脂蛋白脂酶基因敲除小鼠的糖脂代謝研究.pdf

1、目的：脂毒性（lipotoxicity）在糖尿病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中具有極其重要的作用。脂蛋白脂肪酶(LPL）是甘油三酯(TG）分解代謝的關(guān)鍵酶，以往的研究發(fā)現(xiàn)脂蛋白脂肪酶敲除的雜合子小鼠(LPL+/- mice)脂代謝發(fā)生障礙，未觀察其糖代謝變化。本課題比較脂蛋白脂肪酶(LPL）雜合子小鼠在不同生命時(shí)期的胰島素抵抗、胰島β細(xì)胞功能以及胰腺和胰島素作用的靶組織中甘油三酯含量的差異，從而了解脂毒性在2型糖尿?。═2DM）發(fā)生、發(fā)展中的作用。

2、 方法：1）第一部分試驗(yàn)分兩組小鼠：野生型C57小鼠6只[對(duì)照組]與LPL+/-小鼠6只（LPL+/-組），對(duì)它們行表型鑒定后，分別行CT測(cè)量小鼠內(nèi)臟脂肪和皮下脂肪的含量，內(nèi)眥靜脈采血分離血清檢測(cè)血清甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）和游離脂肪酸（FFA）水平，然后處死小鼠，檢測(cè)3組小鼠內(nèi)臟脂肪和腹部及股部皮下脂肪的質(zhì)量，制備肝臟、骨骼肌、胰腺病理切片，觀察其形態(tài)學(xué)變化，并

3、制備肝臟、四肢骨骼肌、皮下脂肪（取自腹部及股部）、內(nèi)臟脂肪、胰腺組織勻漿，檢測(cè)肝臟、骨骼肌、胰腺的TG水平和肝臟、骨骼肌、內(nèi)臟脂肪、皮下脂肪、胰腺的TC、HDL-C、LDL-C、FFA水平。2）野生型C57小鼠（16周齡）6只[對(duì)照組]、16周齡LPL+/-小鼠6只（LPL+/-16周齡組）、28周齡LPL+/-小鼠6只（LPL+/-28周齡組），分別行腹腔注射葡萄糖耐量試驗(yàn)（IPGTT）評(píng)價(jià)其胰島素抵抗及胰島β細(xì)胞分泌功能；3）對(duì)照組

4、、LPL+/-16周齡組、LPL+/-28周齡組分別按照前面方法測(cè)小鼠內(nèi)臟脂肪和皮下脂肪的含量、血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA水平、內(nèi)臟脂肪和皮下脂肪（取自腹部及股部）的質(zhì)量，制作肝臟、骨骼肌、胰腺病理切片，檢測(cè)肝臟、骨骼肌、胰腺的TG水平和肝臟、骨骼肌、內(nèi)臟脂肪、皮下脂肪、胰腺的TC、HDL-C、LDL-C、FFA水平。 結(jié)果：1）LPL+/-組小鼠的血清TG、TC、LDL-C、FFA水平、內(nèi)臟脂肪和皮下脂肪的

5、質(zhì)量和含量均高于對(duì)照組，同時(shí)LPL+/-組小鼠肝臟、骨骼肌、胰腺組織中TG、TC、LDL-C、FFA含量也高于對(duì)照組，但是僅血清TG、FFA水平和內(nèi)臟脂肪重量的變化具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CT圖像可見(jiàn)LPL+/-組小鼠皮下脂肪和內(nèi)臟脂肪高于對(duì)照組；肝臟、骨骼肌、胰腺病理圖片形態(tài)學(xué)變化不明顯。 2）LPL+/-16周齡組小鼠血清及組織內(nèi)TG、TC、LDL-C、FFA水平較對(duì)照組均呈不同水平的增加，血清TG、FFA的增加有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。LPL+/-2

6、8周齡組小鼠血清、肝臟、骨骼肌、胰腺中TG和血清、肝臟、骨骼肌、皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪、胰腺中TC、LDL-C、FFA水平較LPL+/-16周齡組所增加，但僅肝臟TG水平與LPL+/-16周齡組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。LPL+/-28周齡組的血清TG、肝臟TG、內(nèi)臟脂肪TC及骨骼肌FFA、皮下脂肪FFA、胰腺FFA水平較對(duì)照組增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三組間HDL-C的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。LPL+/-16周齡組的內(nèi)臟脂肪質(zhì)量高于對(duì)照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；L

7、PL+/-28周齡組小鼠內(nèi)臟脂肪和皮下脂肪的質(zhì)量和含量均高于對(duì)照組和LPL+/-16周齡組，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肝臟、骨骼肌、胰腺形態(tài)差異不顯著。3）LPL+/-16周齡組小鼠空腹血糖（FPG）、血糖曲線下面積、空腹胰島素（FINS）、HOMA-β、HOMA-IR均高于對(duì)照，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；LPL+/-28周齡組小鼠FPG、血糖曲線下面積、FINS、HOMA-β、HOMA-IR較LPL+/-16周齡組高，但僅FINS、HOMA-IR的