降鈣素基因相關(guān)肽及孤啡肽對(duì)健康大鼠離體心臟缺血再灌注后心臟功能及室性心律失常的影響.pdf

1、研究目的：觀察降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin gene-related peptide，CGRP)和孤啡肽(orphaninFQ，OFQ)對(duì)健康大鼠離體心臟缺血再灌注后心臟功能和室性心律失常的影響。目的在于比較和探討CGRP和OFQ在急性心肌缺血再灌注病理生理中對(duì)心臟功能和心律失常的影響，從而進(jìn)一步探討神經(jīng)源性機(jī)制在急性心肌缺血再灌注損傷中的作用機(jī)制。
　　 研究背景：急性心肌缺血是由于冠狀動(dòng)脈循環(huán)改變引起冠狀血流及心肌

2、需求之間的不平衡而導(dǎo)致的心肌損害。心肌缺血性疾患已成為人類健康的主要?dú)⑹?。急性心肌缺血可以產(chǎn)生心肌損傷并誘發(fā)心律失常，嚴(yán)重的心律失常已成為急性心肌缺血病人的主要死因。已有的相關(guān)研究表明，CGRP和OFQ參與機(jī)體對(duì)心血管系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。在發(fā)生急性心肌缺血時(shí)，心肌組織內(nèi)上述活性物質(zhì)的含量均有所增加，提示CGRP和OFQ參與并影響急性心肌缺血的病理變化過(guò)程。目前其在器官水平對(duì)心臟功能的調(diào)節(jié)作用及其作用機(jī)制還不明確。
　　 內(nèi)容及方法：

3、r>　　 第一章、CGRP對(duì)健康大鼠離體心臟缺血再灌注后心臟功能及室性心律失常的影響
　　 采用體重為250-280g的健康雄性SD大鼠。建立Langendorff離體心臟缺血再灌注實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，?shí)驗(yàn)研究分三部分：
　　 1.觀察在大鼠離體心臟缺血再灌注之前預(yù)先給予不同濃度降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)(10-6 mol·L-1，10-7 mol·L-1，10-8mol·L-1)對(duì)再灌注之后大鼠心臟功能及室性心律失常的影響并

4、觀察聯(lián)合使用CGRP(10-7mol·L-1)和降鈣素基因相關(guān)肽受體拮抗劑CGRP8-37(10-6 mol·L-1)對(duì)CGRP(10-7 mol·L-1)誘發(fā)的心臟功能及室性心律失常改變的影響。
　　 2.觀察在大鼠離體心臟缺血再灌注之后給予CGRP(10-7mol·L-1))對(duì)再灌注之后大鼠心臟功能及室性心律失常的影響并觀察聯(lián)合使用CGRP(10-7mol·L-1)和CGRP8-37(10-6 mol·L-1)對(duì)CGRP(1

5、0-7 mol·L-1)誘發(fā)的心臟功能及室性心律失常改變的影響。
　　 3.觀察在大鼠離體心臟缺血再灌注之前和再灌注之后分別給予CGRP(10-7mol·L-1)對(duì)再灌注之后大鼠心臟功能及室性心律失常改變的差別。
　　 第二章、OFQ對(duì)健康大鼠離體心臟缺血再灌注后心臟功能及室性心律失常改變的影響
　　 建立Langendorff離體心臟缺血再灌注實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停瑢?shí)驗(yàn)研究分三部分：
　　 1.觀察在大鼠離體心臟缺

6、血再灌注之前給予不同濃度孤啡肽(OFQ)(10-6mol·L-1，10-7 mol·L-1)對(duì)再灌注之后大鼠心臟功能及室性心律失常的影響并觀察聯(lián)合使用OFQ(10-6 mol·L-1)和孤啡肽受體拮抗劑UFP-101(10-5 mol·L-1)對(duì)OFQ(10-6mol·L-1)誘發(fā)的心臟功能及室性心律失常改變的影響。
　　 2.觀察在大鼠離體心臟缺血再灌注之后給予OFQ(10-6 mol·L-1))對(duì)再灌注之后大鼠心臟功能及室性

7、心律失常的影響并觀察聯(lián)合使用OFQ(10-6 mol·L-1)和UFP-101(10-5mol·L-1)對(duì)OFQ(10-6mol·L-1)誘發(fā)的心臟功能及室性心律失常改變的影響。
　　 3.觀察在大鼠離體心臟缺血再灌注之前和再灌注之后分別給予OFQ(10-6mol·L-1)對(duì)再灌注之后大鼠心臟功能及室性心律失常改變的差別。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用的主要觀察指標(biāo)有：左室收縮壓(left ventricular systolic

8、pressure，LVSP)，左室舒張末期壓(left ventricular end-diastrolic pressure，LVEDP)，左室主動(dòng)收縮壓(left ventricular developed pressure，LVDP=LVSP-LVEDP)，心率(heart rate，HR)，收縮時(shí)心肌最大變化速率(+dp/dtmax)，舒張時(shí)心肌最大變化速率(-dp/dtmax)；室性心律失常包括單發(fā)、多發(fā)室性期前心律、室速和室

9、顫。
　　 結(jié)果：
　　 1.CGRP對(duì)健康大鼠離體心臟缺血再灌注后心臟功能及室性心律失常的影響。
　　 1.1心臟功能
　　 a.與對(duì)照組比較，心臟停灌注前處理組，CGRP10-7 mol·L-1前處理組可以明顯增加HR，LVDP，降低LVEDP(P＜0.01)，同時(shí)有提高LVSP，±dp/dtmax的趨勢(shì)(P＞0.05)；CGRP10-6mol·L-1前處理組可明顯降低LVDP，HR，提高LVEDP(

