鼠疫耶爾森氏菌密度感應(yīng)系統(tǒng)與毒力關(guān)系研究.pdf

1、背景：鼠疫是由鼠疫耶爾森氏菌(簡(jiǎn)稱鼠疫菌)引起的自然疫源性烈性傳染病。鼠疫菌獨(dú)特的致病能力，一直是鼠疫研究工作者關(guān)注的焦點(diǎn)。密度感應(yīng)系統(tǒng)(quorumsensing，QS)是一種細(xì)胞密度依賴性的細(xì)菌胞間信號(hào)傳遞系統(tǒng)，通過這種機(jī)制細(xì)菌可以協(xié)調(diào)基因的表達(dá)，從而使細(xì)菌可以適應(yīng)環(huán)境、產(chǎn)生毒力因子等，使細(xì)胞的活動(dòng)具有組織性，成為類似于多細(xì)胞生物的群體性活動(dòng)。本文報(bào)道了鼠疫菌密度感應(yīng)系統(tǒng)在鼠疫菌毒力中的作用。 方法：結(jié)合基因突變技術(shù)、高效液

2、相分離、質(zhì)譜鑒定和細(xì)胞凋亡分析實(shí)驗(yàn)，從鼠疫菌野生株和QS突變株分離鑒定QS系統(tǒng)的信號(hào)分子及其對(duì)巨噬細(xì)胞的作用；利用全基因組芯片，比較分析QS突變株與野生株轉(zhuǎn)錄譜差異，鑒定QS系統(tǒng)調(diào)控元；利用鼠疫菌毒力相關(guān)蛋白的蛋白芯片，分析QS系統(tǒng)在體內(nèi)對(duì)毒力相關(guān)蛋白表達(dá)的影響；通過一系列表型實(shí)驗(yàn)，比較QS突變株在體外、細(xì)胞和動(dòng)物毒力表型的差異。結(jié)果：從鼠疫菌的培養(yǎng)上清中，分離鑒定了兩種信號(hào)分子，C6-HSL和C8-HSL，并證實(shí)了兩種信號(hào)分子的合成基

3、因。巨噬細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)證實(shí)，這兩種信號(hào)分子對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞均具有促凋亡作用。QS系統(tǒng)調(diào)控了大量與細(xì)菌的基礎(chǔ)生理功能和毒力相關(guān)的基因，并在體內(nèi)影響了大量毒力蛋白的表達(dá)。細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，QS突變株在巨噬細(xì)胞內(nèi)的生存能力下降，對(duì)小鼠的毒力減弱。 結(jié)論：鼠疫菌QS系統(tǒng)合成了兩個(gè)信號(hào)分子，C6-HSL和C8-HSL。信號(hào)分子直接作為毒力因子發(fā)揮作用。QS系統(tǒng)調(diào)控大量基因的表達(dá)，包括一些與鼠疫菌基本生理功能和鼠疫菌毒力相關(guān)的基因，QS突