“雙固一通”針法對糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的觀察“雙固一通”針法對糖尿病大鼠的治療作用及對胰島素受體和受體后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的調(diào)控作用，探討其對糖尿病胰島素抵抗的作用機(jī)制。 方法1.“雙固一通”針法簡介：來源于導(dǎo)師王華教授的“雙固一通”針灸治療學(xué)思想，針灸防治疾病注重治病求本，以正氣為本，固護(hù)先天和后天是其基礎(chǔ)和關(guān)鍵；通過“治”來達(dá)到“防”的目的，“治”是積極的、主動的“防”。雙固，即固護(hù)人體先天之本和后天之本，選用具有固護(hù)先天(元?dú)?的關(guān)元(或腎俞)和固護(hù)后天(胃氣)的

2、足三里(或三陰交)為主穴，固定使用；“一通”即疏通經(jīng)脈，通瀉病邪，用穴為阿是穴或隨證取穴。本課題所采用的“雙固一通”針法，即選取固護(hù)正氣的足三里和關(guān)元為主穴，配用治療糖尿病的經(jīng)驗(yàn)穴胰俞進(jìn)行針刺。 2.實(shí)驗(yàn)方法：180-220gWistar大鼠60只，10只為正常對照(A組)，另50只行鏈脲左菌素腹腔注射造模，造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組(B組)、“雙固一通”常規(guī)電針組(C組)和“雙固一通”強(qiáng)刺激電針組(D組)，進(jìn)行2個療程的治療

3、，每個療程6天，療程間隔2天。用血糖儀檢測血糖；運(yùn)用放射免疫分析法檢測各組血漿胰島素，并計(jì)算胰島素敏感指數(shù)；免疫細(xì)胞化學(xué)SABC法檢測肝臟胰島素受體β亞單位(insulinreceptorβ，InsRβ)、磷脂酰肌醇3-激酶p110亞單位(Phosphatidylinositol3-kinasep110，PI-3Kp110)表達(dá)；原位雜交法檢測肝臟肝臟葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子-4(Glucosetransporter-4，GLUT4)mRNA表達(dá)；

4、運(yùn)用圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行肝臟InsRβ、PI-3Kp110和GLUT-4mRNA免疫陽性物檢測。 結(jié)果1.C組和D組均明顯降低糖尿病大鼠的血糖水平(P＜0.05)，使降低的胰島素水平有升高的趨勢(P＜0.05)，使糖尿病大鼠胰島素敏感性指數(shù)升高(P＜0.05)；C組和D組使糖尿病大鼠的飲水、進(jìn)食量有不同程度的減少(P＜0.05)，體重較模型組增加(P＜0.05)，兩組療效間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 2.糖尿病大鼠肝臟I

5、nsRβ免疫陽性物平均吸光度值較正常大鼠明顯減少(P＜0.05)，C組和D組均使糖尿病大鼠肝臟InsRβ表達(dá)顯著增多(P＜0.05)，兩組間療效無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。。 3.糖尿病大鼠肝臟PI-3Kp110免疫陽性物平均吸光度值較正常大鼠明顯減少(P＜0.05)，C組和D組均使糖尿病大鼠肝臟PI-3Kp110表達(dá)顯著增多(P＜0.05)，兩組間療效無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 4.糖尿病大鼠肝臟GLUT4mRN

6、A免疫陽性物平均吸光度值較正常大鼠明顯減少(P＜0.05)，C組和D組均使糖尿病大鼠肝臟GLUT4mRNA表達(dá)顯著增多(P＜0.05)，兩組間療效無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 結(jié)論1.“雙固一通”針法能顯著改善糖尿病大鼠多飲、多食和體重減輕等癥狀；降糖作用確切，使胰島素水平上升，改善了糖尿病大鼠的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。 2.“雙固一通”針法能顯著增加糖尿病大鼠肝臟減少的InsRβ、PI-3Kp110表達(dá)及GLUT4基因表達(dá)，

7、這可能是其影響胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路從而改善糖尿病胰島素抵抗的重要環(huán)節(jié)。 3.“雙固一通”針法通過對胰島素受體和受體后信號分子及其基因表達(dá)的調(diào)節(jié)，對糖尿病大鼠異常的胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮調(diào)控作用，從多個環(huán)節(jié)改善糖尿病胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)； 4.本課題為闡釋“雙固一通”針法改善糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用機(jī)制提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)； 5.不同電針強(qiáng)度“雙固一通”針法在改善糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用效應(yīng)中無差異，即短暫強(qiáng)刺激電針在