MBL基因多態(tài)性與嬰幼兒呼吸道感染疾病的相關(guān)性研究.pdf

1、通過測定不同組別研究對象的甘露聚糖結(jié)合凝集素(MBL)的血漿水平及其基因第1外顯子第52、54、57位密碼子的堿基序列，了解甘露聚糖結(jié)合凝集素基因多態(tài)性的分布情況。并通過比較不同組別研究對象的甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率以及血漿水平，探討甘露聚糖結(jié)合凝集素GTC等位基因與嬰幼兒呼吸道感染疾病的相關(guān)性，及其血漿水平與GTC等位基因的相關(guān)關(guān)系。從而加深對甘露聚糖結(jié)合凝集素免疫功能的了解，以及毛細(xì)支氣管炎、急性上呼吸道感

2、染、反復(fù)呼吸道感染等呼吸道疾病的發(fā)病機(jī)制的了解，更好地防治嬰幼兒呼吸道感染性疾病，促進(jìn)兒童的心身健康。
　　 二研究對象、內(nèi)容與方法:
　　 (一)研究對象
　　 1.毛細(xì)支氣管炎組
　　 50例2005年至2006年在我院住院治療的毛細(xì)支氣管炎患兒，年齡6個(gè)月至2歲，其中男孩27例，女孩23例，均為漢族，符合診斷標(biāo)準(zhǔn)，無嚴(yán)重合并癥，排除合并反復(fù)呼吸道感染者。
　　 2.反復(fù)呼吸道感染組
　

3、　 50例2005年至2006年在本院就診的反復(fù)呼吸道感染患兒，其中男孩24例，女孩26例，年齡6個(gè)月至2歲，均為漢族，符合診斷標(biāo)準(zhǔn)，無嚴(yán)重合并癥，排除曾患毛細(xì)支氣管炎者，或有哮喘家族史者。
　　 3.急性上呼吸道感染組
　　 50例2005年至2006年在本院就診的急性上呼吸道感染患兒，年齡6個(gè)月至2歲，其中男孩28例，女孩22例，均為漢族，符合診斷標(biāo)準(zhǔn)，無嚴(yán)重合并癥，排除曾患毛細(xì)支氣管炎者或合并反復(fù)呼吸道感染者，或

4、有哮喘家族史者。
　　 4.健康對照組
　　 50例2005年至2006年在深圳市婦幼保健院體檢的健康嬰幼兒，年齡6個(gè)月至2歲，其中男孩25例，女孩25例，均為漢族，排除曾患毛細(xì)支氣管炎者、反復(fù)呼吸道感染者，或有哮喘家族史者。
　　 (二)研究內(nèi)容、方法
　　 1研究內(nèi)容
　　 (1)檢測以上四組研究對象的甘露聚糖結(jié)合凝集素血漿水平及其基因第1外顯子第52、54、57位密碼子的堿基序列。
　

5、　 (2)比較以上四組研究對象的甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率及血漿水平。
　　 (3)研究甘露聚糖結(jié)合凝集素血漿水平與其第54位密碼子GTC等位基因的相關(guān)關(guān)系。
　　 (4)研究甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位密碼子GTC等位基因與以上三種嬰幼兒呼吸道感染疾病的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度。
　　 2研究方法
　　 (1)應(yīng)用ELISA法定量檢測各組研究對象的甘露聚糖結(jié)合凝集素的血漿水平(ng/ml)。

6、r>　　 (2)用聚合酶鏈反應(yīng)、DNA序列測定法分析各組研究對象的甘露聚糖結(jié)合凝集素基因第1外顯子第52、54、57位密碼子的堿基序列。
　　 3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　 計(jì)量資料(甘露聚糖結(jié)合凝集素的血漿水平)的描述用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示。多組樣本均數(shù)比較采用方差分析，統(tǒng)計(jì)分析前先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料(甘露聚糖結(jié)合凝集素GTC等位基因頻率)的比較用X2檢驗(yàn)，先計(jì)算出各組研究對象的甘露聚糖結(jié)合凝集素基因型頻率和等

