苯并[a]芘神經(jīng)毒性及其在腦組織中分布的研究.pdf

1、第一部分苯并[a]芘染毒所致大鼠海馬形態(tài)學(xué)改變 目的：擬用光鏡和電鏡方法研究苯并[a]芘引起的大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。 方法：選取健康21d齡雄性SD大鼠48只，體重40～50g，活動(dòng)能力相近，隨機(jī)分為對(duì)照組（n=8）和實(shí)驗(yàn)組（n=40）。實(shí)驗(yàn)組注射[14C]苯并[a]芘3.7×105 Bq/kg，對(duì)照組注射相同劑量的生理鹽水，觀察動(dòng)物的一般情況。在染毒結(jié)束后的1h、1d、2d、3d、7d五個(gè)不同的時(shí)間點(diǎn)，處死大鼠分

2、離海馬進(jìn)行光鏡和電鏡觀察。 結(jié)果：（1）動(dòng)物的一般情況：苯并[a]芘染毒大鼠出現(xiàn)了活動(dòng)量和食量減少、不安、多動(dòng)、叫聲異常、易興奮易急、感覺(jué)遲鈍、反應(yīng)低下等行為改變。（2）光鏡HE染色顯示，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組海馬沒(méi)有出現(xiàn)明顯的損傷。（3）電鏡觀察顯示，與對(duì)照組比較，染毒組大鼠海馬出現(xiàn)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張、線粒體輕度腫脹，瘠減少甚至消失等現(xiàn)象。 結(jié)論：苯并[a]芘對(duì)染毒大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞具有損傷作用。 第二部分苯并[a]

3、芘亞慢性染毒對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力影響 目的：制作苯并[a]芘亞慢性染毒大鼠模型，探討苯并[a]芘對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響。 方法：選取健康21d齡雄性SD大鼠40只，體重40～50g，活動(dòng)能力相近，將動(dòng)物隨機(jī)分為4組：植物油組（溶劑對(duì)照組）、苯并[a]芘低劑量2.5mmol/L組、苯并[a]芘中劑量5mmol/L組、苯并[a]芘高劑量10mmol/L組，每組10只，從腹腔注射給藥，每周給藥2次（周二，周五），連續(xù)給

4、藥4周，記錄一般情況。分別在染毒前1天，染毒結(jié)束后第1天，染毒結(jié)束第10天，染毒結(jié)束后第20天進(jìn)行水迷宮學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)試，判斷不同劑量的苯并[a]芘亞慢性染毒對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響。 結(jié)果：（1）染毒結(jié)束后第1天，各組染毒大鼠平均潛伏期與溶劑對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），其中以溶劑對(duì)照組的平均潛伏期最短，低劑量組次之，高劑量組最長(zhǎng)，（P<0.05）。停止染毒后，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，平均潛伏期有所縮短，各組之間的差異與

5、染毒結(jié)束后第1天表現(xiàn)出類似規(guī)律性。（2）染毒結(jié)束后第1天，各組大鼠錯(cuò)誤次數(shù)之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中以溶劑對(duì)照組的錯(cuò)誤次數(shù)最少，低劑量組次之，高劑量組最多，（P<0.05）。停止染毒后，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，錯(cuò)誤次數(shù)有所減少。（3）在空間探索實(shí)驗(yàn)中，染毒組的末次跨平臺(tái)次數(shù)少于對(duì)照組，差異具有顯著性（P<0.05），且各染毒組之間的末次跨平臺(tái)次數(shù)的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論：（1）苯并[a]芘染毒對(duì)大鼠的

6、空間學(xué)習(xí)能力和記憶能力具有損害作用。（2）苯并[a]芘對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的損害存在一定的劑量效應(yīng)關(guān)系。（3）苯并[a]芘染毒結(jié)束后，隨時(shí)間的推移，記憶可以恢復(fù)一部分。 第三部分光鏡放射自顯影法觀察苯并[a]芘在腦組織的分布 目的：運(yùn)用光鏡放射自顯影法，以[14C]標(biāo)記苯并[a]芘，觀察銀粒的分布部位與數(shù)量追蹤苯并[a]芘及其代謝物在腦組織的分布部位、相對(duì)數(shù)量及其動(dòng)態(tài)變化。 方法：健康21d齡雄性SD大鼠68只，體

7、重40～50g，活動(dòng)能力相近，將動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組（rr8）和實(shí)驗(yàn)組（n=60），實(shí)驗(yàn)組尾靜脈注射[14C]BaP3.7×105 Bq/kg，對(duì)照組注射相同劑量的生理鹽水。每組按照染毒后處死時(shí)間的不同，又分為1h、6h、12h、24h和48h共5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，觀察大鼠一般情況以及測(cè)定臟器系數(shù)，采用r測(cè)量方法和光鏡放射自顯影法觀察[14C]BaP在腦組織內(nèi)的分布及其銀粒密度。 結(jié)果：（1）染毒后大鼠腦組織的臟器系數(shù)與對(duì)照組比較，并無(wú)明

8、顯不同。（2）r測(cè)量法和銀粒計(jì)數(shù)結(jié)果都顯示染毒后1h集中分布在海馬，6h集中分布在大腦皮質(zhì)，24h集中在紋狀體。（3）光鏡放射自顯影觀察，與對(duì)照組比較，苯并[a]芘處理后各個(gè)時(shí)相點(diǎn)銀粒數(shù)均明顯高于對(duì)照組，并且不同時(shí)相點(diǎn)銀粒數(shù)在腦組織的分布也不均勻，注藥后1h即有銀粒出現(xiàn)，隨著時(shí)間的增加，銀粒數(shù)也逐漸增加，24h達(dá)高峰，48h明顯減少。（4）神經(jīng)元中的銀粒數(shù)明顯高于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。 結(jié)論：苯并[a