新生血管與斑塊穩(wěn)定性的關(guān)系及VEGF基因干預(yù)的研究.pdf

1、本文包括四部分： 1、目的：構(gòu)建攜帶人VEGF<,165>基因的重組腺病毒。結(jié)論：通過(guò)雙質(zhì)粒細(xì)胞同源重組，生產(chǎn)攜帶人VEGF<,165>基因的重組腺病毒ad.VEGF，為動(dòng)物試驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。 2、目的：利用RNA干擾(RNA interference，RNAi)技術(shù)，以小鼠VEGFa基因(NM_001025257)為靶基因，構(gòu)建攜帶短發(fā)夾狀干擾RNA(siRNA)的慢病毒載體。結(jié)論：通過(guò)RNA干擾技術(shù)，成功設(shè)計(jì)、篩選、生產(chǎn)

2、針對(duì)小鼠VEGFa基因沉默的特異性siRNA慢病毒，為動(dòng)物試驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。 3、目的：建立apoE<'-/->小鼠頸動(dòng)脈粥樣斑塊模型，將攜帶目的基因病毒經(jīng)動(dòng)脈外膜轉(zhuǎn)染動(dòng)脈粥樣斑塊，通過(guò)促進(jìn)或抑制粥樣斑塊內(nèi)新生血管形成，明確粥樣斑塊內(nèi)新生血管形成、斑塊內(nèi)出血、粥樣斑塊破裂的相互關(guān)系及其機(jī)制。結(jié)論：(1)通過(guò)頸動(dòng)脈外膜局部轉(zhuǎn)染方式，可將目的基因高效轉(zhuǎn)染粥樣斑塊。(2)粥樣斑塊局部轉(zhuǎn)染Ad.VEGF<,165>，促進(jìn)斑塊內(nèi)新生血管形成，

3、增加粥樣斑塊破裂發(fā)生率。(3)VEGFa基因沉默顯著抑制粥樣斑塊進(jìn)展，降低粥樣斑塊易損指數(shù)，增加粥樣斑塊穩(wěn)定性。 4、目的：人類(lèi)動(dòng)脈粥樣硬化病變主要發(fā)生在大、中動(dòng)脈彎曲、分又及狹窄部位，如主動(dòng)脈弓、頸動(dòng)脈分支、冠狀動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈分支和股動(dòng)脈分支等血流緩慢或渦流部位，即低管壁剪切力區(qū)。ApoE<'-/->小鼠是研究動(dòng)脈粥樣硬化較理想動(dòng)物模型，但小鼠主動(dòng)脈管壁剪切力約為人主動(dòng)脈管壁剪切力的20倍。利用Visualsonics Ve