腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)小鼠卵受精率和囊胚形成率的影響.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)小鼠卵受精率和囊胚形成率的影響姓名：陳梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：婦科生殖內(nèi)分泌指導(dǎo)教師：郁琦20060501中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 傾十學(xué)位論文中文摘要腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)小鼠卵受精率和囊胚形成率的影響近年來(lái)子宮內(nèi)膜異位癥( e n d o m e t r i o s i S ，E M ) 發(fā)病率不斷上升，約5 ％～1 5 ％的育齡期婦女受其影響，其與不育癥的關(guān)系日益成為研究的熱點(diǎn)，但其病因與

2、發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，E M 患者分泌的腹腔液增多，腹腔液中巨噬細(xì)胞數(shù)量增多、功能增強(qiáng)，腹腔液和血清中由巨噬細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子也明顯增多，且與病變程度成難比。這些與不育是否有關(guān)、關(guān)系如何，目前尚不十分清楚。國(guó)內(nèi)外的研究對(duì)巨噬細(xì)胞對(duì)囊胚形成的作用意見(jiàn)不一致。本研究擬通過(guò)建立小鼠體外受精模型，觀察巨噬細(xì)胞對(duì)小鼠卵子受精率和囊胚形成率的影響。研究目的一．建立小鼠體外受精模型二．巨噬細(xì)胞對(duì)小鼠卵子受精率和囊胚形成率的影響1 ．分離、培養(yǎng)及鑒定小

3、鼠腹腔巨噬細(xì)胞；2 ．昆明小鼠精子提??；3 ．昆明小鼠的藥物誘導(dǎo)排卵；4 ．昆明小鼠的取卵；5 ．小鼠卵子與巨噬細(xì)胞體外共培養(yǎng)，觀察其對(duì)小鼠卵受精率和囊胚形成率的影響。研究方法1 ．觀察小鼠不同周齡( < 8 周，8 周～1 0 周，1 0 ～1 4 周和) 1 4 周) ，不同體重( ( 3 2 克，3 2 克～4 0 克和) 4 0 克) ，以及促排卵藥物不同劑量( 5 I U 、I O I U 和1 5 I U ) 和不同狀

4、態(tài)( 冷凍還是新鮮) 下，所取出鼠卵的數(shù)量和質(zhì)量，確定最佳的小鼠狀態(tài)和藥物劑量建立昆明小鼠體外誘導(dǎo)排卵模型。2 ．利用冰鹽水對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔內(nèi)注射，誘導(dǎo)腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，經(jīng)分離純化，通過(guò)鑒定證明收獲細(xì)胞約9 5 ％為巨噬細(xì)胞備用。3 ．通過(guò)設(shè)立實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，取卵后隨機(jī)把卵分成三組：①對(duì)照組，進(jìn)行小鼠卵子單獨(dú)培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中不與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)；o 實(shí)驗(yàn)組1 ：取卵后即與巨噬細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，觀察巨噬細(xì)胞作為共培養(yǎng)體系對(duì)小鼠卵子受精率和囊胚形