激活巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)鼠角膜新生血管形成的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文激活巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)鼠角膜新生血管形成的實(shí)驗(yàn)研究姓名：栗占榮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：梁丹20090525中I I J 大學(xué)碩J ：學(xué)位論文 激活巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)鼠角膜新生血管形成的實(shí)驗(yàn)研究素下，觀察激活的巨噬細(xì)胞是否能誘導(dǎo)新牛血管形成，進(jìn)而探討其相關(guān)的調(diào)節(jié)機(jī)制。類(lèi)似研究國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)尚未見(jiàn)報(bào)道。目的觀察激活巨噬細(xì)胞可否誘導(dǎo)新生血管形成，探討其中可能的作用機(jī)制，為新生血管性疾病的治療研究提供新的參考途徑。方法1 ．

2、細(xì)胞的獲得、分離、培養(yǎng)、鑒定、相關(guān)因子表達(dá)檢測(cè)及D i I 標(biāo)記1 ．1 激活巨噬細(xì)胞的獲得、分離和培養(yǎng)S D 大鼠腹腔注射石蠟油l m l ，4 天后，無(wú)菌條件下收集腹腔灌洗液中的細(xì)胞。1 6 4 0 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)收集到的細(xì)胞，觀察細(xì)胞形態(tài)及其生長(zhǎng)狀態(tài)。1 ．2 激活巨噬細(xì)胞的鑒定1 ．2 ．1 免疫熒光檢測(cè)巨噬細(xì)胞相關(guān)抗原收集到的大鼠腹腔細(xì)胞行C D 6 8 、C D l 6 3 免疫熒光染色，檢測(cè)巨噬細(xì)胞的特異抗原表達(dá)。同時(shí)行P

3、 D G F 和T G F —D 染色，對(duì)巨噬細(xì)胞激活狀態(tài)進(jìn)行鑒定，行M M P ．9 、V E G F 促血管形成因子的表達(dá)檢測(cè)。1 ．2 ．2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)巨噬細(xì)胞吞噬功能F I T C _ d e X t 啪吞噬實(shí)驗(yàn)鑒定巨噬細(xì)胞的吞噬功能及巨噬細(xì)胞在腹腔收集液細(xì)胞中所占的比例。1 ．2 ．3 逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)( I m P c R ) 檢測(cè)激活巨噬細(xì)胞相關(guān)因子的表達(dá)對(duì)巨噬細(xì)胞P D G F 和T G F ．B 的m R N