Chemerin及其受體對代謝性高血壓大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的:建立代謝性高血壓大鼠模型，觀察胸主動(dòng)脈血管重塑情況，觀察模型鼠已重塑的胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中chemerin及其受體的表達(dá)，研究人重組chemerin蛋白對人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、表型及細(xì)胞周期的影響，揭示chemerin及其受體在高血壓血管重塑中的作用。
　　方法:1將8周齡雄性Wistar大鼠(n=16)隨機(jī)分為兩組，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，對照組(n=8)繼續(xù)給予普通飲食，模型組(n=8)給予高鹽高脂高糖飲食，共喂養(yǎng)26周，分

2、別于0、4、8、20、26周測體重、血壓、血糖、血脂，于26周同時(shí)處死對照組及模型組，取胸主動(dòng)脈，免疫組織化學(xué)法觀察血管管壁中膜厚度、中膜/內(nèi)徑比、chemerin及其受體CMKLR1表達(dá)，qRT-PCR法檢測chemerin及其受體CMKLR1mRNA表達(dá)，并比較兩組間上述指標(biāo)的差異。2傳代培養(yǎng)人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞株（HA-VSMCs），采用不同濃度(0.1、1、10、100ug/L)chemerin干預(yù)，MTT法檢測各時(shí)間點(diǎn)(0h、1

3、2h、24h、48h)細(xì)胞增殖情況。采用chemerin(100ug/L)干預(yù)HA-VSMCs，western-blot法檢測各時(shí)間點(diǎn)(0、6、12、24、48h)α-SMA、cyclin D1、cyclinA蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:1.予高鹽高脂高糖飲食4周后，模型組大鼠血壓、血糖、血清甘油三酯、血清總膽固醇水平較正常對照組明顯升高(p＜0.05)，血清高密度脂蛋白水平明顯低于對照組(p＜0.05)，兩組間血清低密度脂蛋白水平無明

4、顯差異(p＞0.05);26周后，模型組大鼠血管管壁中膜厚度、中膜/內(nèi)徑比、chemerin及其受體CMKLR1 mRNA及蛋白表達(dá)均顯著高于對照組(p＜0.05)。2.Chemerin促進(jìn)HA-VSMCs增殖，其效應(yīng)呈濃度-時(shí)間依賴關(guān)系;以chemerin(100ug/L)干預(yù)VSMCs，α-SMA蛋白表達(dá)逐漸降低(p＜0.05); cyclin D1蛋白表達(dá)逐漸上升(p＜0.05)，至24h時(shí)表達(dá)最顯著;cyclinA蛋白表達(dá)無明顯