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文檔簡介
1、目的:比較Ⅰ型(KLE細(xì)胞)和Ⅱ型(HEC-1-b細(xì)胞)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的抵抗能力以及還原型谷胱甘肽(GSH)對(duì)Ⅰ型和Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長的影響并探討其機(jī)制。 方法: ①用H2O2、GSH分別處理Ⅰ型和Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞,噻唑藍(lán)(MTT)法檢測兩型細(xì)胞的增殖水平。 ②取細(xì)胞增殖比在80%左右時(shí)的H2O2、GSH濃度分別處理Ⅰ型和Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞后,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平,酶標(biāo)儀檢測細(xì)
2、胞內(nèi)還原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,分光光度計(jì)檢測細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)及谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性。 結(jié)果: ①在不進(jìn)行處理的情況下,Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞較Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞ROS水平及CAT活性較低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GPx活性較高(P<0.01)。 ②MTT實(shí)驗(yàn)顯示,H2O2明顯抑制Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的生長,而對(duì)Ⅱ型子宮內(nèi)膜
3、癌細(xì)胞的生長影響不明顯;GSH能夠十分明顯地抑制Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的生長,而對(duì)Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的生長則有一定的促進(jìn)作用。 ③在氧化應(yīng)激條件下,Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD和CAT活性降低(P<0.01);Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞GSH、GSSG水平明顯升高,GSH/GSSG比值略有升高,SOD、CAT和GPx活性升高(P<0.01)。 ④用GSH處理后,Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長加快,細(xì)胞內(nèi)RO
4、S和GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD、CAT和GPx活性降低(P<0.01);Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長被抑制,細(xì)胞內(nèi)ROS,GSH及GSSG水平下降,GSH/GSSG比值明顯升高,CAT和GPx活性降低(P<0.01)。 結(jié)論: ①Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞較Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞ROS水平及CAT活性較低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GPx活性較高。 ②兩型細(xì)胞對(duì)氧化還原劑表現(xiàn)出十分不同的應(yīng)答。H2
5、O2對(duì)兩型細(xì)胞生長均有抑制作用,但對(duì)Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長的抑制作用更顯著;GSH在一定的濃度水平促進(jìn)Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長,但可抑制Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長。 ③Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽抗氧化系統(tǒng)及抗氧化酶系統(tǒng)不能有效的對(duì)抗氧化應(yīng)激,細(xì)胞對(duì)外界的氧化刺激較敏感,容易受到氧化損傷而死亡;外源性GSH可降低Ⅰ型細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激水平,對(duì)其生長有一定的促進(jìn)作用。 ④Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽抗氧化系統(tǒng)及抗氧化酶系統(tǒng)對(duì)外源性
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