ATP參與電針刺預(yù)處理誘導(dǎo)大鼠腦缺血耐受效應(yīng).pdf

1、目的：
　　腦缺血性疾病正給全人類的健康帶來嚴(yán)重的威脅，中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中的針灸技術(shù)對腦缺血性疾病有明顯的療效，人們從傳統(tǒng)針灸技術(shù)中發(fā)展出了電針刺治療方法，且不斷的有研究證明電針刺對改善該類疾病所導(dǎo)致的損傷有效。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)了大鼠的腦組織內(nèi)ATP和腺苷(Adenosine，Ads)在電針刺預(yù)處理后120min的時(shí)間點(diǎn)有明顯上升，并發(fā)現(xiàn)ATP代謝產(chǎn)物Ad在電針刺預(yù)處理引起的腦缺血耐受機(jī)制中起到保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)將研究ATP在電針刺

2、預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受機(jī)制中的作用。
　　方法：
　　按照隨機(jī)分組原則將40只SD大鼠分配于5組:電針組(EA)，生理鹽水組(Saline)，P2受體拮抗劑蘇拉明組(Suramin)，生理鹽水+電針組(Saline+EA)，P2受體拮抗劑+電針組（Suramin+EA），每組八只。本實(shí)驗(yàn)采用大腦中動(dòng)脈栓塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型模擬腦缺血，將尼龍線栓從頸外動(dòng)脈插入，經(jīng)頸

3、總動(dòng)脈交叉沿頸內(nèi)動(dòng)脈，塞至大腦中動(dòng)脈分叉處，2h后拔除線栓恢復(fù)再灌注。EA組為電針刺結(jié)束120min時(shí)MCAO模型成功造模;Saline組為側(cè)腦室注射10μL生理鹽水溶液后，安靜放置150min時(shí)MCAO成功造模;Suramin組為側(cè)腦室注射10μL濃度為100μM的suramin溶液，其余與Saline組相同;Saline+EA組為側(cè)腦室注射10μL生理鹽水后立即電針刺預(yù)處理，電針結(jié)束120min時(shí)MCAO模型成功造模;Suramin

4、+EA組除側(cè)腦室注射10μL濃度為100μM的Suramin外，其余操作與Saline+EA組相同。P2受體拮抗劑Suramin由生理鹽水配制，濃度為100μM。側(cè)腦室注射通過小動(dòng)物立體定位儀和上面的微量注射泵實(shí)現(xiàn)。電針刺穴位為“百會(huì)穴”(GV20)和“風(fēng)府穴(GV16)”。電針治療儀的參數(shù)設(shè)定為1mA，2/15Hz，刺激時(shí)間30min。通過腹腔注射水合氯醛(10％，0.3ml/100g)使大鼠在實(shí)驗(yàn)操作過程中保持足夠的麻醉深度，MCA

5、O的制作控制在15min內(nèi)。在大鼠腦缺血再灌注24h后觀察并記錄其神經(jīng)行為學(xué)評分，隨后立即斷頭取腦，冰凍后切片，使用TTC(2，3，5-triphenyltetrazolium chloride)染色法計(jì)算腦梗死體積百分比。
　　結(jié)果：
　　與Saline組腦相比，Saline+EA組神經(jīng)行為學(xué)評分有明顯改善，腦梗死體積明顯減小，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著性(p＜0.05); Saline+EA組與EA組相比神經(jīng)行為學(xué)評分和腦梗死體積

6、無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異; Suramin+EA組與Saline+EA組相比，腦梗死體積和神經(jīng)行為學(xué)評分相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.05); Suramin組的腦梗死體積和行為學(xué)評分好于Saline組，差異具有顯著性(p＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　電針刺預(yù)處理可以改善大腦中動(dòng)脈阻塞模型大鼠的神經(jīng)行為學(xué)評分和減少腦梗死體積，側(cè)腦室注射P2受體拮抗劑Suramin抑制了對電針刺預(yù)處理后所產(chǎn)生的腦缺血耐受效應(yīng)，推測ATP參與了電針刺