Orexin在老年患者蘇醒延遲中的作用及其與組胺能神經(jīng)系統(tǒng)的相互調(diào)節(jié).pdf

1、第一部分:七氟烷-瑞芬太尼麻醉下行擇期腰椎手術的老年與青年患者血漿orexin-A表達水平差異的研究
　　背景:蘇醒延遲經(jīng)常發(fā)生于全麻的老年患者,但是其原因依然不清楚。研究發(fā)現(xiàn)orexin這一新型神經(jīng)遞質(zhì)促進了從麻醉到覺醒這一過程的轉(zhuǎn)化,并且在該過程中其表達水平上調(diào)。本研究的目的旨在揭示orexin遞質(zhì)釋放水平變化是否是老年患者蘇醒延遲的原因。
　　方法:研究共招募擬在全身麻醉下行擇期腰椎手術的患者41例。其中完成試驗的有3

2、4例患者(青年組:30-55歲,16例;老年組:65-77歲,18例)。術中采用靜吸復合全身麻醉,調(diào)整靜-吸復合麻醉藥量將腦電雙頻指數(shù)維持在45-65之間。記錄從停藥到患者睜眼睛、拔管時間。在麻醉前(T0)、誘導后1h(T1)、蘇醒時(拔管后5分鐘)(T2)和恢復期(拔管后30min)(T3)這四個時間點從患者橈動脈抽取動脈血2ml通過放射免疫檢測血漿orexin-A的含量。
　　結果:老年患者從停藥到患者睜眼睛、拔管時間均較青年

3、患者長(睜眼睛時間:11.8±/0.6minvs7.7±/1.2min,P=0.004;拔管時間:15.7±1.5minvs11.0±0.74min,P=0.01)。所測量的四個時間點老年患者血漿orexin-A的含量均較青年患者的高,與基礎值(T0老年組:26.13±1.25pg/ml,青年組:17.9±1.30pg/ml)相比誘導沒有引起血漿orexin-A的明顯變化,但是蘇醒期(T2)兩組患者的血漿orexin-A的含量均顯著升高

4、(老年組:35.0±1.7pg/ml,青年組:29.2±1.9pg/ml,P<0.0001)。
　　結論:血漿orexin釋放水平變化不是老年患者蘇醒延遲的原因,而orexin受體表達減少可能是引起覺醒延遲的原因。
　　第二部分:Orexinergic與histaminergic神經(jīng)系統(tǒng)相互作用機制
　　背景:組胺能神經(jīng)系統(tǒng)在覺醒方面具有重要作用,有研究表明組胺能神經(jīng)系統(tǒng)在orexin調(diào)節(jié)覺醒中發(fā)揮作用。然而,組胺能神

5、經(jīng)系統(tǒng)是否參與了orexin對麻醉—覺醒的調(diào)節(jié)尚不清楚。本文旨在探討異氟醚麻醉過程中,orexin神經(jīng)是否通過結節(jié)乳頭體核(Tuberomammillary Nucleus,TMN)組胺神經(jīng)元而介導發(fā)揮促進覺醒作用。
　　方法:成年雄性SD大鼠(體重230-280g),在10％水合氯醛麻醉下(1ml/kg,i.p.),(1)TMN核團微注射外套管與腦電監(jiān)測電極埋置術,7天后TMN核團雙側(cè)微注射orexin-A(100pmol/0.

6、3μL)及其拮抗劑SB334867(20μg/0.3μL)觀察大鼠誘導時間、覺醒時間以及腦電圖,大鼠翻正反射消失時間為誘導時間,大鼠翻正反射恢復時間為覺醒時間;(2)TMN核團微注射外套管與腦電監(jiān)測電極埋置術,7天后TMN核團雙側(cè)微注射orexin-B(100pmol/0.3μL)及其拮抗劑TCS-OX2-29(20μg/0.3μL)觀察大鼠誘導時間、覺醒時間以及腦電圖;(3)側(cè)腦室、TMN核團微注射套管與腦電電極埋置術,7天后側(cè)腦室微

