銀杏外種皮有效成分的代謝及EGBE的制備研究.pdf

1、我國銀杏外種皮資源豐富。為了進一步開發(fā)和利用銀杏外種皮資源，本研究選用兩個銀杏核用主栽品種佛指和洞庭皇的成年結(jié)實樹各一株，從盛花后30天起至成熟采收，每隔15天定期隨機采集各品種供試植株種實100粒，一部分新鮮外種皮用于測定其中PAL的含量和活性。另一部分進行外種皮的干燥和保存處理；取銀杏干燥的外種皮，采用不同溶劑和方法測定其各有效成分的含量，制備EGBE，經(jīng)進一步純化，采用RP-HPLC測定其銀杏類黃酮和銀杏內(nèi)酯的含量。結(jié)果表明：

2、 1、采用低溫保存的銀杏外種皮中類黃酮和內(nèi)酯含量的下降較常溫保存不僅推遲6-8d，而且下降幅度較??；采用冷凍干燥的銀杏外種皮中類黃酮和內(nèi)酯含量顯著高于自然晾干處理的外種皮； 2、洞庭皇品種外種皮中銀杏類黃酮和銀杏內(nèi)酯A的含量顯著高于佛指品種，品種間銀杏內(nèi)酯B、C和白果內(nèi)酯含量差異不顯著； 3、銀杏外種皮中銀杏類黃酮和銀杏內(nèi)酯含量隨著種實的生長而逐漸上升。其中銀杏類黃酮含量至盛花后60d出現(xiàn)第一高峰，盛花后90d出現(xiàn)第

3、二高峰，并達最大值，佛指品種和洞庭皇品種分別達到18.32mg/gDW和21.01mg/gDW；銀杏內(nèi)酯含量至盛花后90d出現(xiàn)最大值，佛指品種和洞庭皇品種分別達到3.03mg/gDW和4.13mg/gDW；隨著種實的成熟，外種皮中銀杏類黃酮和銀杏內(nèi)酯含量逐漸下降，至采收時佛指品種和洞庭皇品種外種皮中銀杏類黃酮含量分別下降到12.36mg/gDW和14.65mg/gDW，銀杏內(nèi)酯含量分別下降到1.21mg/gDW和1.59mg/gDW；

4、 4、洞庭皇品種外種皮中PAL含量顯著高于佛指品種，品種間PAL活性差異不顯著。銀杏外種皮中PAL的含量和活性隨著種實的生長而逐漸上升，至盛花后120d出現(xiàn)最大值，洞庭皇品種和佛指品種的PAL含量分別達到163.08ug/g和145.38ug/g；PAL活性分別達到73.6U和65.4U；隨著種實的成熟，外種皮中PAL含量和活性逐漸下降，至采收時洞庭皇佛指品種和品種外種皮中PAL含量分別下降到56.64ug/g和55.24ug/g

5、；PAL活性分別下降到7.2U和6.5U，與種實生長期間外種皮中銀杏類黃酮含量的變化相對一致； 5、常規(guī)水浴回流提取的銀杏外種皮中類黃酮含量高于超聲提取法，而提取的銀杏內(nèi)酯含量低于后者，兩者的差異達到顯著水平；用100％甲醇作提取溶劑時，前者的EGBE得率為1.56，后者的得率為1.36％；用50％乙醇作提取溶劑時，前者的EGBE得率為2.56％，后者的得率為1.98％；50％和60％的乙醇濃度提取的類黃酮和內(nèi)酯含量顯著或極顯著

6、高于其他乙醇濃度；1∶10(W/V)的料液比提取的類黃酮含量明顯高于其他料液比； 6、采用干燥的銀杏外種皮，經(jīng)脫脂、回流提取和濃縮，得EGBE浸膏；經(jīng)進一步萃取，得去除酚酸類成分后的EGBE；再經(jīng)進一步進行樹脂吸附，得含有黃酮類和內(nèi)酯類化合物的EGBE；最后經(jīng)活化的酸性氧化鋁柱分離，得白色晶狀的含有4種銀杏內(nèi)酯的混合物，其各級EGBE的得率洞庭皇分別為17.75％、3.26％、2.56％和0.16％，佛指為17.21％、3.11

7、％、1.98％和0.12％ 7、用60％乙醇溶解EGBE后，用正己烷1∶1(V/V)萃取，可獲得去除酚酸類成分的EGBE；用ADS-17大孔吸附樹脂對去除銀杏酚酸類物質(zhì)后的EGBE吸附，采用4倍于樹脂床體積的洗脫液可將吸附的類黃酮洗脫完全，EGBE得率為2.56％。其中類黃酮得率為1.465％，70％的乙醇和100％的甲醇洗脫效果最好，其洗脫液中類黃酮的含量分別為14.65mg/gDW和13.280mg/gDW，銀杏內(nèi)酯含量分別