EMP暴露對(duì)雄鼠生殖內(nèi)分泌功能的影響及其相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、電磁脈沖(Electromagneticpulse，EMP)是一種前沿快、頻譜寬的高能電磁波，在工業(yè)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用日益廣泛，其生物學(xué)效應(yīng)已成為學(xué)術(shù)界研究的熱點(diǎn)。隨著未來生存環(huán)境中電磁污染的持續(xù)增加，揭示電磁輻射對(duì)健康的潛在危害及其機(jī)理已成為相關(guān)學(xué)科共同面臨的重要課題。
　　大量研究表明電磁輻射具有生殖內(nèi)分泌毒性和遺傳毒性。親代電磁輻射暴露對(duì)雄性子代生殖健康的遠(yuǎn)期遺傳毒性也已有報(bào)道，但其相關(guān)機(jī)制尚不明確。下丘腦-垂體-性腺軸(H

2、ypothalamic-pituitary-gonadalaxis，HPGA)是調(diào)控動(dòng)物生殖系統(tǒng)發(fā)育和功能的核心。抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid，GABA)是其中重要的調(diào)節(jié)物質(zhì)，它主要通過下丘腦中其A型受體調(diào)節(jié)促性腺激素釋放激素（Gonadotropin-releasinghormone，GnRH）分泌，促使腺垂體分泌相關(guān)激素，實(shí)現(xiàn)生殖內(nèi)分泌功能的調(diào)控，因此下丘腦GABAA受體的正常表達(dá)對(duì)生殖內(nèi)分泌功能

3、的調(diào)控起著重要的作用。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，一定強(qiáng)度EMP輻照后可引起雄性子代下丘腦GABA含量升高。
　　基于以上的理論基礎(chǔ)及研究結(jié)果，本實(shí)驗(yàn)以SD大鼠為研究對(duì)象，從形態(tài)結(jié)構(gòu)、激素水平和神經(jīng)遞質(zhì)等方面，采用免疫組織化學(xué)法、放射免疫測(cè)定法、熒光定量PCR等方法，研究EMP輻照后對(duì)雄性大鼠及雄性子代生殖內(nèi)分泌功能的影響，并探討其相關(guān)機(jī)制。
　　目的:
　　探討EMP輻照對(duì)雄性大鼠及雄性子代大鼠生殖內(nèi)分泌功能的影響及其相關(guān)機(jī)制

4、。
　　方法:
　　1、幼齡（5周齡）和成年（8周齡）雄性SD大鼠分別接受200kV/m，400次脈沖的EMP輻照后，采用放射免疫測(cè)定法檢測(cè)不同周齡大鼠血清中促性腺激素釋放激素（GnRH）、卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）和睪酮（T）的水平；采用Westernblot法觀察EMP輻照后不同周齡雄性大鼠下丘腦中GABAA受體的表達(dá)變化。
　　2、親代雄性大鼠交配前接受200kV/m，0次、100次或400次脈沖E

5、MP輻照后：
　?。?）采用光鏡和電子顯微鏡觀察EMP輻照后其雄性子代垂體和睪丸結(jié)構(gòu)的變化；
　　（2）采用放射免疫測(cè)定法（RIA）檢測(cè)其雄性子代血清激素的水平的變化，采用明膠薄膜法觀察子代大鼠精子頂體酶的反應(yīng)，觀察子代精子數(shù)量、畸形率及其交配行為的變化；
　　（3）采用高效液相色譜法檢測(cè)雄性子代下丘腦GABA含量，采用Westernblot、免疫組織化學(xué)方法和熒光定量PCR觀察雄性子代下丘腦GABAA受體的表達(dá)變化。

6、
　　結(jié)果:
　　1、EMP輻照對(duì)不同周齡雄性大鼠血清激素水平的影響：雄性成年大鼠血清T水平輻照后0.5h和12h顯著降低（P<0.05），血清GnRH水平在輻照后6h、48h顯著升高（P<0.05）；雄性幼齡大鼠血清T水平在輻照后0.5h和3h顯著降低（P<0.05），血清GnRH水平在輻照后各時(shí)間點(diǎn)有波動(dòng)，輻照后12h明顯升高（P<0.05）；幼齡和成年大鼠經(jīng)EMP輻照后FSH、LH含量均無顯著性變化。
　　2、E

7、MP輻照對(duì)不同周齡雄性大鼠下丘腦GABAA受體水平的影響：與對(duì)照組相比，成年大鼠下丘腦GABAA受體在EMP輻照后0.5h顯著增加（P<0.05），持續(xù)至輻照后6h（P<0.05），隨后逐漸減少，至輻照后48h時(shí)又顯著增加（P<0.05）；幼齡大鼠下丘腦GABAA受體在輻照后3h和12h增加顯著（P<0.05），隨后逐漸減少，至輻照后48h時(shí)恢復(fù)至正常水平。
　　3、親代EMP輻照對(duì)雄性子代垂體和睪丸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響：光鏡下觀察到輻

8、照組垂體和睪丸組織結(jié)構(gòu)均無明顯改變；電鏡下觀察到輻照組垂體有輕度的線粒體腫脹和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，睪丸精原細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)不同程度內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、線粒體腫脹和空泡化現(xiàn)象。
　　4、親代EMP輻照對(duì)雄性子代激素及精子形態(tài)功能的影響：親代大鼠接受EMP輻照后其雄性子代血清T水平顯著降低（P<0.05），精子數(shù)量減少（P<0.05），精子頂體酶反應(yīng)明顯降低，但對(duì)子代垂體和睪丸結(jié)構(gòu)、精子畸形率和交配行為無明顯變化。
　　5、親代EMP輻照對(duì)雄

9、性子代下丘腦GABAA受體的影響：與對(duì)照組相比，輻照組子代下丘腦GABAA受體mRNA表達(dá)較對(duì)照組子代明顯升高，分別為對(duì)照組的1.12倍和2.04倍；輻照組子代下丘腦中神經(jīng)遞質(zhì)GABA和GABAA受體蛋白含量明顯升高（P<0.05）；輻照組子代下丘腦弓狀核GABAA受體陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)增多，光密度值顯著增高，100次脈沖組子代室旁核GABAA受體陽(yáng)性神經(jīng)元顯著增多，400次脈沖組光密度值顯著增高（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　

10、　1、不同周齡雄性SD大鼠接受200kV/m，400次脈沖的EMP輻照后可引起輻照后不同時(shí)間點(diǎn)血清激素GnRH、T含量的改變，可引起GABAA受體含量呈波動(dòng)樣變化。
　　2、親代雄性大鼠交配前接受200kV/m，100次或400次脈沖EMP輻照后可引起其雄性子代血清T水平下降、精子數(shù)量減少、精子質(zhì)量下降和GABA含量及GABAA受體表達(dá)的升高。
　　3、在本實(shí)驗(yàn)條件下EMP對(duì)雄性大鼠及雄性子代生殖內(nèi)分泌功能有一定程度影響，其