嬰幼兒巨細(xì)胞病毒臨床分離株及特定基因與臨床疾病相關(guān)性的研究.pdf

1、本論文由三部分組成：湖南省感染巨細(xì)胞病毒嬰幼兒臨床病毒分離及流行病學(xué)調(diào)查；HCMV包膜糖蛋白B（gB）基因型分析；臨床分離株抗病毒藥物的耐藥性分析。 （一）將臨床有癥狀，HCMV DNA拷貝數(shù)≥103～107/ml的0～1歲的嬰幼兒尿液接種于人胚肺（HEL）細(xì)胞培養(yǎng)．對(duì)尿液接種出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）的患兒母子進(jìn)行IgG、IgM統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)患兒的血常規(guī)、生化指標(biāo)以及疾病類(lèi)型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：先天性感染以神經(jīng)腦損傷為主

2、，嬰兒出生后出現(xiàn)大腦發(fā)育畸形，智力低下，二側(cè)神經(jīng)性耳聾伴隨運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性障礙等癥狀。HCMV感染引起嬰幼兒肺炎、肝炎、腎炎、腸炎及貧血。 （二）隨機(jī)抽樣CPE陽(yáng)性的8株病毒，提取全部基因組，通過(guò)套式聚合酶鏈反應(yīng)（nPCR），加限制性長(zhǎng)度多態(tài)性分析（RFLP），對(duì)各臨床株病毒gB進(jìn)行亞型分析，探討了湖南省嬰幼兒臨床病毒株的gB基因型分布，以及gB基因型與疾病類(lèi)型的關(guān)系，對(duì)UL55基因目的片段進(jìn)行基因測(cè)序，并進(jìn)行了序列分析和同源性比較。

3、結(jié)果顯示：我省嬰幼兒HCMV感染以gB1型為主；8株HCMV臨床分離株的同源性高達(dá)98.5％。與HCMV AD169及Towne株的DNA序列比較，它們之間的序列相似性分別達(dá)到94.8％和97.0％． （三）抽取嬰幼兒臨床株進(jìn)行耐藥性分析：（1）表現(xiàn)型方法測(cè)定：對(duì)HEL細(xì)胞培養(yǎng)CPE陽(yáng)性臨床敏感株，觀察對(duì)更夕洛韋、磷甲酸鈉和黃芪的藥物敏感情況，結(jié)果表明：HCMV臨床病毒株對(duì)更昔洛韋≥6.25ug/ml和膦鉀酸鈉≥50ug/ml敏