頭孢拉定在糖尿病大鼠和正常大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)的比較性研究.pdf

1、目的：通過比較頭孢拉定(Cephradine，CED)在糖尿病大鼠和正常大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)行為的差異，研究糖尿病狀態(tài)對CED藥代動力學(xué)的影響，為糖尿病患者臨床合理使用CED提供實驗依據(jù)。 方法：采用靜脈注射四氧嘧啶(60mg/kg)建立糖尿病大鼠模型，取血糖高于16mmol/L的大鼠作為糖尿病組用于研究，同時觀察并記錄大鼠“三多一少”癥狀。實驗分為兩大組，即正常對照(CTL)組和糖尿病(DM)組，每大組又按給藥途徑分為靜脈給藥組

2、和口服給藥組，每組再按CED給藥量分為高劑量(180mg/kg)和低劑量(90mg/kg)兩小組。靜脈給藥各動物于給藥前及給藥后5、15、30、50、80、120、180、240、360、450、600min，口服給藥各動物于給藥前和給藥后15、30、45、60、75、105、150、240、330、450、600min自眼球后靜脈叢收集0.4mL血樣，置于肝素化離心管中，3000r/min×15min離心，分離得血漿樣品。血漿樣品中C

3、ED采用反相HPLC法測定，其色譜條件為：固定相采用Kromasil C18色譜柱(4.6mm×250mmID，5μm)，并裝配以 Kromasil C18保護(hù)柱(4.6x20mmID,10μm)，流動相為0.025mol/L KH2PO4-MeOH-CH3CN(87:6:7v/v)，流速1.0mL/min，UV檢測波長261nm。200μL，血漿樣品，精密加入400μg/mL的內(nèi)標(biāo)頭孢氨芐(Cephalexin，CEX)10μL，蒸餾

4、水10bμL,10％三氯醋酸80μL，旋混0.5分鐘，12000r/min×10min離心，取上清液50μL進(jìn)樣。以峰面積內(nèi)標(biāo)法定量。方法學(xué)驗證包括特異性、精密度、回收率、線性范圍和最低定量限，按常規(guī)方法進(jìn)行。穩(wěn)定性考察包括CED血漿樣品-20℃冰凍保存穩(wěn)定性、CED血漿樣品室溫保存穩(wěn)定性、CED標(biāo)準(zhǔn)品及內(nèi)標(biāo)CEX儲備液-20℃冰凍保存穩(wěn)定性、CED血漿樣品加三氯醋酸后2～4℃存放穩(wěn)定性。大鼠血樣采集結(jié)束后，立即處死取出腎臟，精確稱量腎

5、臟重量(KW)，并計算腎臟指數(shù)(腎重/體重，KW/BW)。 結(jié)果：CED和CEX的保留時間(tr)分別為16.38min和11.50min，兩者之間達(dá)基線分離；空白血漿中雜質(zhì)峰均在此之前出現(xiàn)，不干擾CED的測定：給藥后之血漿樣品的HPLC圖譜中未見代謝物干擾，血漿樣品中CED和CEX的tr均與標(biāo)準(zhǔn)品相同。CED和CEX峰面積之比與CED濃度呈線性相關(guān)(r>0.9999)，血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為1～100μg/mL，線性方程為Y=

6、0.0325X+0.0096(r=0.9999)，最低定量限分別為1μg/mL，能滿足測定5個半衰期的血藥濃度；方法學(xué)驗證表明日內(nèi)及日間精密度RSD均小于9.40％，方法回收率達(dá)93.23％～100.33％，萃取回收率達(dá)83.98％-87.88％。CED血漿樣品-20℃保存和室溫放置分別至少一個月和8小時內(nèi)穩(wěn)定；CED標(biāo)準(zhǔn)品及CEX儲備液-20℃保存至少一個月內(nèi)穩(wěn)定；血漿樣品加三氯醋酸后2～4℃保存至少8小時內(nèi)穩(wěn)定。CTL組和DM組大鼠

7、靜脈注射CED后的血藥濃度時程均符合二室模型、線性動力學(xué)過程。高、低劑量組間AUC隨劑量成比例增加(P<0.05)，t1/2β、CLt、MRT不隨劑量明顯改變(P>0.05)。與CTL組比較，DM組t1/2β、MRT明顯縮短(P<0.05)，CLt顯著增加(P<0.05)，說明DM組CED消除加快。兩組大鼠口服CED后的血藥濃度時程均符合口服一室模型、線性動力學(xué)過程。高、低劑量組間AUC隨劑量成比例增加(P<0.05)，t1/2k、CL

8、t不隨劑量明顯改變(P>0.05)。與CTL組比較，DM組口服CED后tmax，t1/2k顯著縮短(P<0.05),t1/2ka呈縮短趨勢，Cmax、CLt明顯增加(P<0.05)，說明DM組CED吸收和消除均加快。CED在大鼠體內(nèi)的口服生物利用度(F)，在DM組與CTL組間無顯著性差異(P>0.05)。DM組大鼠KW、KW/BW顯著增加(P<0.05)。 結(jié)論：本文采用的HPLC法符合CED血漿藥動學(xué)研究的方法學(xué)要求；血藥濃度

9、數(shù)據(jù)及藥動學(xué)參數(shù)表明CTL組和DM組大鼠經(jīng)靜脈或口服本研究確定之高、低劑量CED后，血藥濃度時程均呈現(xiàn)線性動力學(xué)；糖尿病狀態(tài)下CED靜脈及口服給藥后大鼠體內(nèi)消除明顯加快，表現(xiàn)為t1/2β、t1/2k、MRT縮短，CLt增加；DM大鼠口服CED后tmax顯著縮短，Cmx明顯增加，t1/2ka縮短，提示糖尿病時CED吸收加快，但F與CTL相比無顯著性差異；DM組大鼠腎KW、KW/BW增加，提示糖尿病早期腎臟出現(xiàn)代償性肥大繼而功能亢進(jìn)，這也許