轉bar基因小麥的抗性檢測及其相關綜合性狀的研究.pdf

1、本研究主要從bar基因的抗性檢測和轉bar基因對小麥農藝性狀的影響兩個方面進行研究，主要研究結果如下： 1外源基因的導入 本研究對基因槍法獲得的轉bar基因小麥T1、T2代及回交法獲得回交后代BC1、BC2進行PPT抗性檢測、PAT酶活性檢測、GS酶活性檢測及DNA分子檢測，證實轉基因株系及回交后代均已導入bar基因。這一結果表明對于一些已經(jīng)獲得轉基因材料的目的基因，通過回交將目標基因轉育到其它品種，不失為一條簡便快捷的

2、有效途徑。因此，將回交轉育法與基因槍法、農桿菌介導法和花粉管通道法等直接轉化方法相結合，可大大加快轉基因目標性狀小麥新品種的選育，發(fā)揮轉基因小麥在育種上的利用價值。 2抗性檢測 采用種子萌發(fā)生測法和苗期生測法進行PPT抗性鑒定表明，抗性植株表現(xiàn)出不同程度的抗性，而敏感植株明顯受到抑制。 PCR分子檢測結果表明，抗性株系擴增出長度約為571bp的特異片段，而陰性對照卻無任何條帶，說明外源bar基因已進入受體植株。

3、 GS酶活性檢測發(fā)現(xiàn)，用草丁膦處理過的非抗性小麥，植株葉片GS酶顯著下降，葉片失水，植株死亡；而轉bar基因小麥GS酶活性在顯著下降后又在短時間內逐漸恢復至正常水平。 PAT酶活性測定結果表明，在基因槍法轉化獲得的轉bar基因小麥植株中，PAT酶活性較高；在回交育種法獲得的回交一代、二代植株中，部分植株檢測出一定的酶活，而部分植株未檢測出酶活。 3.對葉綠素含量的影響 本研究發(fā)現(xiàn)，用草丁膦處理后，抗性植株葉

4、片的葉綠素含量與未噴施草丁膦的對照的葉綠素含量無明顯差異，敏感植株葉片GS酶活性發(fā)生下降，葉綠素含量也顯著下降，與對照差異顯著。說明草丁膦明顯影響非抗性小麥葉片葉綠素的含量，但對抗性品種的葉綠素含量沒有影響。 4bar基因的抗性遺傳 本實驗對轉基因株系T1、T2代的bar基因遺傳進行了觀察，結果表明，bar基因遺傳符合3：1的分離比率；而回交后代符合1：1的分離規(guī)律。說明通過回交可以方便地將bar基因轉育到其它小麥品種中