廣西豬瘟病毒不同來(lái)源株的E2基因的克隆和序列分析.pdf

1、本研究采用RT-PCR技術(shù)對(duì)來(lái)自廣西不同地區(qū)的豬流產(chǎn)胎兒與死胎82份、新生仔豬33份和老母豬白細(xì)胞172份進(jìn)行豬瘟病毒檢測(cè)，結(jié)果共有9份為陽(yáng)性，其中死胎及流產(chǎn)胎兒4份、新生仔豬3份和母豬白細(xì)胞2份，從陽(yáng)性病料中選取6份進(jìn)行豬瘟病毒E2基因的克隆、測(cè)序，得到長(zhǎng)度為1119核苷酸的目的基因片段。將這些陽(yáng)性材料接種于易感細(xì)胞PK-15，經(jīng)過(guò)三代盲傳，用RT-PCR可檢測(cè)到GXGZ02、GXXJCl和GXXJBl材料所接種的細(xì)胞為豬瘟陽(yáng)性。

2、 應(yīng)用DNAstar序列分析軟件對(duì)所測(cè)定的6個(gè)毒株與已知序列的HCLV、Shimen等毒株的相應(yīng)片段進(jìn)行同源性分析比較。結(jié)果顯示，GXGZ02株與HCLV、Shimen株的核苷酸同源性分別為82.3％和84.2％，其余5株與HCLV、Shimen株的核苷酸同源性分別為96.8％～97.3％和94.3％～94.9％，推定的氨基酸同源性分別為89.8％～96.4％和91.2％～94.5％。除GXGZ02株，其余5株毒株之間核苷酸和推定的

3、氨基酸同源性分別為99.1％～99.6[％]和98.4％～99.2％。6個(gè)廣西毒株E2基因的所有Cys位點(diǎn)都沒(méi)變，可推測(cè)豬瘟病毒E2蛋白在抗原結(jié)構(gòu)方面依然保持很高的穩(wěn)定性。與石門(mén)毒株、兔化弱毒疫苗株相比，廣西毒株在具有中和特性的B、C區(qū)域內(nèi)723和724氨基酸位點(diǎn)發(fā)生了變異。 把6個(gè)廣西毒株與國(guó)內(nèi)外已發(fā)表的豬瘟病毒相應(yīng)序列進(jìn)行比較，并建立了遺傳進(jìn)化樹(shù)。該遺傳樹(shù)主要分為兩大群和一個(gè)另類(lèi)，除GXGZ02株屬于基因Ⅱ群外，其余五株皆屬