甲狀腺癌的超聲顯像與骨橋蛋白表達(dá)及微血管密度測(cè)定的相關(guān)研究.pdf

1、甲狀腺癌是頭頸部比較常見的惡性腫瘤，近年來(lái)發(fā)病率有上升趨勢(shì)，早期甲狀腺癌經(jīng)手術(shù)切除后，幾乎可以根治，而晚期甲狀腺癌則會(huì)發(fā)生淋巴結(jié)、肺、骨等遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，早期診斷、早期治療至關(guān)重要。目前，臨床上對(duì)甲狀腺癌的診斷主要依靠觸診及影像學(xué)檢查（高頻超聲、核素、CT、MRI）及免疫學(xué)測(cè)定等，其中，彩色多普勒超聲是目前甲狀腺及頸部疾病最重要的檢查手段，隨著多種超聲顯像技術(shù)的不斷改進(jìn)和應(yīng)用，超聲能夠觀察到2～3mm的微小病灶，能夠較清晰地顯示病灶內(nèi)部結(jié)構(gòu)、

2、有無(wú)包膜和微鈣化等細(xì)微結(jié)構(gòu)的改變以及病灶血流分布和血流頻譜的變化，為進(jìn)一步提高甲狀腺疾病的診斷率提供了有利條件。然而，由于甲狀腺結(jié)節(jié)病理類型繁多，生物學(xué)特性差異大，且具有多發(fā)性及多源性的特點(diǎn)，使得超聲對(duì)部分不典型結(jié)節(jié)的診斷存在困難，在超聲檢查中還存在一定比例的漏診和誤診，對(duì)于部分良惡性結(jié)節(jié)的鑒別尚有爭(zhēng)議。 目的: 通過(guò)觀察145例經(jīng)手術(shù)和病理證實(shí)的甲狀腺結(jié)節(jié)的彩色多普勒超聲表現(xiàn)，將聲像圖表現(xiàn)與病理結(jié)果結(jié)合進(jìn)行單因素和Lo

3、gistic多因素分析，以獲得超聲診斷甲狀腺癌的最相關(guān)的聲像圖指標(biāo)，為方便、快捷地鑒別甲狀腺良、惡性結(jié)節(jié)提供理論依據(jù)。 方法: 選擇2006年2月至2008年8月因甲狀腺結(jié)節(jié)在我院普外科收治的患者145例，所有患者術(shù)前行彩色多普勒超聲檢查，觀察并記錄病灶的二維及彩色多普勒?qǐng)D像表現(xiàn)，包括病灶數(shù)目、大小、邊界、內(nèi)部回聲、砂粒樣強(qiáng)回聲、聲暈、后方衰減、血流分級(jí)及血流阻力指數(shù)、頸部腫大淋巴結(jié)等。術(shù)后與病理對(duì)照。將甲狀腺良、惡性結(jié)

4、節(jié)超聲表現(xiàn)結(jié)合病理結(jié)果進(jìn)行單因素和Logistic多因素回歸分析，篩選甲狀腺癌相關(guān)聲像圖指標(biāo)。 結(jié)論: 1.經(jīng)Logistic多因素相關(guān)回歸分析顯示，單發(fā)病灶、砂粒樣強(qiáng)回聲（微鈣化）、低回聲、邊界模糊，為診斷甲狀腺癌的主要依據(jù)。 2.甲狀腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移常為多分區(qū)轉(zhuǎn)移，Ⅲ區(qū)（中頸部）為最常見的轉(zhuǎn)移部位；主要聲像圖特點(diǎn)有：淋巴結(jié)增大、變圓，皮髓質(zhì)分界不清，淋巴門結(jié)構(gòu)破壞或消失；淋巴結(jié)內(nèi)部回聲偏強(qiáng)，有時(shí)可出現(xiàn)較多細(xì)小

5、點(diǎn)狀鈣化；部分淋巴結(jié)內(nèi)部出現(xiàn)囊性改變。 3.彩色多普勒超聲對(duì)甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的鑒別診斷具有重要意義，能為臨床診斷及治療提供準(zhǔn)確信息。 第二部分乳頭狀甲狀腺癌的超聲表現(xiàn)與骨橋蛋白表達(dá)的關(guān)系研究 背景: 甲狀腺癌是頭頸部最常見的惡性腫瘤之一，近年來(lái)發(fā)病率有增長(zhǎng)趨勢(shì)，乳頭狀甲狀腺癌占所有甲狀腺惡性腫瘤的75％以上，其發(fā)病機(jī)理及生物學(xué)過(guò)程至今不明。骨橋蛋白（osteopontin，OPN）是一種含有特異RGD序列

6、的分泌型磷酸化糖蛋白，具有促進(jìn)細(xì)胞趨化、黏附和遷移的功能，近年來(lái)，OPN與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，特別是它與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系日益引起人們的關(guān)注。目前，已有文獻(xiàn)報(bào)道OPN在乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤中呈高表達(dá)，在頭頸部癌（包括甲狀腺癌）的報(bào)道較少見。本文通過(guò)研究乳頭狀甲狀腺癌組織中的OPN表達(dá)情況及探討其與超聲表現(xiàn)之間的關(guān)系，旨在研究乳頭狀甲狀腺癌的分子生物學(xué)機(jī)制，以期為乳頭狀甲狀腺癌的生物學(xué)行為和預(yù)后進(jìn)行評(píng)估。 目的

