子宮內(nèi)膜癌自噬活性調(diào)節(jié)中AKT與ERK的作用及其相互調(diào)節(jié).pdf

1、研究目的： 探討子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系(Ishikawa細(xì)胞)中AKT與ERK信號蛋白對細(xì)胞自噬的影響，并進(jìn)一步探討子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系(Ishikawa細(xì)胞)自噬活性調(diào)節(jié)中，AKT對MEK/ERK通路和ERK對AKT/mTOR通路的調(diào)節(jié)作用。 材料與方法： 1、通過RNA干擾(RNAi)技術(shù)分別沉默I shikawa細(xì)胞中AKT/ERK2基因，然后利用免疫印跡法(Western Blot)檢測干擾后Ishikawa細(xì)胞中

2、LC3的表達(dá)水平，以明確細(xì)胞自噬活性變化。 2、通過RNAi技術(shù)分別沉默Ishikawa細(xì)胞中AKT/ERK2基因，然后利用免疫印跡法檢測干擾后Ishikawa細(xì)胞中MEK/ERK(p-MEK，p-ERK)或AKT/mTOR(p-AKT，p-mTOR)通路中相關(guān)分子的表達(dá)水平． 結(jié)果： 1、對AKT/ERK2進(jìn)行RNA干擾后，RNAi組Ishikawa細(xì)胞AKT/ERK1/2蛋白表達(dá)水平均相應(yīng)降低，有統(tǒng)計學(xué)差異(

3、P值均為0.00)。 2、對AKT進(jìn)行RNA干擾后，RNAi組LC3的表達(dá)顯著增高(P<0.05)，提示細(xì)胞自噬活性明顯上升；RNAi組MEK/ERK通路上p-ERK(P<0.05)和P-MEK表達(dá)顯著上升。 3、對ERK2進(jìn)行RNA干擾后，RNAi組LC3的表達(dá)顯著下降，提示RNAi組細(xì)胞自噬活性明顯下降；RNAi組Ishikawa細(xì)胞AKT/mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上p-AKT(P<0.05)和p-mTOR的表達(dá)均顯著下

4、降。 結(jié)論： 1、通過RNA干擾能成功地沉默子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中的AKT及ERK2基因。 2、下調(diào)AKT基因的表達(dá)，可增強(qiáng)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的自噬活性；下調(diào)ERK2基因的表達(dá)，可降低子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的自噬活性．AKT、ERK基因均參與了子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞自噬活性的調(diào)節(jié)。 3、下調(diào)AKT基因的表達(dá)，可促進(jìn)MEK/ERK通路的活化；下調(diào)ERK2基因的表達(dá)，可抑制AKT/mTOR的活化。AKT/mTOR與MEK/ERK通路之