腦缺血預(yù)處理對(duì)腦組織線(xiàn)粒體ATP酶活性、GSH-PX活力及MDA水平的影響.pdf

1、目的：通過(guò)研究腦缺血預(yù)處理對(duì)再次腦缺血的神經(jīng)功能、海馬區(qū)HE染色以及腦組織線(xiàn)粒體AIP酶活性、GSH-PX活力和MDA水平的影響，進(jìn)一步探討腦缺血耐受引起的腦保護(hù)機(jī)制。 方法：48只雄性SD大鼠（體重230-300g）隨機(jī)分成4組：假手術(shù)組（n=12），單純預(yù)處理組（n=12），腦缺血組（n=12），預(yù)處理后腦缺血組（n=12）。動(dòng)物模型制作：假手術(shù)組：頸部正中切口暴露頸總動(dòng)脈后縫合皮膚。單純預(yù)處理組：按Longa線(xiàn)栓法略加以改

2、良，制成局灶-局灶腦缺血模型。先麻醉大鼠，分離右側(cè)頸總及頸內(nèi)外動(dòng)脈及翼腭動(dòng)脈，結(jié)扎翼腭動(dòng)脈。結(jié)扎頸外動(dòng)脈遠(yuǎn)端，在頸外動(dòng)脈近端剪一小口，經(jīng)此小口插入備好的線(xiàn)栓（直徑0.16～0.20mm高彈力碳素魚(yú)線(xiàn)，插線(xiàn)頭燒成圓頭，臨用時(shí)蘸取肝素）經(jīng)頸外動(dòng)脈到頸內(nèi)動(dòng)脈入顱至大腦中動(dòng)脈，一次性缺血30分鐘后，拔出線(xiàn)栓，結(jié)扎頸外動(dòng)脈近端，縫合皮膚。腦缺血組：暴露并分離右側(cè)頸總動(dòng)脈（CCA）、頸內(nèi)動(dòng)脈（ICA）、頸外動(dòng)脈（ECA）及翼腭動(dòng)脈，并結(jié)扎翼腭動(dòng)脈及

3、ECA根部。結(jié)扎CCA近心端，用動(dòng)脈夾夾閉ICA遠(yuǎn)端，其間剪一小口，從切口插入備好的線(xiàn)栓，去除ICA端的動(dòng)脈夾，緩慢推進(jìn)線(xiàn)栓約17～20mm，扎緊結(jié)扎線(xiàn)并固定插線(xiàn)，栓塞24小時(shí)；預(yù)處理后腦缺血組：按上述手術(shù)步驟完成腦缺血預(yù)處理，24小時(shí)后如上步驟再栓右側(cè)大腦中動(dòng)脈，缺血時(shí)間為24小時(shí)。分別觀察四組動(dòng)物的以下指標(biāo)：按Bederson6級(jí)5分法進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)價(jià)（每組12只）；HE染色比較各組海馬CA1區(qū)變化；生化檢測(cè)方法檢測(cè)線(xiàn)粒體ATP酶活

4、性、GSH-PX活力和MDA水平。 結(jié)果： 神經(jīng)功能評(píng)分：假手術(shù)組均為0分；單純預(yù)處理組為0.25±0.2；腦缺血組為2.24±0.87；預(yù)處理后腦缺血組為1.16±0.2。 單純預(yù)處理組與假手術(shù)組比較（p>0.05）：?jiǎn)渭冾A(yù)處理組神經(jīng)功能評(píng)分低于腦缺血組（p<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 HE染色：假手術(shù)組腦組織結(jié)構(gòu)正常，無(wú)水腫；單純預(yù)處理組腦組織結(jié)構(gòu)正常，無(wú)明顯水腫；鏡下正常神經(jīng)元核圓形，邊界及核仁

5、清楚；腦缺血組損傷累及廣泛皮層及紋狀體外側(cè)，損傷神經(jīng)元胞核腫大，偏位，核仁消失，胞漿著色淺、蒼白或核濃縮、深染，數(shù)目減少；預(yù)處理后腦缺血組病理改變較輕，缺血中心區(qū)與周?chē)鷧^(qū)界限尚清，可見(jiàn)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞呈輕到重度的腫脹，少數(shù)神經(jīng)元呈變性壞死改變。 神經(jīng)元損傷統(tǒng)計(jì)：假手術(shù)組為13.22±4.21；單純預(yù)處理組為13.20±7.40；腦缺血組為90.02±10.51；預(yù)處理后腦缺血組為61.41±8.64，假手術(shù)組與預(yù)處理組的比較

6、（p>0.05）；預(yù)處理后腦缺血組與腦缺血組比較以及上述兩組與假手術(shù)組之間的比較（p<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 生化檢測(cè)： （1）Na+，K+-ATP和Ca2+，Mg2+-ATP酶活性：假手術(shù)組的分別為3.72±1.52，3.58±0.59；單純預(yù)處理組的分別為3.58±0.78，3.69±0.32；腦缺血組的分別為2.27±0.56、2.34±0.5；預(yù)處理后腦缺血組的分別為2.79±0.61，2.85±0.65

7、，單純預(yù)處理組與假手術(shù)組比較無(wú)明顯差異（p>0.05）；預(yù)處理后腦缺血組高于腦缺血組（p<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 （2）谷胱甘肽過(guò)氧化物（GSH-PX）活力檢測(cè)結(jié)果顯示假手術(shù)組為21.59±2.58，單純預(yù)處理組為22.21±3.55，腦缺血組為12.56±3.27，預(yù)處理后腦缺血組為16.02±1.82，單純預(yù)處理組與假手術(shù)組比較無(wú)明顯差異（p>0.05）；預(yù)處理后腦缺血組高于腦缺血組（p<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

8、。 （3）丙二醛（MDA）水平檢測(cè)結(jié)果：假手術(shù)組為3.55±1.04，單純預(yù)處理組為3.89±0.53， 腦缺血組為5.86±1.08，預(yù)處理后腦缺血組為4.29±0.95，單純預(yù)處理組與假手術(shù)組比較無(wú)明顯差異（p>0.05），預(yù)處理后腦缺血組低于腦缺血組（P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：預(yù)處理后腦缺血組神經(jīng)功能好于腦缺血組。海馬CA1區(qū)腦組織HE染色發(fā)現(xiàn)預(yù)處理后腦缺血組的損傷明顯小于腦缺血組，且預(yù)處理后腦缺血