軟脈靈對自發(fā)性高血壓大鼠心臟、血管的影響及對平滑肌細胞遷移的作用.pdf

1、目的: 1.觀察軟脈靈(Ruan Mian Ling，RML)對SHR心臟及血管結(jié)構(gòu)的影響。 2.觀察軟脈靈對SHR心肌、胸主動脈中L型鈣通道(Cavα1C)、肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶(SERCA)和肌漿網(wǎng)鈣釋放通道表達的影響。 3.觀察含軟脈靈中藥大鼠血清對血小板源性生長因子誘導(dǎo)的大鼠平滑肌細胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)遷移的影響。 方法: 第一部分

2、： 12周齡雄性SHR36只，隨機分為4組，SHR為空白對照、軟脈靈大劑量組[RH3 ml·kg-1·d-1]、軟脈靈小劑量組[RL1 ml·kg-1·d-1]，氯沙坦組[LOS10 mg·kg-1·d-1]為陽性對照。血壓正常的Wistar Kyoto(WKY)組為正常對照。每同灌胃給藥，對照組給等量蒸餾水。給藥前測動脈壓。12周后再次測動脈壓，稱重，處死。(1)計算左心室重量與體重比(LVM/BW)。(2)天狼星紅染色，計算

3、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)。(3)HE染色，計算主動脈及腸系膜三級動脈血管壁腔比和管壁厚度、管腔半徑比。 第二部分： RT-PCR法測大鼠心肌及胸主動脈Cavα1C，SERCA-2a，IP3R-1，RyR-3 mRNA的表達；免疫組化法測定IP3R-1，RyR-3的表達。 第三部分： VSMCs的培養(yǎng)，含軟脈靈中藥大鼠血清的制備，通過改良Boyden微孔膜雙槽法測量含藥血清對VSMCs遷移的作用。 結(jié)果

4、: 第一部分： 1.軟脈靈治療12周后，SBP均顯著低于SHR組(175.0±4.1，182.5±4.6 vs208.9±9.3 mmHg，P<0.01)。 2.與SHR組相比，RH組心肌外斜層膠原纖維明顯減少(0.03±0.01 vs0.05±0.02，P<0.01)，而RL組與SHR組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；與SHR組相比，RH組、RL組心肌中環(huán)層膠原纖維明顯減少(0.03±0.01，0.02±0.01 vs0

5、.05±0.01，P<0.01)；與SHR組相比，RH、RL組心肌小動脈周圍膠原纖維明顯減少(0.04±0.01，0.04±0.02 vs0.08±0.02，P<0.01)。 3.RH組治療12周后，胸主動脈管壁面積/管腔面積(W/L)及管壁厚度/管腔半徑(Tw/R1)與SHR組相比明顯降低(W/L:0.16±0.01 vs0.20±0.02，P<0.01；Tw/R1:0.09±0.01 vs0.11±0.01，P<0.05)，

6、且與LOS組比較無顯著性差異，而RL對W/L和Tw/R1沒有作用。 4.與SHR組相比，軟脈靈治療12周后，腸系膜三級動脈W/L均顯著降低(0.29±0.03，0.32±0.10 vs0.42±0.09，P<0.05)，給予RH治療后，腸系膜三級動脈Tw/R1明顯降低(0.18±0.07 vs0.25±0.06，P<0.05)，而RL組與SHR組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 第二部分： 1.與SHR組相比，軟脈靈能明顯

7、降低心肌CavαlC mRNA的表達(0.24±0.02，0.24±0.05 vs0.35±0.06，P<0.05)；但對胸主動脈CavαlC mRNA的表達沒有影響。 2.與SHR組相比，軟脈靈對SHR心肌和胸主動脈SERCA-2a mRNA的表達都沒有影響。 3.軟脈靈組心肌IP3R-1 mRNA的表達與SHR組相比沒有顯著性差異，但胸主動脈IP3R-1 mRNA的表達明顯降低(1.12±0.08，1.07±0.11

8、 vs1.36±0.12，P<0.05)，且兩組與LOS組比較無顯著性差異。 4.與SHR組相比，軟脈靈對SHR胸主動脈RyR-3 mRNA的表達沒有影響。 5.軟脈靈組心肌IP3R-1免疫染色光密度的表達比SHR組明顯降低0.014±0.003，0.014±0.006 vs0.027±0.006，P<0.05)，且兩組與LOS組比較無顯著性差別，而軟脈靈對SHR胸主動脈IP3R-1則沒有影響。 6.RL組胸主動

9、脈RyR-3免疫染色光密度的表達比SHR組明顯降低(0.025±0.007 vs0.195±0.050，P<0.05)，且RL組與LOS組比較無顯著性差別。而RH對SHR胸主動脈RyR-3則沒有影響。 第三部分： 1.在PDGF-BB(10ng/ml)誘導(dǎo)下，VSMCs遷移細胞數(shù)比對照組明顯增加(59.20±13.26 vs6.96±1.32，P<0.01)。 2.與5％正常血清比較，5％藥物血清顯著抑制VSMC

10、s的遷移，抑制率為36.5％(93.20±14.68 vs147.40±30.17，P<0.01)；10％藥物血清也有明顯的抑制作用，抑制率為52.4％(59.90±9.05 vs125.80±35.94，P<0.01)。 結(jié)論: 1.軟脈靈可以降低SHR的血壓。 2.軟脈靈可以降低SHR心肌膠原容積分?jǐn)?shù)，減輕SHR血管重塑。 3.SHR心肌Cavα1C、IP3R-1的表達上調(diào)。 4.SHR胸主動