銀杏外種皮有效成分的代謝及EGBE的制備研究.pdf

1、我國(guó)銀杏外種皮資源豐富。為了進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用銀杏外種皮資源，本研究選用兩個(gè)銀杏核用主栽品種佛指和洞庭皇的成年結(jié)實(shí)樹(shù)各一株，從盛花后30天起至成熟采收，每隔15天定期隨機(jī)采集各品種供試植株種實(shí)100粒，一部分新鮮外種皮用于測(cè)定其中PAL的含量和活性。另一部分進(jìn)行外種皮的干燥和保存處理；取銀杏干燥的外種皮，采用不同溶劑和方法測(cè)定其各有效成分的含量，制備EGBE，經(jīng)進(jìn)一步純化，采用RP-HPLC測(cè)定其銀杏類黃酮和銀杏內(nèi)酯的含量。結(jié)果表明：

2、 1、采用低溫保存的銀杏外種皮中類黃酮和內(nèi)酯含量的下降較常溫保存不僅推遲6-8d，而且下降幅度較??；采用冷凍干燥的銀杏外種皮中類黃酮和內(nèi)酯含量顯著高于自然晾干處理的外種皮； 2、洞庭皇品種外種皮中銀杏類黃酮和銀杏內(nèi)酯A的含量顯著高于佛指品種，品種間銀杏內(nèi)酯B、C和白果內(nèi)酯含量差異不顯著； 3、銀杏外種皮中銀杏類黃酮和銀杏內(nèi)酯含量隨著種實(shí)的生長(zhǎng)而逐漸上升。其中銀杏類黃酮含量至盛花后60d出現(xiàn)第一高峰，盛花后90d出現(xiàn)第

3、二高峰，并達(dá)最大值，佛指品種和洞庭皇品種分別達(dá)到18.32mg/gDW和21.01mg/gDW；銀杏內(nèi)酯含量至盛花后90d出現(xiàn)最大值，佛指品種和洞庭皇品種分別達(dá)到3.03mg/gDW和4.13mg/gDW；隨著種實(shí)的成熟，外種皮中銀杏類黃酮和銀杏內(nèi)酯含量逐漸下降，至采收時(shí)佛指品種和洞庭皇品種外種皮中銀杏類黃酮含量分別下降到12.36mg/gDW和14.65mg/gDW，銀杏內(nèi)酯含量分別下降到1.21mg/gDW和1.59mg/gDW；

4、 4、洞庭皇品種外種皮中PAL含量顯著高于佛指品種，品種間PAL活性差異不顯著。銀杏外種皮中PAL的含量和活性隨著種實(shí)的生長(zhǎng)而逐漸上升，至盛花后120d出現(xiàn)最大值，洞庭皇品種和佛指品種的PAL含量分別達(dá)到163.08ug/g和145.38ug/g；PAL活性分別達(dá)到73.6U和65.4U；隨著種實(shí)的成熟，外種皮中PAL含量和活性逐漸下降，至采收時(shí)洞庭皇佛指品種和品種外種皮中PAL含量分別下降到56.64ug/g和55.24ug/g

5、；PAL活性分別下降到7.2U和6.5U，與種實(shí)生長(zhǎng)期間外種皮中銀杏類黃酮含量的變化相對(duì)一致； 5、常規(guī)水浴回流提取的銀杏外種皮中類黃酮含量高于超聲提取法，而提取的銀杏內(nèi)酯含量低于后者，兩者的差異達(dá)到顯著水平；用100％甲醇作提取溶劑時(shí)，前者的EGBE得率為1.56，后者的得率為1.36％；用50％乙醇作提取溶劑時(shí)，前者的EGBE得率為2.56％，后者的得率為1.98％；50％和60％的乙醇濃度提取的類黃酮和內(nèi)酯含量顯著或極顯著

6、高于其他乙醇濃度；1∶10(W/V)的料液比提取的類黃酮含量明顯高于其他料液比； 6、采用干燥的銀杏外種皮，經(jīng)脫脂、回流提取和濃縮，得EGBE浸膏；經(jīng)進(jìn)一步萃取，得去除酚酸類成分后的EGBE；再經(jīng)進(jìn)一步進(jìn)行樹(shù)脂吸附，得含有黃酮類和內(nèi)酯類化合物的EGBE；最后經(jīng)活化的酸性氧化鋁柱分離，得白色晶狀的含有4種銀杏內(nèi)酯的混合物，其各級(jí)EGBE的得率洞庭皇分別為17.75％、3.26％、2.56％和0.16％，佛指為17.21％、3.11

7、％、1.98％和0.12％ 7、用60％乙醇溶解EGBE后，用正己烷1∶1(V/V)萃取，可獲得去除酚酸類成分的EGBE；用ADS-17大孔吸附樹(shù)脂對(duì)去除銀杏酚酸類物質(zhì)后的EGBE吸附，采用4倍于樹(shù)脂床體積的洗脫液可將吸附的類黃酮洗脫完全，EGBE得率為2.56％。其中類黃酮得率為1.465％，70％的乙醇和100％的甲醇洗脫效果最好，其洗脫液中類黃酮的含量分別為14.65mg/gDW和13.280mg/gDW，銀杏內(nèi)酯含量分別