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文檔簡介
1、 本文以我國多重耐藥傷寒桿菌中分離的98.6Md的不相容性C群接合性耐藥質(zhì)粒pRST98為對象,研究其介導(dǎo)細(xì)菌耐藥性的同時(shí)能否使宿主菌毒力增強(qiáng)。 本文第一部分將pRST98經(jīng)接合轉(zhuǎn)移導(dǎo)入有成熟動物模型和遺傳背景明確的鼠傷寒桿菌低毒株RIA得到接合子pRST98/RIA,并用攜帶一分子量為100Kb毒力質(zhì)粒的鼠傷寒桿菌標(biāo)準(zhǔn)毒株SR-11作陽性對照,研究pRST98在動物體內(nèi)對細(xì)菌毒力的影響;將三株鼠傷寒桿菌口飼感染BALB/c小
2、鼠后計(jì)數(shù)腸系膜淋巴結(jié)、脾和肝臟的活菌數(shù)并觀察相應(yīng)臟器的組織學(xué)改變。 本文第二部分研究pRST98與血清殺菌試驗(yàn)中細(xì)菌抵抗力的關(guān)系;并用標(biāo)準(zhǔn)系列稀釋法比較上述三株細(xì)菌在小鼠腹腔巨噬細(xì)胞MφJ(rèn)774A.1中的存活率,研究pRST98對細(xì)菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)存活的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示BALB/c小鼠對鼠傷寒桿菌先天易感,經(jīng)腹腔(i.p.)和經(jīng)口(p.o.)兩種途徑感染后,小鼠發(fā)病重,LD50均比昆明鼠低。BALB/c小鼠i.p.感染后,pRS
3、T98/RIA毒力比陰性對照組RIA提高約75倍,p.o.組提高約700倍;昆明種小鼠感染后,毒力分別比RIA組提高約50倍和350倍。攜帶pRST98的鼠傷寒桿菌感染小鼠后,腸系膜淋巴結(jié)、脾和肝臟的活菌數(shù)明顯增高(P<0.05),且引起臟器發(fā)生嚴(yán)重病變。攜帶pRST98的傷寒桿菌在血清中的抵抗力顯著高于無此質(zhì)粒的菌株(P<0.05)。巨噬細(xì)胞吞噬試驗(yàn)顯示該質(zhì)粒能提高傷寒桿菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)的生存能力。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明pRST98不但能編碼
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