哮喘小鼠胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素及其受體的表達以及布地奈德、卡介苗干預(yù)的影響.pdf

1、目的： 觀察哮喘小鼠胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)及其受體(TSLPR)的表達以及布地奈德混懸液(BUD)、卡介苗(BCG)干預(yù)對其表達的影響，探討TSLP、TSLPR與哮喘的關(guān)系，為哮喘的防治提供新的思路。 方法： 1.40只雌性昆明小鼠隨機分成4組：哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組、正常對照組，每組10只。 2.哮喘組：昆明小鼠于第1、7、14天分別腹腔內(nèi)注射0.01％OVA和10％氫氧化鋁混懸

2、液0.2ml進行致敏，第21天起，霧化吸入2％OVA生理鹽水溶液5ml進行激發(fā)，每天1次，每次30分鐘，連續(xù)7天。 3.BUD干預(yù)組：致敏和激發(fā)方法同哮喘組，在霧化吸入OVA前1h予以BUD生理鹽水溶液5ml(含BUD1mg)霧化吸入20～30min。 4.BCG干預(yù)組：致敏和激發(fā)方法同哮喘組，于OVA致敏前Sd、3d、1d分別以BCG0.025mg皮內(nèi)注射干預(yù)。 5.正常對照組：昆明小鼠以生理鹽水代替OVA致敏

3、、激發(fā)。 6.末次激發(fā)24h后收集肺泡灌洗液(BALF)、外周血、肺組織及脾組織。肺組織切片行HE染色觀察病理改變，并用免疫組織化學(xué)方法判斷肺組織TSLP、TSLPR的表達。酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法測定BALF中IL-4、肺組織和脾組織中TSLP和TSLPR以及血清TSLP的表達。實時熒光定量PCR法檢測肺組織中TSLPmRNA和TSLPRmRNA的表達。 結(jié)果： 1.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及

4、正常對照組小鼠肺組織TSLP陽性細胞的平均光密度分別為(0.277±0.009)、(0.064±0.015)、(0.160±0.009)、(0.004±0.001)。四組間存在顯著差異(P<0.01)。哮喘組明顯高于正常對照組(P<0.01)；BUD干預(yù)組和BCG干預(yù)組明顯低于哮喘組(P<0.01)；BUD干預(yù)組和BCG干預(yù)組明顯高于正常組(P<0.01)；BUD干預(yù)組明顯低于BCG干預(yù)組(P<0.01)。 2.哮喘組、BUD干

5、預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠肺組織TSLPR陽性細胞的的平均光密度分別為(0.413±0.030)、(0.040±0.004)、(0.168±0.008)、(0.006±0.001)。結(jié)果與肺組織TSLP陽性細胞的平均光密度比較結(jié)果相似。 3.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠BALF中IL-4的表達水平分別為(244.200±4.601)pg/ml、(220.600±3.034)pg/ml、(224.90

6、0±2.930)pg/ml、(219.200±2.480)pg/ml。四組間存在顯著差異(P<0.01)。哮喘組明顯高于正常對照組(P<0.01)；BUD干預(yù)組和BCG干預(yù)組明顯低于哮喘組(P<0.01)；BUD干預(yù)組和BCG干預(yù)組雖高于正常對照組，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；BUD干預(yù)組與BCG干預(yù)組比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 4.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠肺組織TSLP的表達水平

7、分別為(4.221±0.115)ng/ml、(3.899±0.071)ng/ml、(3.8980±0.046)ng/ml、(3.621±0.129)ng/ml。結(jié)果與BALF中IL-4比較結(jié)果相似。 5.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠肺組織TSLPR的表達水平分別為(17.160±0.157)ng/ml、(16.460±0.209)ng/ml、(15.740±0.273)ng/ml、(15.860±0.285

8、)ng/ml。結(jié)果與BALF中IL-4比較結(jié)果相似。 6.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠脾組織TSLP的表達水平分別為(5.467±0.074)ng/ml、(5.096±0.077)ng/ml、(5.101±0.161)g/ml、(4.975±0.073)ng/ml。結(jié)果與BALF中IL-4比較結(jié)果相似。 7.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠脾組織TSLPR的表達水平分別為(20.9

9、01±0.421)ng/ml、(18.280±0.159)ng/ml、(18.840±0.273)ng/ml、(17.930±0.156)ng/ml。四組間存在顯著差異(P<0.01)。BCG干預(yù)組明顯高于正常對照組(P<0.05)。其余結(jié)果與BALF中IL-4比較結(jié)果相似。 8.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠血清TSLP的表達水平分別為(1.611±0.204)ng/ml、(0.484±0.061)ng/m

10、l、(0.166±0.045)ng/ml、(0.336±0.076)ng/ml。四組間存在顯著差異(P<0.01)。哮喘組明顯高于正常對照組(P<0.01)；BUD干預(yù)組和BCG干預(yù)組明顯低于哮喘組(P<0.01)；BUD干預(yù)組和BCG干預(yù)組與正常對照組比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；BUD干預(yù)組明顯高于BCG干預(yù)組(P<0.01)。 9.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠肺組織TSLPmRNA的相對表達

11、水平分別為(8.510±1.657)％、(1.756±0.518)％、(3.950±1.031)％、(0.999±0.204)％。結(jié)果與BALF中IL-4比較結(jié)果相似。 10.哮喘組、BUD干預(yù)組、BCG干預(yù)組及正常對照組小鼠肺組織TSLPRmRNA的相對表達水平分別為(8.601±1.847)％、(0.972±0.295)％、(3.236±0.538)％、(1.848±0.394)％。四組間存在顯著差異(P<0.01)。BUD

12、干預(yù)組明顯低于BCG干預(yù)組(P<0.01)。其余結(jié)果與BALF中IL-4比較結(jié)果相似。 結(jié)論： 1.哮喘小鼠血清TSLP、肺組織和脾組織TSLP、TSLPR及肺組織TSLPmRNA、TSLPRmRNA的表達均增高。TSLP、TSLPR在哮喘的發(fā)病機制中起重要作用。 2.BUD、BCG可明顯抑制哮喘小鼠TSLP和TSLPR的表達，為BUD、BCG防治哮喘提供了新的理論依據(jù)。 3.TSLP、TSLPR在哮喘的