7、位基因頻率，然后經(jīng)Hardy-Weinburg遺傳平衡定律檢驗(yàn)，表明各基因型頻率已達(dá)遺傳平衡，具有群體代表性，再采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行各組間構(gòu)成比差異的比較。各種疾病與甘露聚糖結(jié)合凝集素54位密碼子GTC等位基因的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度以比值比(OR)代表，OR值95％置信區(qū)間(CI)的計(jì)算采用WOOLF法。甘露聚糖結(jié)合凝集素的血漿水平與其GTC等位基因的相關(guān)性分析用等級資料相關(guān)分析。所有數(shù)據(jù)均用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義。
　　 三結(jié)果:
　　 1.反復(fù)呼吸道感染組的甘露聚糖結(jié)合凝集素血漿水平較毛細(xì)支氣管炎組、急性上呼吸道感染組、健康對照組3組研究對象降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別。毛細(xì)支氣管炎組、急性上呼吸道感染組、健康對照組3組兩兩比較甘露聚糖結(jié)合凝集素血漿水平，均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別。
　　 2.甘露聚糖結(jié)合凝集素第一外顯子第54位密碼子GTC等位基因頻率約為0.16，存在基因多態(tài)性，未見52和57位密碼子的點(diǎn)突變。
　

9、　 3.反復(fù)呼吸道感染組的甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率較健康對照組增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別。毛細(xì)支氣管炎組及急性上呼吸道感染組的甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率較健康對照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別。
　　 4.甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率與反復(fù)呼吸道感染正關(guān)聯(lián)。[OR=2.19，95％CI為1.03～4.65，P<0.05]。
　　 5.甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位

10、密碼子GTC等位基因與其血漿水平呈負(fù)相關(guān)：r=-0.73。
　　 四結(jié)論:
　　 1.漢族嬰幼兒甘露聚糖結(jié)合凝集素第一外顯子第54位密碼子存在基因多態(tài)性，GTC等位基因頻率約為0.16，未見52、57位密碼子點(diǎn)突變。
　　 2.甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位密碼子GTC等位基因與其血漿水平負(fù)相關(guān)。
　　 3.反復(fù)呼吸道感染組與健康對照組比較，其MBL第54位密碼子GTC等位基因頻率增高，MBL血漿水平降低，均

11、有統(tǒng)計(jì)意義差別。
　　 4.甘露聚糖結(jié)合凝集素第54位密碼子GTC等位基因與嬰幼兒反復(fù)呼吸道感染的易感性相關(guān)。
　　 五進(jìn)一步研究的設(shè)想:
　　 (一)本研究的局限
　　 1.未與其它臨床檢驗(yàn)結(jié)果如：血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM、C反應(yīng)蛋白等數(shù)據(jù)相結(jié)合，進(jìn)一步深入全面的進(jìn)行分析。
　　 2.所有呼吸道感染病例均取于一家醫(yī)院，不能完全排除病人根據(jù)病情嚴(yán)重程度選擇不同的醫(yī)院，從而出現(xiàn)研究對象偏

12、倚。
　　 3.缺少呼吸道感染疾病組靜止期的甘露聚糖結(jié)合凝集素血漿水平的對比。
　　 (二)進(jìn)一步研究的設(shè)想
　　 1.與其它臨床檢驗(yàn)結(jié)果如：血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM、C反應(yīng)蛋白等數(shù)據(jù)相結(jié)合，進(jìn)一步深入全面的進(jìn)行分析。
　　 2.研究對象從多家醫(yī)院收集，盡量減少研究對象偏倚。
　　 3.研究對象增加腸道感染組，由此可以比較甘露聚糖結(jié)合凝集素血漿水平在不同系統(tǒng)感染的急性期是否具有不同程度