不同預(yù)處理方法對(duì)兔骨骼肌缺血再灌注損傷保護(hù)效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：臨床上各種原因引起的骨骼肌缺血十分常見。缺血組織恢復(fù)血液灌注后，部分組織細(xì)胞功能代謝障礙及結(jié)構(gòu)破壞反而更重，這種血液再灌注使缺血性損傷進(jìn)一步加重的現(xiàn)象稱為缺血-再灌注損傷(I/R)。而有學(xué)者發(fā)現(xiàn)短暫重復(fù)缺血，間斷再灌注的方法能夠提高組織缺血耐受性，這種方法稱為缺血預(yù)處理(IPC)。IPC提高組織對(duì)缺血的耐受性，減輕組織缺血再灌注損傷的作用已經(jīng)在不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的不同器官、組織中得到證實(shí)。但是缺血預(yù)處理時(shí)間和循環(huán)次數(shù)并無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，不同的

2、預(yù)處理方法對(duì)骨骼肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用是否有差別、何種缺血預(yù)處理方法能對(duì)骨骼肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用達(dá)到最大程度目前也尚無統(tǒng)一意見。 本研究模擬臨床氣囊止血帶的應(yīng)用方法，建立兔后肢缺血再灌注損傷模型，觀察不同的缺血預(yù)處理方法(缺血間隔時(shí)間、間隔次數(shù))對(duì)骨骼肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用是否存在差別，以期發(fā)現(xiàn)何種預(yù)處理方法能使IPC保護(hù)作用最強(qiáng)。 方法：選擇體重2.2-2.7kg，新西蘭白兔56只，隨機(jī)分為I/R、A、B

3、、C、D、E、F組7組，每組8只。I/R組不行預(yù)處理。A組：進(jìn)行2次5min間斷缺血，中間間隔2次5min間斷再灌流預(yù)處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復(fù)肢體血流。 B組：進(jìn)行3次5min間斷缺血，中間間隔3次5min間斷再灌流預(yù)處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復(fù)肢體血流。 C組：進(jìn)行4次5min間斷缺血，中間間隔4次5min間斷再灌流預(yù)處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復(fù)肢體血流。 D組：進(jìn)行2次

4、10min間斷缺血，中間間隔2次10min間斷再灌流預(yù)處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復(fù)肢體血流。 E組：進(jìn)行3次10min間斷缺血，中間間隔3次10min間斷再灌流預(yù)處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復(fù)肢體血流。 F組：進(jìn)行4次10min間斷缺血，中間間隔4次10min間斷再灌流預(yù)處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復(fù)肢體血流。 再用氣囊止血帶阻斷兔后肢血流4h，造成骨骼肌缺血再灌注損傷模型。測(cè)定再

5、灌注2h后兔血清中肌酸磷酸肌酶(CPK)和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)含量，肌肉干濕比。使用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各組數(shù)據(jù)均進(jìn)行正態(tài)檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，不同預(yù)缺血時(shí)間、循環(huán)次數(shù)對(duì)骨骼肌缺血再灌注損傷的影響數(shù)據(jù)采用方差分析(ANOVA)，組間比較采用SNK-q檢驗(yàn)。 結(jié)果： 1、血清中CPK、AST含量的比較I/R組和行預(yù)處理各組再灌注2h后動(dòng)物血清中CPK和AST均有不同程度的升高

6、。I/R組再灌注2h后動(dòng)物血清中CPK含量為9267.2±671.2，AST含量為246.7±18.2，較其它各組均高，差異有顯著性意義。E組再灌注2h后動(dòng)物血清中CPK含量為4621.6±297.6，AST含量為117.6±8.6，較其它各組均低，差異有顯著性意義。相同的預(yù)缺血時(shí)間下，再灌注后2h，B組CPK(8414.5±634.4)，AST(156.8±11.3)含量較A組、C組低，E組CPK(4621.6±297.6)和.AST

7、(117.6±8.6)含量較D組、F組低，差異有顯著性意義。相同的預(yù)缺血循環(huán)次數(shù)下，再灌注后2h，D組CPK和AST含量小于A組，E組小于B組，F(xiàn)組小于C組，差異有顯著性意義。B組與F組，C組與D組相比差異無顯著性。 2、肌肉干濕比的比較再灌注后2h，與對(duì)照組相比各實(shí)驗(yàn)組肌肉均有不同程度的水腫。I/R組再灌注2h后肌肉干濕比為0.163±0.016，較其它各實(shí)驗(yàn)組均低，肌肉水腫程度最重，差異有顯著性意義。E組再灌注2h后肌肉干濕

8、比為0.2780±0.028，較其它各實(shí)驗(yàn)組均高，肌肉水腫程度最輕，差異有顯著性意義。相同的預(yù)缺血時(shí)間下，再灌注后2h，B組肌肉干濕比較A組、C組高，E組肌肉干濕比較D組、F組高，差異有顯著性意義。相同的預(yù)缺血循環(huán)次數(shù)下，再灌注后2h，D組肌肉干濕比大于A組，E組大于B組，F(xiàn)組大于C組，差異有顯著性意義。B組與F組，C組與D組相比差異無顯著性。 結(jié)論： 1、IPC對(duì)骨骼肌缺血再灌注損傷具有一定的保護(hù)作用。 2、缺

9、血預(yù)處理5min對(duì)肌肉壞死即有保護(hù)作用，在相同的循環(huán)次數(shù)下預(yù)缺血10min效果較5min者好。缺血預(yù)處理2次循環(huán)對(duì)肌肉壞死即有保護(hù)作用，3次循環(huán)保護(hù)作用達(dá)高峰，而4次循環(huán)保護(hù)作用又相對(duì)減弱，但好于2次循環(huán)的保護(hù)效應(yīng)。缺血預(yù)處理5min，4次循環(huán)與預(yù)處理10min，2次循環(huán)對(duì)骨骼肌保護(hù)作用無差別，缺血預(yù)處理5min，3次循環(huán)與預(yù)處理10min，4次循環(huán)對(duì)骨骼肌保護(hù)作用無差別。 3、IPC總的保護(hù)作用呈先逐漸增強(qiáng)再逐漸減弱的趨勢(shì)。預(yù)