條斑紫菜多糖的提取、純化及結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、我國紫菜栽培面積巨大，其含有豐富的營養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)，但深加工技術(shù)落后，現(xiàn)有產(chǎn)品多為初級產(chǎn)品和粗產(chǎn)品，還未進(jìn)入應(yīng)用高新技術(shù)進(jìn)行深層次的加工和利用。本研究擬采用我省資源豐富的條斑紫菜為原料，制備紫菜多糖。并對條斑紫菜多糖進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，包括提取條件優(yōu)化、分離純化、理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及免疫活性等方面。主要結(jié)果如下:
　　 1、通過Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化木瓜蛋白酶法提取條斑紫菜多糖的工藝條件（提取溫度x1、提取時間x2和木

2、瓜蛋白酶濃度x3），建立條斑紫菜多糖提取模型方程為Y=24.82-0.37x1+1.54x2-1.02x3-0.16x1x2+1.54x1x3-1.34x2x3-3.30x12-3.17x22-2.31x32。確定木瓜蛋白酶輔助提取條斑紫菜多糖的最佳提取條件為:液料比為50mL/g，木瓜蛋白酶濃度為0.6％提取溫度為70℃，提取時間為3.5 h，在此條件下，條斑紫菜多糖得率為25.03％。
　　 2、研究得出三氯乙酸法除蛋白的最

3、佳條件為:三氯乙酸濃度1.5％，處理時間30min，蛋白清除為92.43％，多糖損失率為14.62％。
　　 3、脫蛋白的條斑紫菜多糖(PYP)經(jīng)DEAE纖維素-52和Sephadex G-100進(jìn)行分離純化，得到PYP-1、PYP-2、PYP-3和PYP-4四個組分，經(jīng)過高效凝膠過濾色譜法對純度進(jìn)一步鑒定，發(fā)現(xiàn)PYP-1不是單一組分，還需要進(jìn)一步分離純化;PYP-2、PYP-3和PYP-4都是均一的多糖組分。
　　 4

4、、條斑紫菜多糖粗多糖、PYP-2、PYP-3和PYP-4總糖含量分別為84.32％、91.83％、96.93％和97.66％;蛋白質(zhì)含量分別是:1.27％、1.98％、未檢測出和未檢測出;糖醛酸含量分別為18.23％、19.39％、23.77％和15.83％;硫酸基含量分別為14.10％、18.84％、17.63％和18.41％。三個均一組分的相對分子質(zhì)量分別為478.6KDa，314.4KDa，417.3KDa。
　　 高效氣

5、相色譜分析發(fā)現(xiàn)PYP-1由8種單糖組成，分別為巖藻糖、氨基葡萄糖、鼠李糖、氨基半乳糖、半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖，摩爾百分含量分別為3.28％、1.20％、7.98％、5.16％、53.97％、22.74％、3.36％、和2.31％; PYP-2由半乳糖、葡萄糖和木糖3種單糖組成，摩爾百分比含量分別為92.52％、4.52％和2.92％; PYP-3也由半乳糖、葡萄糖和木糖3種單糖組成，摩爾百分含量94.12％、3.84％和2.05％

6、; PYP-4由97.46％半乳糖、1.52％葡萄糖和1.02％木糖3種單糖組成。
　　 紫外光譜顯示，PYP-3和PYP-4不合有核酸和蛋白類物質(zhì)。PYP-2有更強(qiáng)的蛋白氨基吸收峰。紅外光譜掃描結(jié)果，粗多糖及各純化組分均具有多糖類物質(zhì)的特征吸收峰，均為吡喃糖，且含有硫酸基和3.6-內(nèi)醚橋，均是β-糖苷鍵鏈接的多糖分子5、運(yùn)用細(xì)胞模型實驗研究比較了粗PYP、PYP-2、PYP-3和PYP-4的體外免疫調(diào)節(jié)活性。結(jié)果表明:條斑紫菜