神經(jīng)元型一氧化氮合酶在快速衰老小鼠皮質(zhì)額葉和海馬中的增齡性改變.pdf

1、目的：一氧化氮(nitricoxide,NO)由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)催化底物L(fēng)-精氨酸產(chǎn)生。NO/NOS與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的衰老過程有密切關(guān)系，神經(jīng)元型NOS(neuronalNOS，nNOS)產(chǎn)生的NO在中樞神經(jīng)系統(tǒng)作為信使分子和神經(jīng)遞質(zhì)在神經(jīng)元信號(hào)傳遞中起重要作用，參與多種生理和病理過程。但是，衰老相關(guān)NOS改變的研究結(jié)果很不一致，而且有關(guān)大腦皮質(zhì)和海馬中nNOS的衰老變化的研究很少?？焖偎ダ闲?/p>

2、鼠(Senescenceacceleratedmouse，SAM)是目前研究衰老的唯一哺乳類動(dòng)物模型，為探討衰老的發(fā)生機(jī)制提供了()好的動(dòng)物模型。本實(shí)驗(yàn)觀察SAM衰老過程中大腦皮質(zhì)額葉()海馬中nNOS的分布和表達(dá)變化，探討NO在中樞神經(jīng)系統(tǒng)衰老中的作用。 方法：采用雄性快速衰老亞系8小鼠(senescencacceleratedmouse/prone8,SAMP8)及抗快速衰老亞系1小鼠(senescenceaccelerat

3、edmouse/resistance1，SAMR1)，其中SAMP8為實(shí)驗(yàn)組，SAMR1為對(duì)照組，每組動(dòng)物再分為青年組(3月齡)和老年組(10月齡)兩組，每個(gè)年齡組隨機(jī)分配6只動(dòng)物。用免疫組織化學(xué)法標(biāo)記nNOS神經(jīng)元，在顯微鏡下觀察快速衰老小鼠皮質(zhì)額葉和海馬CA1，CA2和CA3區(qū)中nNOS神經(jīng)元的形態(tài)和分布，并計(jì)數(shù)nNOS神經(jīng)元在皮質(zhì)額葉和海馬CA1、CA2和CA3區(qū)的數(shù)量；用RT-PCR法檢測(cè)皮質(zhì)額葉和海馬中nNOSmRNA表達(dá)水平

4、(用平均灰度值表示)。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較，P值小于0.05被認(rèn)為有顯著性差異，應(yīng)用SPSS11.0軟件完成。 結(jié)果：老齡SAMP8額葉皮質(zhì)中的nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元的形態(tài)與其它組比較無明顯差別，但分布密度明顯增加。老齡SAMP8海馬中陽(yáng)性神經(jīng)元的形態(tài)與其它組比較無明顯差別，但CA1和CA2區(qū)陽(yáng)性神經(jīng)元密度明顯減低，CA3區(qū)陽(yáng)性神經(jīng)元密度無明顯改變。 SAMP8老年組與青年組相比，額葉皮質(zhì)中nNO

5、S強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量顯著增加(15.8±6.3vs8.0±4.9，P＜0.05)，海馬CA1和CA2區(qū)nNOS陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量顯著減少(73.3±14.0vs143.5±38.3；71.0±29.5vs126.2±38.9，P＜0.05)，CA3區(qū)陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)量無顯著差別；SAMP8與SAMR1比較，青年時(shí)額葉皮質(zhì)和海馬nNOS陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量均無顯著差別，老年時(shí)額葉皮質(zhì)nNOS陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量顯著增加(15.8±6.3vs7.5±5.3，P＜

6、0.05)而海馬CA1和CA2區(qū)陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量顯著減少(73.3±14.0vs139.2±24.4；71.0±29.5Vs120.0±36.5，P＜0.05)。 SAMP8老年時(shí)額葉皮質(zhì)nNOSmRNA水平明顯高于青年時(shí)(1.00±0.17vs0.67±0.13，P＜0.05)；且老年和青年SAMP8額葉皮質(zhì)nNOSmRNA水平均高于相應(yīng)月齡SAMR1(1.00±0.17vs0.67±0.11；0.67±0.13vs0.49±0

7、.15，P＜0.05)；SAMP8老年時(shí)海馬nNOSmRNA水平明顯低于青年時(shí)(0.43±0.17vs0.92±0.15，P＜0.05)，且低于相應(yīng)月齡SAMR1(0.43±0.17vs0.86±0.13，P＜0.05)。 結(jié)論：1額葉皮質(zhì)中nNOS催化產(chǎn)生過量NO所致神經(jīng)毒和細(xì)胞死亡可能參與了SAMP8快速衰老的過程。2海馬中nNOS催化產(chǎn)生不足量NO可能加速SAMP8衰老。3衰老的發(fā)生可能與各腦區(qū)NO生成異常有關(guān)，為通過調(diào)節(jié)