Orexin及其受體變化在老年大鼠全麻覺醒延遲中的機制研究.pdf

1、隨著我國逐漸步入老年社會，越來越多的老年病人正在接受醫(yī)療系統(tǒng)服務，在未來這一趨勢將逐年增加。通過臨床觀察，我們發(fā)現(xiàn)老年病人在全麻覺醒階段較青年人顯著延長。有觀點認為：隨著年齡的增長老齡人群出現(xiàn)多器官系統(tǒng)整體生理功能減低并伴隨慢性疾病，正是這種內(nèi)環(huán)境的改變使機體藥物代謝率減慢從而影響麻醉覺醒時間，然而對于依賴機體藥物代謝較小的吸入麻醉藥物這一現(xiàn)象依然存在[1]。在臨床實踐中處理吸入麻醉藥物引起的老年病人蘇醒延遲這一問題時，目前麻醉醫(yī)生除了

2、依靠機械換氣，改變體內(nèi)藥物濃度，目前還沒有可靠干預辦法[2]。是何種機制影響麻醉覺醒，如何從分子生物學角度對不同年齡人群麻醉覺醒進行合理解釋，成為早期預防及處理該現(xiàn)象發(fā)生一種有效方法。
　　經(jīng)典的全身麻醉是由吸入麻醉藥物引起的行為和生理現(xiàn)象產(chǎn)生-神志不清，健忘，和運動不能與心血管，呼吸和體溫調(diào)節(jié)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。通過使用動態(tài)腦電圖描記方法記錄全身麻醉、睡眠、比較兩種腦電圖表現(xiàn)并不完全相同，全身麻醉過程中出現(xiàn)腦電“寂靜”于淺昏迷相似，但

3、兩種腦電表現(xiàn)在覺醒階段卻具有一致性且極為相似[3]。
　　下丘腦腹外側區(qū)具有日周期節(jié)律活動，這一區(qū)域是體內(nèi)日周期節(jié)律活動的控制中心在整個睡眠覺醒調(diào)節(jié)機制中這一調(diào)節(jié)作用呈“網(wǎng)狀”[4]。1998年日本學者Yanigasawa領導的研究小組發(fā)現(xiàn)的一種新型的神經(jīng)肽Orexin，orexin位于下丘腦腹外側區(qū)，orexin不僅有能促進控制攝食行為的作用，同時參與覺醒周期、能量代謝、以及對心血管及自主神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)[5]。目前研究認為ore

4、xin在睡眠-覺醒機制中起著重要作用，隨著研究的深入人們發(fā)現(xiàn)orexin可以明顯減少吸入麻醉藥物的麻醉時間使麻醉大鼠腦電圖出現(xiàn)‘覺醒’樣改變[6]。但就年齡因素對orexin覺醒機制的影響目前還沒有詳細報道。
　　本研究以老年大鼠吸入麻醉藥物異氟醚、七氟醚為麻醉模型，使用神經(jīng)行為學、腦電監(jiān)測方法觀察大鼠翻正反射時間，通過在麻醉過程中的典型腦電改變評估麻醉狀態(tài)。采取免疫熒光組化、RT-PCR、放射免疫法生物學技術，研究orexin-

5、A及受體(1,2)隨年齡分布不同對多年齡組大鼠覺醒時間的影響。探討年齡因素對orexin-A及受體在全麻覺醒機制中的相關問題。結果如下
　　1、建立腦電監(jiān)測大鼠吸入麻醉行為學模型并分析腦電結果
　　通過分析腦電監(jiān)測結果我們觀察到大鼠在全麻過程中出現(xiàn)典型腦電循環(huán)，將腦電結果對比行為學觀察結果得出翻正發(fā)射消失、恢復時間于腦電誘導、覺醒時間一致。實驗所使用的行為學全身麻醉觀測圓筒吸入麻醉藥物混合氣體濃度穩(wěn)定，實驗用動物腦電監(jiān)測模型

6、結果客觀，可以準確的反應吸入全身麻醉整體過程。對多年齡組大鼠腦電結果統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，腦電監(jiān)測可以準確反應麻醉深度，所有大鼠均出現(xiàn)麻醉腦電循環(huán)。
　　2、老齡大鼠麻醉行為學改變及腦電監(jiān)測覺醒階段的比較
　　老齡大鼠在使用異氟醚、七氟醚兩種經(jīng)典吸入麻醉藥物處理后，吸入麻醉藥物引起的麻醉誘導時間于青年組無差異，而覺醒時間較青年組顯著延長。這種延遲可以通過典型行為學變化判斷，并且通過典型腦電圖改變證實。使用相同處理方式、處理環(huán)境、并使用腦

7、電監(jiān)測發(fā)現(xiàn)老年組大鼠從麻醉開始向淺麻醉過渡直至深麻醉階段于青年組一致，整個誘導過程組間無差異。而老年大鼠從深麻醉階段向淺麻醉階段過渡直至覺醒雖麻醉深度一致，但老年組大鼠整個覺醒過程較青年組顯著延長。
　　3、使用分子生物學監(jiān)測兩組大鼠的orexin及受體（1，2）表達
　　使用免疫熒光組化細胞計數(shù)方法，發(fā)現(xiàn)老年組orexin陽性神經(jīng)元較青年組增高，該結果通過較客觀的放射免疫法和RT-PCR證實。同時發(fā)現(xiàn)orexin受體（1，