冠狀動(dòng)脈粥樣硬化與動(dòng)脈彈性相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景及目的：冠心病是影響人類生命健康和社會(huì)經(jīng)濟(jì)的重要因素之一，大約99﹪冠心病的原因是動(dòng)脈粥樣硬化。目前認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化是進(jìn)展炎癥疾病，其特征性病理改變?yōu)閮?nèi)膜粥樣斑塊形成和動(dòng)脈壁硬化，其具體機(jī)制尚未明確。因此，有關(guān)其發(fā)生、發(fā)展機(jī)制及發(fā)現(xiàn)防治措施的研究一直是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重大課題。動(dòng)脈粥樣硬化是全身性疾病，主動(dòng)脈粥樣硬化的早期表現(xiàn)是動(dòng)脈彈性的改變，這能否反映冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的程度，對(duì)于我們進(jìn)一步研究和早期發(fā)現(xiàn)早期防治動(dòng)脈粥樣硬化有重大意義

2、。環(huán)氧化酶2(cycloox、ygenase-2，COX-2)是環(huán)氧化酶參與炎癥反應(yīng)的異構(gòu)酶。多種研究表明COX-2在動(dòng)脈粥樣硬化的早期階段對(duì)病變的發(fā)展起促進(jìn)作用。NF-κB是細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)的重要轉(zhuǎn)錄因子，參與炎癥過(guò)程中的多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。膠原作為重要的細(xì)胞外基質(zhì)，不僅是粥樣硬化斑塊的支架結(jié)構(gòu)，而且在動(dòng)脈粥樣硬化病變進(jìn)程中發(fā)揮重要的作用。因此，COX-2、NF-κB及膠原在動(dòng)脈壁表達(dá)可以反映動(dòng)脈粥樣硬化程度。動(dòng)脈彈性指動(dòng)脈壁的緩沖能力，

3、反映動(dòng)脈舒張功能的狀態(tài)，取決于動(dòng)脈腔徑大小和管壁硬度，其功能的正常有賴于動(dòng)脈結(jié)構(gòu)組成成分?jǐn)?shù)量與功能的正常。脈搏波速度是目前較常用的一種評(píng)價(jià)血管病變的方法，是脈搏波在動(dòng)脈系統(tǒng)兩個(gè)既定點(diǎn)間的傳播速度，根據(jù)Moens-Korteweg方程，其大小取決于動(dòng)脈壁的生物力學(xué)特性(動(dòng)脈彈性)、血管幾何特征(腔徑與壁厚度)以及血液粘度。由于血管幾何特征和血液粘度變化相對(duì)較小，因此PWV可以反映動(dòng)脈彈性的變化?？箘?dòng)脈粥樣硬化的藥理研究方面，他汀類藥物是有

4、效的降脂藥物，已證實(shí)他汀類藥物還具有直接抗炎作用，在AS形成過(guò)程中其改善動(dòng)脈彈性功能的作用已被證實(shí)。氨氯地平是第三代鈣通道阻滯劑，目前認(rèn)為具有明確的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，但其對(duì)動(dòng)脈硬化時(shí)動(dòng)脈彈性的影響尚不明確，本實(shí)驗(yàn)在采用高膽固醇飲食誘導(dǎo)法成功建立新西蘭兔AS模型的基礎(chǔ)上，對(duì)動(dòng)脈血管標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。以阿托伐他汀為比較，探討氨氯地平改善動(dòng)脈彈性的作用。進(jìn)一步以病理形態(tài)學(xué)為標(biāo)準(zhǔn)，旨在研究動(dòng)脈彈性的改善與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化程度的相關(guān)性。

5、 材料與方法：健康雄性新西蘭兔18只，隨機(jī)分為4組，即正常對(duì)照組、模型組、他汀組、地平組，每組各6只，喂養(yǎng)方式如下：正常對(duì)照組：普通顆粒飼料150g/d 喂養(yǎng)12周。模型組：高膽固醇飲食喂養(yǎng)12周。他汀組：高膽固醇飲食喂養(yǎng)4周后，在高膽固醇飲食基礎(chǔ)上加阿托伐他2.5rag/(kg.d)治療至12周。地平組：高膽固醇飲食喂養(yǎng)4周后，在高膽固醇飲食基礎(chǔ)上加氨氯地平5mg/(kg.d)治療至12周。藥物用蒸餾水配成溶液后以灌胃方式每天下午3

6、-4點(diǎn)一次給予。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中進(jìn)行如下檢測(cè)：(1)分別于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前1天及實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的第12周木，空腹從兔耳緣靜脈采血6-8 ml測(cè)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)低密度脂蛋白膽固醉(LDL-C)、一氧化氮(NO)；(2)實(shí)驗(yàn)前1天及實(shí)驗(yàn)結(jié)束用30mg/kg戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉，動(dòng)物固定在兔解剖臺(tái)上，將體重、兔長(zhǎng)輸入法國(guó)公司研制生產(chǎn)的脈搏波速度測(cè)定儀一康普樂(lè)(Complior SP)同時(shí)進(jìn)行兔子頸一股動(dòng)脈PWV的測(cè)定；(3)冠狀動(dòng)脈及

7、主動(dòng)脈組織病理學(xué)檢查；(4)應(yīng)用Masson染色進(jìn)行動(dòng)脈膠原含量測(cè)定；(5)免疫組化法分析COX-2蛋白與NF-к(B蛋白在冠狀動(dòng)脈及主動(dòng)脈中的表達(dá)。 結(jié)果： 模型組與對(duì)照組比較，冠狀動(dòng)脈血管粥樣硬化梗塞程度加重,PWV明顯加快，血管壁COX-2及NF-кB表達(dá)明顯增強(qiáng)，主動(dòng)脈膠原含量增加(P均<0.05)。阿托伐他汀與氨氯地平干預(yù)后，動(dòng)脈粥樣硬化程度減輕，PWV降低，血管壁COX-2及NF-кB明顯表達(dá)減弱且各組動(dòng)脈脈

8、搏波速度與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化程度明顯相關(guān)、主動(dòng)脈粥樣硬化程度、動(dòng)脈COX-2及NF-кB的表達(dá)明顯相關(guān)(P均<0.05)。環(huán)氧化酶2與NF-кB及膠原含量的表達(dá)均相關(guān)(P均<0.05)。 結(jié)論： 1.動(dòng)脈粥樣硬化早期脈搏波速度與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化程度明顯相關(guān)； 2.高膽固醇血癥及其誘發(fā)的炎癥反應(yīng)參與了早期動(dòng)脈粥樣硬化的形成過(guò)程;高膽固醇血癥兔早期主動(dòng)脈粥樣硬化病變中COX-2蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)； 3.COX-2