7、: 分別從mRNA和蛋白質(zhì)水平檢測(cè)骨橋蛋白（OPN）在乳頭狀甲狀腺癌中的表達(dá)，探討OPN的表達(dá)與乳頭狀甲狀腺癌超聲表現(xiàn)特征之間的關(guān)系。 方法: 1.彩色多普勒超聲檢查 對(duì)48例乳頭狀甲狀腺癌患者術(shù)前行甲狀腺彩色多普勒超聲檢查，分析其聲像圖特征。 2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR（FQ-PCR）法檢測(cè)OPNmRNA的表達(dá) 收集48例乳頭狀甲狀腺癌及對(duì)照組（30例甲狀腺良性病變及20例正常甲狀腺組織）的

8、術(shù)后標(biāo)本，分別從標(biāo)本組織中提取總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)得到cDNA，以GAPDH基因作為參照，通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)OPNmRNA的表達(dá)。 分析OPNmRNA的表達(dá)與各項(xiàng)超聲表現(xiàn)特征之間的關(guān)系。 3.免疫組織化學(xué)檢測(cè) 取組織切片，用免疫組織化學(xué)法行OPN的組織學(xué)檢測(cè)，觀察乳頭狀甲狀腺癌及對(duì)照組的OPN蛋白表達(dá)情況。 結(jié)論: 1. OPN在乳頭狀甲狀腺癌組織中高表達(dá)，OPN在乳頭狀甲狀腺癌的發(fā)生、

9、發(fā)展中起到一定作用。 2.乳頭狀甲狀腺癌OPNmRNA的表達(dá)量與超聲顯示的微鈣化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，OPN可能參與了微鈣化的形成，超聲表現(xiàn)在一定程度上反映了腫瘤組織中OPN的表達(dá)水平，對(duì)評(píng)估乳頭狀甲狀腺癌的生物學(xué)行為和預(yù)后具有一定價(jià)值。 第三部分乳頭狀甲狀腺癌的超聲表現(xiàn)與微血管密度測(cè)定的相關(guān)研究 背景: 腫瘤新生血管形成在其生長(zhǎng)、侵襲轉(zhuǎn)移中起著重要作用，研究腫瘤新生血管一直是目前腫瘤研究的熱點(diǎn)。測(cè)量微

10、血管密度（MVD）是目前常用的評(píng)價(jià)腫瘤血管生成情況的方法，MVD能較為精確地反映腫瘤內(nèi)的血管狀態(tài)，已被公認(rèn)為是預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立指標(biāo)。目前認(rèn)為多數(shù)實(shí)體腫瘤MVD明顯增高，并與其侵襲性有關(guān)[23]。CD34是一種新型的微血管標(biāo)記物，其顯示血管內(nèi)皮細(xì)胞時(shí)，更具敏感性和特異性，易于觀察，用抗CD34抗體作微血管染色較其它標(biāo)記物能提供更多有用而可靠的信息。 目前隨著彩色多普勒超聲的廣泛使用，超聲檢查已成為臨床診斷甲狀腺疾病的主要檢查

11、手段之一，對(duì)良惡性結(jié)節(jié)的鑒別診斷已積累了一定的經(jīng)驗(yàn)[6-8]，但在部分結(jié)節(jié)的鑒別診斷方面仍有爭(zhēng)議。近年來(lái)微血管密度測(cè)定技術(shù)的發(fā)展為甲狀腺結(jié)節(jié)性疾病的診斷提供了一個(gè)新的方向，MVD可精確標(biāo)識(shí)腫瘤組織內(nèi)微血管，而超聲血流顯像則是對(duì)腫瘤內(nèi)血管分布的宏觀測(cè)估，本研究擬探討二者的內(nèi)在聯(lián)系，以為臨床提供更多診斷及評(píng)估愈后的信息。 目的: 通過(guò)對(duì)48例乳頭狀甲狀腺癌及對(duì)照組的彩色多普勒超聲檢查、微血管密度測(cè)定，并與病理結(jié)果對(duì)照，分析聲

12、像圖表現(xiàn)與微血管密度之間的關(guān)系，評(píng)價(jià)彩色多普勒超聲、微血管密度測(cè)定在乳頭狀甲狀腺癌中的診斷價(jià)值。 方法: 1.彩色多普勒超聲檢查 采用ATL HDI-5000及GE LOGIQ9彩色超聲診斷儀，觀查并記錄48例乳頭狀甲狀腺癌的聲像圖表現(xiàn)。二維超聲觀察甲狀腺結(jié)節(jié)的部位、大小、數(shù)目、邊界、內(nèi)部回聲及鈣化情況、頸部有無(wú)腫大淋巴結(jié)等。用彩色多普勒血流顯像（CDFI）及彩色多普勒能量顯像（PDI）技術(shù)檢測(cè)每個(gè)結(jié)節(jié)內(nèi)部血流情

13、況，將結(jié)節(jié)內(nèi)部血流豐富程度按Alder半定量法分為0～Ⅲ級(jí)。 2.微血管密度測(cè)定 用抗CD34單克隆抗體作免疫組化染色，檢測(cè)48例乳頭狀甲狀腺癌、30例甲狀腺良性病變及20例正常甲狀腺組織中的微血管密度，在200倍視野下（0.739m㎡）由兩名計(jì)數(shù)者以雙盲法對(duì)每一例標(biāo)本作微血管計(jì)數(shù)，取二者的均數(shù)為該例的MVD值。 結(jié)論: 1.乳頭狀甲狀腺癌的微血管密度高于甲狀腺良性病變及正常甲狀腺組織。 2.乳頭