7、注射組胺受體1拮抗劑曲普利啶25μg/1μL,TMN核團雙側(cè)微注射orexin-A(100pmol/0.3μL)或者orexin-B(100pmol/0.3μL)觀察大鼠誘導時間、覺醒時間以及腦電圖;(4)側(cè)腦室、TMN核團微注射套管與腦電電極埋置術,7天后側(cè)腦室微注射組胺受體2拮抗劑西咪替丁25μg/1μL,TMN核團雙側(cè)微注射orexin-A(100pmol/0.3μL)或者orexin-B(100pmol/0.3μL)觀察大鼠誘導

8、時間、覺醒時間以及腦電圖。將大鼠翻正反射消失時間記錄為誘導時間,大鼠翻正反射回復時間記錄為覺醒時間。以上四部分實驗均在麻醉前,在密閉容器內(nèi)預充異氟醚Isoflurane使得容器內(nèi)濃度為1MAC(1.4%),然后將大鼠置入該容器,觀察誘導時間、覺醒時間并全程記錄腦電圖。(5)逐步誘導大鼠。麻醉前30min側(cè)腦室分別微注射組胺H1受體拮抗劑曲普利啶(25μg/1μL)、H2受體拮抗劑西咪替丁(25μg/1μL),然后在麻醉前15min在TM

9、N核團微注射OX-A,麻醉時將大鼠置入密閉容器,然后將氧氣流量設為1L/min,揮發(fā)罐濃度設定到5%,記錄大鼠的誘導時間與覺醒時間。
　　結果:(1)常規(guī)誘導的各組大鼠,誘導時間無統(tǒng)計學差異。(2)在TMN核團微注射orexin-A(100pmol/0.3μL)與對照組(saline0.3μL)相比明顯縮短了大鼠的覺醒時間(16.19±0.87minvs24.17±3.22min,P<0.05),而微注射orexin-B(100p

10、mol/0.3μL)與對照組相比并沒有明顯影響大鼠的覺醒時間(20.17±1.62minvs24.17±3.22min,P>0.05)。(3)TMN核團微注射OX1R拮抗劑SB334867(20μg/0.3μL)與溶劑DMSO(0.3μL)組比延長了麻醉覺醒時間(34.96±1.51minvs26.60±2.37min,P<0.05),OX2R拮抗劑TCS-OX2-29(20μg/0.3μL)與溶劑DMSO(0.3μL)組相比并沒有明顯

11、影響大鼠的覺醒時間(24.47±2.07minvs26.60±2.37min,P>0.05)。(4)側(cè)腦室微注射組胺受體1拮抗劑曲普利啶對orexin-A引起的覺醒時間縮短沒有明顯影響(H1Ra+OX-Avssaline+OX-A:16.98±2.08minvs15.83±0.56min,P>0.05),而側(cè)腦室微注射組胺受體2拮抗劑西咪替丁,可以逆轉(zhuǎn)在TMN微注射orexin-A引起的覺醒時間縮短這一作用(H2Ra+OX-Avssal

12、ine+OX-A:22.60±2.30minvs15.83±0.56min,P<0.05),并且這一時間與對照組無統(tǒng)計學差異(H2Ra+OX-Avssaline+saline:22.60±2.30minvs23.83±1.34min,P>0.05)。(5)逐步誘導結果顯示:與對照組相比,TMN核團微注射OX-A明顯延遲了誘導時間(saline+OX-Avssaline+saline:3.20±0.07minvs4.90±0.07min,

13、P<0.05),側(cè)腦室微注射組胺H1受體拮抗劑曲普利啶(25μg/1μL)(H1Ra+OX-A:4.90±0.20min)沒有改變OX-A引起的誘導時間的延長(P>0.05),但是H2受體拮抗劑西咪替丁(25μg/1μL)側(cè)腦室注射(H2Ra+OX-A:3.15±0.05)逆轉(zhuǎn)了OX-A引起的誘導時間的延長且與對照組無統(tǒng)計學差異。
　　結論:本研究首次用直接實驗證據(jù)證實orexin神經(jīng)信號可激活組胺能神經(jīng)系統(tǒng)從而促進麻醉向覺醒的轉(zhuǎn)