蒜氨酸酶的分離純化與中試生產(chǎn)檢測.pdf

1、目的：大蒜（Allium Sativum L.）具有殺菌、降血脂、抗血栓、預(yù)防中風(fēng)和高血壓、保護(hù)肝臟和提高機(jī)體免疫力、抗癌等功能，是近代醫(yī)藥研究的熱點(diǎn)之一。目前公認(rèn)大蒜的功效成分是蒜氨酸（Alliin， S-allyl-L-cysteine，2-烯丙基半胱氨酸亞砜）及經(jīng)蒜酶（Alliinase，EC 4.4.1.4）催化裂解產(chǎn)生的大蒜辣素（Allicin，allyl-2-propenethiosulfinate，2-烯丙基硫代亞磺酸酯）

2、及阿霍烯（ajoene）等含硫化合物。蒜氨酸酶又稱蒜酶或蒜氨酸裂解酶。本課題組利用現(xiàn)代生物制藥技術(shù)從大蒜中分別提取相對穩(wěn)定的蒜氨酸和蒜酶“高效大蒜新制劑”。蒜酶作為大蒜中主要的原始活性成分之一，分離和純化蒜酶是重要的工作程序。本課題在前人研究工作的基礎(chǔ)上進(jìn)一步探索蒜氨酸酶的純化方法。分析中試生產(chǎn)過程中蒜酶活力的變化，選擇并確定合理的生產(chǎn)工藝。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)采用Superdex 200 prepgrade、ConA-Seph

3、arose等高校凝膠柱與親和層析，透析，低溫冷凍干燥等技術(shù)而得到了純度與活力較高的蒜酶，以丙酮酸法與HPLC法測定蒜酶活力，用Bradford法測定蒜酶蛋白質(zhì)含量，聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)法測定蒜酶純度。
　　 結(jié)果：本課題采用了幾種純化方法以得出了最適合做蒜酶純化的方法，最終從50%的蒜酶原料藥中得到了純度為80%的純蒜酶與活力為1600U/g（HPLC法）的高活力蒜酶，并且通過中試生產(chǎn)檢測而對生產(chǎn)工藝的改善提供了依