髖臼軟骨急性沖擊傷的MRI診斷及病理實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文研究目的：建立兔髖臼軟骨急性沖擊傷的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，觀察分析髖臼軟骨損傷后的病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)演變，比較研究MRI診斷髖臼軟骨沖擊傷的方法和價(jià)值，為髖臼軟骨沖擊性損傷防治尋求理想的診斷方法并奠定理論基礎(chǔ)。 方法：整個(gè)實(shí)驗(yàn)分為三部分進(jìn)行： 第一部分：髖臼軟骨沖擊性損傷動(dòng)物模型的制備與病理研究 選用新西蘭大白兔50只，隨機(jī)分配到24h、2周、6周、3月、6月時(shí)間組。每組10只中，5動(dòng)物用600牛頓力沖擊，5只動(dòng)物用300

2、牛頓力沖擊，隨機(jī)選取一側(cè)后肢為實(shí)驗(yàn)組，另一側(cè)為對(duì)照組。在各觀察時(shí)間點(diǎn)分期取材行大體觀察，HE染色光鏡下觀察軟骨損傷的病理變化，透射電鏡觀察軟骨損傷的超微結(jié)構(gòu)變化，采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行軟骨細(xì)胞正常、凋亡、死亡數(shù)定量，熒光顯微鏡進(jìn)行分布定位等方法觀察髖臼軟骨損傷整個(gè)病理變化過程。 第二部分：髖臼軟骨沖擊傷與MRI參數(shù)優(yōu)化的多序列成像 使用目前臨床常用的7種MRI成像序列，對(duì)髖臼軟骨損傷模型進(jìn)行掃描，參數(shù)優(yōu)化，以病理作對(duì)照，計(jì)算

3、不同序列對(duì)診斷軟骨損傷的敏感性和特異性，比較研究各序列的優(yōu)缺點(diǎn)及其應(yīng)用價(jià)值。 第三部分：髖臼軟骨損傷后細(xì)胞合成功能的變化研究 采用放射自顯影技術(shù)，在取材前兩天行關(guān)節(jié)內(nèi)注入氚標(biāo)的脯氨酸，利用同位素標(biāo)記示蹤，觀察殘存軟骨細(xì)胞合成軟骨基質(zhì)功能的改變。 結(jié)果： 600牛頓力組24h后鏡下見有軟骨細(xì)胞壞死；2周后出現(xiàn)軟骨細(xì)胞增生；6周后受損軟骨殘存細(xì)胞變小，排列紊亂，細(xì)胞趨向于成纖維細(xì)胞樣變，也可出現(xiàn)殘存的軟骨細(xì)胞

4、增生；3月后受損的軟骨著色淺淡，殘存的軟骨細(xì)胞較少，其中有細(xì)胞簇集性增生，在受損軟骨區(qū)可出現(xiàn)雙潮標(biāo)；6月后受損軟骨細(xì)胞大部分死亡，受損軟骨旁軟骨表面纖維化，軟骨開始脫落。受損軟骨殘存細(xì)胞簇集性增生更明顯，可出現(xiàn)由于增生細(xì)胞全部死亡后留下的空腔。損傷軟骨旁出現(xiàn)軟骨細(xì)胞排列紊亂，表層軟骨細(xì)胞減少，深層軟骨細(xì)胞叢集性增生及軟骨吸收鈣化。 300牛頓力組24h后鏡下未見壞死；2～6周后出現(xiàn)軟骨細(xì)胞增生；3～6月后受損軟骨厚度變厚，細(xì)胞層

5、數(shù)增加，排列大致呈柱狀，軟骨陷窩清楚，有較多增生的同源細(xì)胞群，細(xì)胞核大，呈圓形，周圍基質(zhì)染色均勻整齊，表層細(xì)胞數(shù)量較少，部分細(xì)胞核固縮。 造模24h和2周后，600牛頓及300牛頓組受損軟骨在透射電鏡下可見軟骨細(xì)胞凋亡，600牛頓組還可見到壞死軟骨細(xì)胞；6周---6月后，軟骨細(xì)胞以凋亡為主。 熒光顯微鏡下觀察300牛頓組可見死亡軟骨細(xì)胞位于表層，600牛頓組熒光顯微鏡下死亡軟骨細(xì)胞位于全層。 流式細(xì)胞儀檢測(cè)軟骨細(xì)

6、胞凋亡對(duì)照側(cè)正常的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞經(jīng)膠原酶消化后，有87±10％的細(xì)胞正常，10±6％的細(xì)胞死亡，5±3％的軟骨細(xì)胞凋亡。 300牛頓組軟骨損傷24h后死亡細(xì)胞為¨±6％，凋亡細(xì)胞為7±3％，正常細(xì)胞為78±10％；2周后死亡細(xì)胞為11±7％，凋亡細(xì)胞為20±3％，正常細(xì)胞為68±¨％；6周后死亡細(xì)胞為10&7％，凋亡細(xì)胞為35±3％，正常細(xì)胞為53±11％；3月后死亡細(xì)胞為lO±6％，凋亡細(xì)胞為32±5％，正常細(xì)胞為56±9％；6

7、月后死亡細(xì)胞為10±5％，凋亡細(xì)胞為31±6％，正常細(xì)胞為57±9％。 600牛頓組軟骨損傷24h后死亡細(xì)胞增多為20±9％，凋亡細(xì)胞為7±4％，正常細(xì)胞為70±¨％；2周后死亡細(xì)胞為14±9％，凋亡細(xì)胞為35±9％，正常細(xì)胞為50±12％；6周后死亡細(xì)胞為12±9％，凋亡細(xì)胞為68±8％，正常細(xì)胞為18±9％；3月后死亡細(xì)胞為12±8％，凋亡細(xì)胞為60&9％，正常細(xì)胞為26±7％：6月后死亡細(xì)胞為¨±7％，凋亡細(xì)胞為59±¨％

8、，正常細(xì)胞為25±8％。 損傷24h后600牛頓組以死亡細(xì)胞為主，600牛頓組死亡細(xì)胞比300牛頓組多(經(jīng)t檢驗(yàn)分析兩者差異顯著P<0．01)；損傷2周后，兩組損傷部細(xì)胞凋亡均增多，但600牛頓細(xì)胞凋亡多(經(jīng)t檢驗(yàn)分析兩者差異顯著P<0．01)；損傷6周后，兩組凋亡細(xì)胞比損傷2周時(shí)均增多(經(jīng)t檢驗(yàn)分析兩者差異顯著P<0．01)；損傷后3月及6月600牛頓組均有軟骨細(xì)胞凋亡增多，但較6周時(shí)少。 7個(gè)序列中T2／T／FSE診

9、斷關(guān)節(jié)軟骨病理改變最佳，T；／T／FSE及PD／T／FSE序列也有一定診斷作用，7個(gè)序列均可明確診斷骨挫傷。 600牛頓組殘存的軟骨細(xì)胞24h到2周后不能吸收脯氨酸合成膠原蛋白；6周后，損傷處部分細(xì)胞膠原蛋白合成功能恢復(fù)，3月到6月后可見殘存的細(xì)胞大量簇集性增生。 300牛頓組殘存的軟骨細(xì)胞24h后部分吸收脯氨酸合成膠原蛋白，2周到6月逐漸增多，6周后可見簇集性增生。 結(jié)論： 1．600牛頓力可立即導(dǎo)致細(xì)