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文檔簡介
1、目的:隨著腦功能研究的深入,越來越多的研究者研究領(lǐng)域從神經(jīng)元轉(zhuǎn)向膠質(zhì)細胞,從生理情況轉(zhuǎn)向病理狀態(tài)。本研究觀察腦缺血再灌注后缺血邊緣區(qū)海馬和皮層NG2的動態(tài)表達,探討其表達變化在腦缺血再灌注損傷后的神經(jīng)損傷與修復過程中所起的作用。
方法:制備大鼠局灶性大腦中動脈阻塞再灌流(MCAO)模型,清潔級wistar雄性大鼠45只,體重200-250g,隨機分為假手術(shù)組(Sham)和腦缺血再灌注(MCAO)組,腦缺血再灌注組采用線栓法
2、制備大鼠大腦中動脈阻塞再灌流模型,假手術(shù)組不插入線栓。術(shù)后3d、7d、30d處死大鼠,采用TTC染色法觀察腦缺血后梗死灶;用尼氏染色法觀察腦缺血后大鼠海馬神經(jīng)元的變化;免疫組織化學法和共聚焦顯微鏡成像觀察sham組及腦缺血后3d、7d、30d不同時間點缺血側(cè)的海馬CA1區(qū)和缺血邊緣區(qū)NG2的動態(tài)表達情況,采用NIH圖像處理系統(tǒng)進行圖像分析。各只動物隨機抽取5個不相重復的200x視野圖片測量NG2的光密度值。所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準誤(±SE
3、M)表示,統(tǒng)計處理應用SPSS11.5軟件包,各實驗組數(shù)據(jù)的比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA),繼以LSD進行兩組間差異性檢驗。
結(jié)果:1.TTC染色觀察到缺血灶,線栓法制作的腦缺血再灌注模型有穩(wěn)定的梗塞灶。2.尼氏染色觀察到腦缺血再灌注后神經(jīng)元丟失。3.免疫組織化學法觀察到:(1)缺血后海馬CA1區(qū)NG2的表達變化:正常組NG2在海馬區(qū)有表達,缺血后3d NG2表達增強,但與Sham組相比無統(tǒng)計學意義(
4、P>0.05),缺血后7d NG2熒光強度較對照組也明顯增強(P<0.01),缺血后30d NG2表達相對Sham組仍顯著增強(P<0.01),但低于缺血后7d組(P<0.05)。(2)缺血后皮層區(qū)NG2的表達變化:正常組NG2在皮層區(qū)有表達,缺血后3d、7d、30d與Sham組相比NG2均表達增強(P<0.01),與缺血后3d、30d相比,缺血后7d NG2的表達明顯增強(P<0.01)。
結(jié)論:腦缺血缺血邊緣區(qū)NG2陽
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