10、P＜0.05)；CGRP10-8mol·L-1前處理組可明顯降低HR，LVEDP(P＜0.01)。與CGRP10-7 mol·L-1前處理組相比，CGRP10-7 mol·L-1+CGRP8-3710-6 mol·L-1前處理組可明顯降低LVSP，HR，同時(shí)升高LVEDP(P＜0.01)，對(duì)其他指標(biāo)也有逆轉(zhuǎn)趨勢(shì)。
　　 b.與對(duì)照組比較，心臟停灌注后處理組，CGRP10-7 mol·L-1可明顯降低LVSP，LVDP，HR，±d

11、p/dtmax(P＜0.01)；而與CGRP10-7mol·L-1后處理組相比，CGRP10-7mol·L-1+CGRP8-3710-6mol·L-1后處理組可明顯升高LVSSP,LVDP,HR±dp/dtmax，升高LVEDP(P＜0.01)。
　　 c.與CGRP10-7mol·L-1前處理組比較，心臟停灌注后處理組，CGRP10-7 mol·L-1后處理組可明顯降低LVSP，LVDP，HR，±dp/dtmax，升高LVED

12、P(P＜0.01)。
　　 1.2心律失常
　　 a.與對(duì)照組比較，心臟停灌注前處理組，CGRP10-7 mol·L-1前處理組在再灌后第一個(gè)10分鐘可明顯降低室性心律失常的發(fā)生(P＜0.01)。CGRP10-6mol·L-1，CGRP10-8mol·L-1前處理組沒(méi)有明顯變化。與CGRP10-7mol·L-1前處理組相比，CGRP10-7 mol·L-1+CGRP8-3710-6 mol·L-1前處理組可明顯增高室性心

13、律失常的發(fā)生(P＜0.01)。
　　 b.與對(duì)照組比較，心臟停灌注后處理組，CGRP10-7 mol·L-1后處理組有降低再灌后室性心律失常發(fā)生的趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而CGRP10-7mol·L-1+CGRP8-3710-6 mol·L-1后處理組可以逆轉(zhuǎn)這種趨勢(shì)。
　　 2.OFQ對(duì)健康大鼠離體心臟缺血再灌注后心臟功能及室性心律失常改變的影響
　　 2.1心臟功能
　　 a.與對(duì)照組比較，心臟停灌

14、注前處理組，OFQ10-6 mol·L-1前處理組可以明顯增加LVSP，LVEDP(P＜0.05)，降低HR(P＜0.01)；OFQ10-7mol·L-1前處理組可明顯降低+dp/dtmax(P＜0.05)，提高LVEDP(P＜0.01)，對(duì)其他心功能指標(biāo)影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與OFQ10-6 mol·L-1前處理組相比，OFQ10-6 mol·L-1+UFP10-5mol·L-1前處理組可明顯降低LVSP，LVDP，±dp/dtmax，同

15、時(shí)升高LVEDP(P＜0.01)。
　　 b.與對(duì)照組比較，心臟停灌注后處理組，OFQ10-6mol·L-1后處理組可明顯降低LVSP，LVEDP(P＜0.05)；與OFQ10-6mol·L-1后處理組相比，OFQ10-6mol·L-1+UFP10-5mol·L-1后處理組可明顯升高LVSP，LVDP，LVEDP，-dp/dtmax，降低HR(P＜0.01)。
　　 c.與OFQ10-6mol·L-1前處理組相比，心臟停

16、灌注后處理組，OFQ10-6mol·L-1后處理組可明顯降低LVSP，LVEDP，升高HR，-dp/dtmax(P＜0.01)。
　　 2.2心律失常
　　 a.工與對(duì)照組比較，心臟停灌注前處理組，OFQ10-6-6mol·L-1前處理于再灌后第一個(gè)10分鐘可明顯抑制室性心律失常的發(fā)生(P＜0.01)。
　　 b.與對(duì)照組比較，心臟停灌注后處理組，OFQ10-6 mol·L-1后處理，對(duì)再灌后室性心律失常發(fā)生無(wú)明

17、顯作用。
　　 結(jié)論：
　　 1.預(yù)防性給予降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)對(duì)健康大鼠離體心臟缺血再灌注后心臟功能有正性變時(shí)變力的作用，而再灌后治療性給予CGRP有負(fù)性變時(shí)變力的作用。其拮抗劑CGRP8-37能夠拮抗上述作用。提示CGRP受體可能參與介導(dǎo)CGRP對(duì)心臟功能的調(diào)節(jié)。而再灌注前后心肌細(xì)胞周圍環(huán)境的不同可能影響CGRP的作用。
　　 2.預(yù)防性給予孤啡肽(OFQ)對(duì)健康大鼠離體心臟缺血再灌注后心臟功能有負(fù)性

18、變時(shí)正性變力的作用。其拮抗劑UFP-101能夠拮抗其正性交力作用。再灌注后治療性給予OFQ有負(fù)性變力的作用，此作用也可被UFP-101拮抗。
　　 3.預(yù)防性及治療性給予降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)均可以減少室性心律失常的發(fā)生，其拮抗劑CGRP8-37能夠拮抗上述作用。預(yù)防性給予孤啡肽(OFQ)可以減少室性心律失常的發(fā)生，其拮抗劑CGRP8-37能夠拮抗上述作用。機(jī)體內(nèi)源性CGRP和OFQ可能通過(guò)其特異性受體參與對(duì)再灌后室性心律