阻斷胰腺癌細胞膜hENT-,s-對氟尿嘧啶細胞毒性的影響.pdf

1、目的：研究應用平衡型核苷轉運載體(hENTs)的阻斷劑阻斷hENTs后，對氟尿嘧啶(5-Fluorouraci，5-FU)細胞毒性的影響及其機制。 方法：逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測三種胰腺癌細胞株Pane-1，Sw1990和Aspc-1中hENT<,1>、hENT<,2>、hCNT<,1>、hCNT<,2>、hCNT<,3>的mRNA表達。三種細胞株接種于96孔板后，被分為hENTs阻斷組和hENTs未阻斷組進行M

2、TT實驗，其中hENTs阻斷組根據(jù)阻斷劑DP濃度進一步分為兩個亞組，即DP濃度為5μM和10μM組，各組細胞分別在含有一定濃度序列5-FU的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48h。MTT法檢測3種細胞株每組的增殖情況，并計算各組5-FU的IC<,50>。為研究DP聯(lián)合5-FU對Pane-1細胞凋亡和細胞周期的影響，Pane-1細胞根據(jù)DP濃度也被分成3組進行實驗。各組細胞分別在含有5-FU的培養(yǎng)液中培養(yǎng)24h，其中5-FU的濃度為MTT實驗中hENTs未阻

3、斷組Pane-1細胞IC<,50>的2倍。流式細胞儀檢測細胞的凋亡率和周期改變。 結果：MTT結果顯示5-FU抑制了3種細胞株的增殖。DP阻斷hENTs后，在Panc-1和Sw1990細胞，能明顯增強5-FU的作用，而在Aspc-1中則不能增強5-FU的作用。這種差別與細胞表達hENTs的不同有關，在Pane-1和Sw1990細胞中，hENTs高表達，而在Aspc-1中則hENT<,1>表達較低，hENT<,2>無表達。與未阻斷

4、組比較，DP 10μM阻斷組中5-FU的IC<,50>在Pane-1細胞降低了7倍(P<0.01)，在Sw1990細胞降低了10倍(P<0.01)，在Aspc-1細胞沒有改變。流式細胞儀檢測凋亡和周期結果發(fā)現(xiàn)，5-FU能引起Pane-1細胞凋亡和周期的改變，而DP阻斷hENTs后，增強了5-FU誘導Pane-1細胞凋亡和干擾細胞S期合成DNA的作用，其中DP 10μM組細胞凋亡率是hENTs未阻斷組的1.80倍(P<0.01)，S期的細