人房水、乳汁中藥物分析方法的研究.pdf

1、本文共分為兩部分，第一部分通過(guò)測(cè)定同一藥物不同劑型在房水中的藥物濃度，初步探討藥物不同劑型的吸收差異；第二部分通過(guò)乳汁中藥物分析方法的研究，為科學(xué)指導(dǎo)哺乳期合理用藥奠定了研究基礎(chǔ)。 第一部分，以LC—MS/MS法測(cè)定白內(nèi)障患者采用加替沙星滴眼液、加替沙星凝膠劑治療后房水中的藥物濃度，進(jìn)而為眼部制劑的劑型研究提供參考。房水樣本經(jīng)過(guò)液液萃取處理后，采用內(nèi)標(biāo)法(內(nèi)標(biāo)為環(huán)丙沙星)進(jìn)行定量分析。液相條件：色譜柱：ZORBAX Eclips

2、e Plus C18(2.1×100 mm，1.8μm)；流動(dòng)相：0.1％甲酸水溶液：乙腈(0.1％甲酸)=80：20(V/V)；流速：0.3 mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣體積：5μL。質(zhì)譜條件：ESI離子源，正離子檢測(cè)方式，選擇MRM模式進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析。加替沙星(m/z)：376.1→332.1，出峰時(shí)間7.1min；環(huán)丙沙星內(nèi)標(biāo)(m/z)：332.1→288.1，出峰時(shí)間7.5min。房水中內(nèi)源物質(zhì)不干擾加替沙星的測(cè)定。根據(jù)實(shí)

3、驗(yàn)要求，將房水樣本按濃度分為兩組。低濃度組，加替沙星在0.5～12.0 ngml/L呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程Y=1.9291X+0.6016(r=0.9964)，當(dāng)加替沙星濃度為1.0ng/mL、6.0 ng/mL、40.0 ng/mL時(shí)，回收率分別為114.1％、106.5％、83.2％，RSD分別為20.3％、9.1％、9.5％(n=5)，均符合生物樣品的測(cè)定要求；高濃度組，加替沙星在10.0～200.0ngml/L呈良好的線

4、性關(guān)系，線性回歸方程Y=1.2665X+3.5886(r=0.9983)，當(dāng)加替沙星濃度為1.0ng/mL、12.0 ng/mL、150.0 ng/mL時(shí)，回收率分別為114.1％、101.1％、102.0％，RSD分別為20.3％、8.4％、5.6％(n=5)，均符合生物樣品的測(cè)定要求。 將建立的分析方法應(yīng)用于34例使用滴眼液的患者和40例使用凝膠劑的患者，測(cè)定結(jié)果表明，74例病患房水樣本測(cè)定結(jié)果的RSD很大，可以明顯地觀察到

5、個(gè)體差異現(xiàn)象。將使用兩種劑型后房水中的藥物濃度測(cè)定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析，表明加替沙星凝膠劑與加替沙星滴眼液相比，房水中藥物濃度明顯升高，加替沙星眼用凝膠在房水中藥物濃度可保持一個(gè)更高的水平，具有更好的臨床療效；且在用藥后一個(gè)小時(shí)左右，房水中藥物濃度達(dá)到最大，建議于術(shù)前一個(gè)小時(shí)左右用藥，此時(shí)抑菌效果最佳。 第二部分，以HPLC法測(cè)定哺乳期乳腺炎患者采用頭孢呋辛鈉治療后乳汁中的藥物濃度。乳汁樣本經(jīng)脫脂、沉淀蛋白后，采用Agilent

6、ZORBAX SB—C18液相色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)，醋酸鈉緩沖液(pH3.7)：乙腈=7：1為流動(dòng)相，流速1.0mL/min，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，進(jìn)行乳藥濃度測(cè)定。結(jié)果表明，乳汁內(nèi)源物質(zhì)不干擾樣品測(cè)定，頭孢呋辛鈉在0.02～10μgml/L濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為Y=16872X—273.38(r=0.9980)，最低定量限為0.02μgml/L。高、中、低濃度的回收率分別為110.2％、9

7、3.2％、102.0％，RSD分別為4.6％，3.2％，9.1％，回收率和精密度符合生物樣品的測(cè)定要求。 本課題以HPLC法測(cè)定哺乳期乳腺炎患者采用左氧氟沙星治療后乳汁中的藥物濃度。乳汁樣本經(jīng)脫脂、沉淀蛋白后，采用Agilent ZORBAX SB—C18液相色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)，枸櫞酸溶液(0.05mol/L，用三乙胺調(diào)節(jié)pH3.4)：乙腈=85：15為流動(dòng)相，流速1.0mL/min，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)2

8、93nm，進(jìn)行乳藥濃度測(cè)定。結(jié)果表明，乳汁內(nèi)源物質(zhì)不干擾樣品測(cè)定，左氧氟沙星在0.03～15.5μgml/L濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為Y=48472X+4155.2(r=0.9988)，最低定量限為0.03μgml/L。高、中、低濃度的回收率分別為108.6％、107.2％、109.1％，RSD分別為4.5％，4.7％，5.5％，回收率和精密度符合生物樣品的測(cè)定要求。 目前，頭孢呋辛鈉、左氧氟沙星為乳腺炎患者常用藥物