)而觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子（p-IRE-1a，IRE-1a，p-JNK，JNK）表達(dá)的變化。初步探討Exendin-4對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的脂肪細(xì)胞胰島素抵抗的影響及相關(guān)的分子機(jī)制。
　

2、　方法：體外培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞，并將其誘導(dǎo)分化為成熟的脂肪細(xì)胞。以MTT比色法檢測不同干預(yù)條件下脂肪細(xì)胞存活情況。以葡萄糖氧化酶法（GOD）法檢測不同干預(yù)條件下脂肪細(xì)胞葡萄糖消耗情況。利用western blot檢測不同干預(yù)條件下內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激關(guān)鍵信號蛋白（p-IRE、IRE、p-JNK、JNK）的表達(dá)差異。
　　結(jié)果：（1）Exendin-4可協(xié)同胰島素作用，增加脂肪細(xì)胞胰島素刺激的葡萄糖消耗36.7％（P<0.05）。5μ

3、g/ml衣霉素(TM）作用5小時(shí)后可使胰島素刺激的3T3-L1脂肪細(xì)胞葡萄糖消耗量降低了19.7%（P<0.05），而1mmol/L TUDCA以及100nmol/L Exendin-4預(yù)處理24小時(shí)后均可緩解衣霉素的抑制作用。Western blot顯示，5μg/ml TM作用5h明顯增加p-IRE和p-JNK的表達(dá)。而經(jīng)1mmol/L TUDCA以及100nmol/L Exendin-4預(yù)處理24后，均可減少p-IRE與p-JNK的