L-肉堿在體外對人精子相關(guān)參數(shù)的影響.pdf

1、目的:通過測定不同濃度、不同作用時間L-肉堿在體外對正常精液組和弱精癥組精子活力、活率、膜完整性、線粒體膜電位以及精子凋亡的影響,評價其對男性不育癥的治療效果。
　　 方法:根據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)分類,選取50例正常精液和50例弱精子癥精液。手淫法取得全份精液標(biāo)本。將不同濃度(0.4mmol/L、4mmol/L、40mmol/L、400mmol/L)L-肉堿在體外分別與經(jīng)處理的兩組精子在37℃,5％CO2共同孵育,同時設(shè)立自身正?？瞻讓?/p>

2、照組,于40min、2h、24h時分別對它們運用計算機(jī)輔助精液分析(CASA)系統(tǒng)進(jìn)行精液常規(guī)分析,觀察精子運動參數(shù)變化；低滲腫脹(HOS)試驗檢測精子膜的完整性；另對孵育40min的各組利用熒光探針JC-1標(biāo)記精子線粒體,在熒光分光光度計上檢測JC-1熒光強(qiáng)度的變化；用TUNEL一步染色法,通過熒光顯微鏡檢測精子細(xì)胞的凋亡情況。
　　 結(jié)果:
　　 1.與自身空白對照組相比,正常精液組與L-肉堿共同孵育后,在添加一定濃

3、度后(0.4mmol/L-40mmol/L)不同作用時間精子活率、活力未見明顯改變,無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；L-肉堿共同孵育對線粒體膜電位、精子凋亡率亦未見明顯改變,無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；4mmol/L組在L-肉堿作用40min、24h時精子尾部腫脹率均明顯升高,差異顯著(P<0.05)。
　　 2.與自身空白對照組相比,在相同條件下,弱精癥4mmol/L組,不同孵育時間其精子活率、活力、膜完整性、線粒體膜電位均顯

4、著升高,精子凋亡率顯著下降,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
　　 3.當(dāng)L-肉堿添加濃度達(dá)到400mmol/L時,無論是正常精子組或弱精癥組,精子活率、活力、膜完整性、線粒體膜電位均顯著下降,精子凋亡率顯著升高,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 在精子的體外實驗中:
　　 1.對于弱精癥患者,一定濃度的L-肉堿可提高人精子的活力、活率,提高膜的完整性,提高線粒體膜電位,使精子凋亡率下降；

5、
　　 2.對于正常精液,適當(dāng)濃度L-肉堿可提高膜的完整性,但對精子活力、活率、線粒體膜電位、精子凋亡率無明顯改變；
　　 3.當(dāng)L-肉堿添加濃度達(dá)到40mmol/L時,對人精子有毒性作用。
　　 此實驗為提高精子體外處理中的運動功能,對弱精癥的治療提供了一定的理論基礎(chǔ):其一,L-肉堿為脂肪酸氧化提供能量,提高精子運動能力；其二,L-肉堿可維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定,保持膜的完整性,提高精子的存活率；其三,L-肉堿可對抗氧