IGF-1R磷酸化調控Sox2表達影響胃癌干性功能及預后研究.pdf

1、第一部分：
　　目的：磷酸化胰島素樣生長因子-1受體（P-IGF-1R）在腫瘤惡性轉化和轉移中發(fā)揮關鍵作用。同樣，它在維護腫瘤干細胞干性特征及細胞生存中也起著至關重要的作用。本研究的目的是探討P-IGF-1R和干細胞因子Sox2蛋白表達相關性及其在胃癌（GC）中表達的臨床意義。
　　方法：利用免疫組織化學方法檢測P-IGF-1R和Sox2在227例行可切除胃癌的組織標本中蛋白表達，并分析兩者表達的相關性。此外，結合患者的臨床

2、資料，分析P-IGF-1R和Sox2表達與患者的臨床病理特征以及預后關系。
　　結果：P-IGF-1R、IGF-1R和Sox2在胃癌組織中的表達率分別是41.9％、45.8%及22.5%。P-IGF-1R與 TNM分期、淋巴結轉移及手術方式等臨床病理特征相關（P<0.05）。Sox2與手術方式、淋巴結轉移、遠處轉移和TNM分期有關（P<0.05）。此外，P-IGF-1R表達Sox2的表達呈正相關（r=0.301，P<0.001）。

3、單因素和多因素分析表明，在P-IGF-1R和Sox2的高表達其預后差于低表達的患者，同時兩者共同高表達的胃癌患者較兩者均低表達預后差（P<0.01）。95例患者接受輔助FOLFOX-4方案或者 XELOX方案化療發(fā)現(xiàn)共同高表達的P-IGF-1R/Sox2患者預后較差（P<0.05）。多因素分析亦發(fā)現(xiàn)TNM分期、手術方式及輔助化療影響著胃癌患者的預后。
　　結論：TNM分期、手術方式及輔助化療影響著胃癌患者的預后，P-IGF-1R和

4、Sox2在胃癌組織中高表達預示著胃癌患者生存預后差，它們可成為新的判斷預后的分子標記物以及潛在的治療胃癌的靶點。
　　第二部分：
　　目的：磷酸化胰島素樣生長因子-1受體（P-IGF-1R）在腫瘤惡性轉化和轉移中發(fā)揮關鍵作用。同樣，它在維護腫瘤干細胞干性特征及細胞生存中也起著至關重要的作用。本研究的目的是探討P-IGF-1R和干細胞因子Sox2蛋白表達相關性及其在胃癌（GC）中表達的臨床意義。
　　方法：利用免疫組織化

5、學方法檢測P-IGF-1R和Sox2在227例行可切除胃癌的組織標本中蛋白表達，并分析兩者表達的相關性。此外，結合患者的臨床資料，分析P-IGF-1R和Sox2表達與患者的臨床病理特征以及預后關系。
　　結果：P-IGF-1R、IGF-1R和Sox2在胃癌組織中的表達率分別是41.9%、45.8%及22.5%。P-IGF-1R與 TNM分期、淋巴結轉移及手術方式等臨床病理特征相關（P<0.05）。Sox2與手術方式、淋巴結轉移、遠

6、處轉移和TNM分期有關（P<0.05）。此外，P-IGF-1R表達Sox2的表達呈正相關（r=0.301，P<0.001）。單因素和多因素分析表明，在P-IGF-1R和Sox2的高表達其預后差于低表達的患者，同時兩者共同高表達的胃癌患者較兩者均低表達預后差（P<0.01）。95例患者接受輔助FOLFOX-4方案或者 XELOX方案化療發(fā)現(xiàn)共同高表達的P-IGF-1R/Sox2患者預后較差（P<0.05）。多因素分析亦發(fā)現(xiàn)TNM分期、手術

7、方式及輔助化療影響著胃癌患者的預后。
　　結論：TNM分期、手術方式及輔助化療影響著胃癌患者的預后，P-IGF-1R和Sox2在胃癌組織中高表達預示著胃癌患者生存預后差，它們可成為新的判斷預后的分子標記物以及潛在的治療胃癌的靶點。
　　第三部分：
　　目的：進展期胃癌及胃食管結合部癌患者能否從術前新輔助化療(NAC)中獲益仍是有爭議的。本文對已發(fā)表的研究進行Meta分析，以評價以氟尿嘧啶為基礎的新輔助化療在胃食管結合部

