銀杏外種皮多糖的提取純化及一級結構研究.pdf

1、多糖(polysaccharides，PS)是自然界中含量最豐富的一類多聚合物，而植物活性多糖不僅具有多方面的生物學功能，更是有多種藥理活性，比如能夠誘導體內(nèi)免疫物質(zhì)的產(chǎn)生，提高機體的免疫作用，抑制腫瘤的生長和擴散，降低血糖和血脂等，所以近年來多糖成為天然藥物研究的熱點之一。多糖是一種非細胞的毒性物質(zhì)，作為藥物應用的最大優(yōu)點是毒副作用較少，且其來源比較廣泛；因此，活性多糖既可以作為一類理想而有效的藥物，也可以作為人們的保健食品。

2、　　 銀杏是一種古老的孑遺植物。可以說它渾身都是寶，集食用、藥用、材用、綠化等多種用途于一體，它的葉、果實、花粉和外種皮等皆具有藥用開發(fā)價值，是世界上珍貴的藥用植物，因此可稱之為“全身都是寶的活化石”。中國不但是銀杏的故鄉(xiāng)，而且是世界銀杏資源中心，世界上超過90％的銀杏白果都是來自中國，一直以來白果都是我國一種重要的出口創(chuàng)匯產(chǎn)品；據(jù)調(diào)查，截止到目前，全國有將近三十個省(市)都有銀杏的種植，銀杏的核用栽培已然成為我國銀杏產(chǎn)區(qū)的支柱產(chǎn)業(yè)。

3、據(jù)估計，我國銀杏白果的年產(chǎn)量在1.3萬噸左右，而銀杏外種皮約占銀杏果實的70％，即我們每年將有大約3萬噸的新鮮銀杏外種皮被廢棄，這不僅造成了銀杏資源的巨大浪費，而且造成了環(huán)境的嚴重污染。
　　 銀杏外種皮多糖(Ginkgo biloba exocarp polysaccharides，GBEP)是從銀杏果實的外種皮中提取后獲得的一種活性多糖。銀杏外種皮是加工白果后的廢棄物，有研究發(fā)現(xiàn)銀杏外種皮中的多糖含量比較高，約含10％以上，

4、并且具有抗癌、調(diào)節(jié)免疫力、抵抗衰老、降低血脂、止咳等多種功能，所以把銀杏外種皮多糖作為藥物或者保健食品的一種中間體產(chǎn)品，則能變廢為寶，對農(nóng)業(yè)資源中銀杏外種皮的綜合及合理利用和環(huán)境的保護意義重大。
　　 通觀銀杏外種皮多糖的各種文獻報道，其研究還基本停留在對多糖的提取、分離及純化、對分子量的測定、藥理活性以及單糖成分等的初級研究階段，對銀杏外種皮多糖的一級結構研究尚未見報道；文獻資料表明多糖的生物活性與它們的化學結構是密切相關的，

5、一級結構又是進一步深入研究多糖的特異性和構效關系以及藥效學機理的基礎。所以本課題以銀杏外種皮為實驗材料，研究了銀杏外種皮多糖的提取工藝及含量測定方法、分離純化水溶性銀杏外種皮多糖，并對該多糖的糖鏈的分子量、糖殘基之間的連接方式和順序等一級結構信息進行研究，為更好的研究銀杏外種皮多糖的生物學活性奠定一定的理論基礎，為銀杏外種皮在多糖領域的深入開發(fā)及研究提供一條全新的途徑。本課題的主要研究內(nèi)容及結果如下：
　　 1對銀杏外種皮多糖提

6、取工藝的研究。常規(guī)的熱水浸提法來提取GBEP，將其濾液濃縮后用乙醇沉淀得銀杏外種皮粗多糖。優(yōu)選提取工藝，最佳的提取條件是：料液比為1:10、水煮時間2h、提取次數(shù)3次、溫度為95℃。得咖啡色粉末即銀杏外種皮多糖，其得率約為9.41g/100g。
　　 2苯酚-硫酸法測定銀杏外種皮多糖的含量。單因素實驗基礎上來優(yōu)選測定條件：硫酸用量為4ml、苯酚溶液1.2ml(質(zhì)量分數(shù)5％)、顯色溫度為30℃、顯色時間為20min。硫酸用量是影響

7、顯色的一個關鍵因素，用該方法測得的銀杏外種皮多糖含量為44.15％。
　　 3銀杏外種皮多糖的重醇沉純化。將大批量提取后的粗多糖再次溶于水，進行重醇沉純化；通過對料液比、時間、溫度等因素的考察來確定多糖得率最高的重醇沉條件。即：抽濾后未干燥多糖以1:3的比例直接溶于水，冷凝回流裝置95℃攪拌溶解2h，多糖得率為75.2％。
　　 4銀杏外種皮多糖的脫色及脫蛋白。用雙氧水對多糖進行脫色，溫度為40℃，時間3h，雙氧水加量0