花鰻鱺生殖內(nèi)分泌的初步研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文花鰻鱺生殖內(nèi)分泌的初步研究姓名：黃海申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：林浩然張勇20090606花鰻鱺生殖內(nèi)分泌的初步研究1通過統(tǒng)計分析花鰻鱺的雌雄形態(tài)學(xué)差異，建立了判別函數(shù)，為人工繁殖中親魚的選擇提供科學(xué)依據(jù)。結(jié)果顯示，體長80cm以上的全為雌魚，6070cm之間的雄魚居多(849％)，50cm以下的性腺發(fā)育不明顯；采用Hotelling’STrace方法進(jìn)行多因變量方差分析表明，花鰻鱺雌雄個體存在形態(tài)學(xué)差異

2、；采用Duncan’s方法進(jìn)行單因子方差分析表明，體重、體長、體高、頭長、頭高、胸鰭長、腹圍、吻寬、眼間距、體長／體重10個指標(biāo)間存在顯著性差異(p005)，通過主成分分析、判別分析，建立的判別函數(shù)，平均判別準(zhǔn)確率為879％。2采用Invitrogen公司的Clonemin矗Ⅲ文庫構(gòu)建試劑盒構(gòu)建了花鰻鱺腦eDNA文庫。經(jīng)檢測，文庫的滴度為43x106pfu／mL，總?cè)萘繛?16x107pfu，重組率996％，插入片段04332kb之間，

3、平均插入片段大小為1532bp，說明該文庫的質(zhì)量很高。本研究還以文庫為PCR模板，利用根據(jù)日本鰻鱺GnRHcDNA序列設(shè)計的特異性引物，克隆得到花鰻鱺兩種GnRH(mGnRH、cGnRHII)的eDNA序列，進(jìn)一步證實(shí)了所構(gòu)建eDNA文庫的質(zhì)量與利用價值。3本研究還克隆獲得了促性腺激素的GTHa、FSHl3、LHp亞基以及促性腺激素受體(FSHR、LHR)的eDNA序列。RTPCR結(jié)果顯示，mGnRHmRNA除了在腦、垂體、下丘腦等中樞

4、神經(jīng)組織和性腺中有表達(dá)外，也廣泛分布于其他外周組織，cGnRHIImRNA只在腦和性腺中有表達(dá)。GTHa、FSHl3、LHl3mRNA不僅在垂體中有表達(dá)，而且在性腺中也有較高的表達(dá)。另外，在腦、腎臟和鰓等組織中也有表達(dá)。FSHR和LHRmRNA主要在性腺中表達(dá)。4養(yǎng)殖花鰻鱺雌雄個體性腺成熟系數(shù)(GSI)和肝體指數(shù)(HSI)在不同季節(jié)間差異不顯著。其中，雌魚和雄魚的平均GSl分別為081％099％，O06％009％；雌魚和雄魚的平均HSI