8、癌及胃癌治療中的作用。
　　方法：以Medline和手工搜索方式獲取全部已發(fā)表的隨機對照試驗(RCTs)，這些試驗均為研究以氟尿嘧啶為基礎的新輔助化療方案的療效。主要評價指標為胃食管結合部癌患者生存率提高的比值比OR值，次要評價指標為胃食管結合部癌及胃癌患者腫瘤降期率及增加R0切除率的OR值，并進行安全性分析。以比值比（OR）來評價療效，OR值是以試驗組（新輔助化療+手術治療組）與對照組（單純手術組）的比值比及其95%可信區(qū)間計算

9、，以RevMan5.1進行全部運算及統(tǒng)計學分析。
　　結果：共有7個隨機對照試驗納入本研究。Meta分析顯示兩組總體生存率分別為44.7%和36.7%，OR值為1.40(1.11–1.76，95%CI)，P=0.005，差異具有統(tǒng)計學意義；3年無病生存率的為OR=1.62，（1.21-2.15，95%CI），P=0.001；腫瘤降期率(55.76%vs41.38%)，增加R0切除率(75.11%vs68.56%)，OR值分別為1.

10、77(1.27–2.49,95% CI)，P=0.0009和1.38(1.03–1.85,95% CI)，P=0.03均具有統(tǒng)計學意義。這些試驗中均沒有明顯增加死亡率(5.08%vs4.86%)和并發(fā)癥(13.25%vs9.66%)等安全性問題(P>0.05)。此外，分層分析發(fā)現(xiàn)新輔助化療在歐洲國家人群、聯(lián)合化療以及靜脈給藥方式可以獲得良好的預后。
　　結論：以氟尿嘧啶的基礎的新輔助化療方案可以提高胃癌及胃食管結合部癌患者的總生存

11、率，并具良好安全性。另外，新輔助化療還能使腫瘤降期并提高R0切除。
　　第四部分：
　　目的：IGFR作為酪氨酸激酶受體家族成員在很多惡性腫瘤中存在異常調控和高表達等現(xiàn)象，包括胃癌在內（GC）。IGF-1R是IGFR家族的一員，已被證明腫瘤發(fā)生、增殖、耐藥性以及轉移中發(fā)揮了關鍵作用。最近，有研究報到在這些腫瘤細胞中存在少部分的亞群細胞稱之為腫瘤干細胞（CSCs），而IGF-1R被認為是在維持胃癌干細胞干性特征中發(fā)揮了重要作用

12、。在本研究將探索磷酸化 IGF-1R受體（P-IGF-1R）對于調控胃癌干樣細胞干性功能中的作用。此外，我們還將探索P-IGF-1R能否通過刺激轉錄因子 Sox2激活從而促進胃癌細胞自我更新能力以及潛在的機制。同時，我們將探討特異性的IGF-1R抑制劑NVP-AEW541對胃癌細胞中自我更新能力、遷移能力及其對Sox2表達和轉錄功能的影響。
　　方法：采用腫瘤懸浮球成球試驗檢測胃癌干樣細胞自我更新能力的功能學研究。用于免疫印跡實驗

13、檢測P-IGF-1R和Sox2的表達在胃癌細胞系中表達。Transwell實驗進行評價胃癌干細胞的遷移能力。Western印跡法了解 Sox2蛋白的穩(wěn)定性是否通過抑制通過泛素-蛋白酶體降解途徑。免疫印跡和免疫熒光實驗用來確定 Sox2蛋白的定位及表達量。實時定量RT-PCR被用來評估在mRNA水平Sox2基因有無發(fā)生改變。
　　結果：在胃癌細胞株中（MKN-45和HGC-27）加入IGF-1配體使IGF-1R發(fā)生磷酸化改變導致在S

14、ox2在基因和蛋白水平發(fā)生改變。同時，磷酸化作用也導致增加的胃癌干樣細胞自我更新的能力，這是被認為具有腫瘤干細胞特征的能力。相反，使用特異性的IGF-1R抑制劑NVP-AEW541后，可以導致Sox2在基因和蛋白水平表達下降，在功能上表現(xiàn)為成球能力下降。此外，我們發(fā)現(xiàn)胃癌干樣細胞在接受NVP-AEW541藥物干預后，其體外遷移能力降低。更值得注意的是，我們發(fā)現(xiàn)，由于抑制IGF-1R受體活性后不是通過蛋白酶體途徑的蛋白質降解的Sox2蛋白