VCL、FAK在應(yīng)激性潰瘍中表達(dá)的意義及止血膠對應(yīng)激性潰瘍預(yù)防作用的研究.pdf

1、現(xiàn)代社會,隨著生活的壓力日益增加及搶險(xiǎn)救災(zāi)等非戰(zhàn)斗軍事應(yīng)急任務(wù)的增多,地方和軍隊(duì)面臨的應(yīng)激相關(guān)疾病也日益增多。其中,應(yīng)激性潰瘍表現(xiàn)最為明顯,嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量及部隊(duì)的戰(zhàn)斗力。已有研究表明,應(yīng)激性潰瘍的發(fā)生是多種因素綜合作用的結(jié)果,包括神經(jīng)內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)失控、粘膜損傷因素(如胃酸、胃蛋白酶、膽汁)的相對增強(qiáng)及胃粘膜防御屏障作用的減弱等。胃粘膜屏障中上皮細(xì)胞及緊密連接尤為重要,但是近年來研究發(fā)現(xiàn),黏附連接相關(guān)蛋白紐蛋白(Vinculin,

2、VCL)和粘著斑激酶(Focaladhensionkinase,FAK)在細(xì)胞-細(xì)胞間及細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)連接中有要作用,并且通過復(fù)雜的信號傳導(dǎo)通路調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞遷移、增殖、凋亡等,然而黏附連接在應(yīng)激性潰瘍發(fā)病中及粘膜損傷后修復(fù)中的作用研究尚屬空白。我科既往研制的主要用于治療消化道出血的中藥復(fù)合制劑--止血膠,其主要成分為白芨和阿膠,既有止血作用,又能粘附于糜爛及出血部位,對消化道出血具有顯著療效。因此,研究黏附連接及相關(guān)蛋白在應(yīng)激性潰瘍發(fā)

3、病中的作用以及止血膠對應(yīng)激性潰瘍的預(yù)防作用,對于研究應(yīng)激性潰瘍的發(fā)生機(jī)制及對應(yīng)激性潰瘍的防治具有極其重要的意義。
　　目的
　　1.構(gòu)建大鼠應(yīng)激性潰瘍模型,通過大體標(biāo)本觀察、潰瘍指數(shù)計(jì)算以及檢測大鼠血清表皮生長因子(Epidermalgrowthfactor,EGF)、白細(xì)胞介素2(Interleukin2,IL-2),血小板活化因子(Plateletactivatingfactor,PAF)水平,證實(shí)小平臺-水環(huán)境法能夠成

4、功構(gòu)建大鼠應(yīng)激性潰瘍模型,并且探明應(yīng)激相關(guān)細(xì)胞因子在小平臺-水環(huán)境法構(gòu)建的應(yīng)激性潰瘍中的變化情況;
　　2.通過對標(biāo)本行黏附連接相關(guān)蛋白VCL、FAK免疫熒光染色,觀察應(yīng)激性潰瘍發(fā)病中VCL、FAK表達(dá)變化情況,分析VCL、FAK表達(dá)變化與應(yīng)激性潰瘍的相關(guān)性;
　　3.給予大鼠止血膠灌胃,觀察大鼠胃粘膜潰瘍指數(shù)、血清EGF、IL-2、PAF水平及胃粘膜VCL、FAK變化情況,進(jìn)一步探討?zhàn)じ竭B接在應(yīng)激應(yīng)激性潰瘍發(fā)病中的作用以及

5、止血膠對應(yīng)激性潰瘍的預(yù)防作用。
　　方法
　　依據(jù)睡眠剝奪原理,采用小平臺-水環(huán)境法構(gòu)建大鼠應(yīng)激性潰瘍模型,通過大體標(biāo)本觀察、潰瘍指數(shù)計(jì)算、常規(guī)胃粘膜組織HE染色及ELISA法測大鼠血清EGF、IL-2、PAF水平證明模型構(gòu)建成功;運(yùn)用免疫熒光化學(xué)法檢測大鼠胃粘膜組織中VCL、FAK的表達(dá)情況;通過預(yù)先給予大鼠止血膠灌胃,觀察止血膠對大鼠應(yīng)激性潰瘍的預(yù)防作用。
　　結(jié)果
　　1.各應(yīng)激組大鼠胃粘膜不同程度糜爛、潰

6、瘍、出血,尤其是應(yīng)激5天及7天組,糜爛融合成片并有多處陳舊性血痂覆蓋;各應(yīng)激組大鼠的潰瘍指數(shù)均較正常對照組明顯增加(P<0.05);EGF、IL-2水平隨應(yīng)激程度加重而下降(P<0.05),PAF水平隨應(yīng)激程度加重而升高(P<0.05)。
　　2.隨著應(yīng)激時(shí)間延長及胃粘膜損傷程度加重,胃黏膜VCL的表達(dá)呈現(xiàn)下降趨勢,VCL熒光光度值與潰瘍指數(shù)存在負(fù)相關(guān),r=-0.839,(P<0.01);FAK表達(dá)也呈下降趨勢,FAK熒光光度值與

7、潰瘍指數(shù)存在負(fù)相關(guān),r=-0.811,(P<0.01)。
　　3.給予大鼠止血膠灌胃,止血膠組胃粘膜潰瘍指數(shù)較單純應(yīng)激組明顯下降(P<0.01),EGF、IL-2較單純應(yīng)激組升高(P<0.05),而PAF較單純應(yīng)激組下降(P<0.05);VCL、FAK表達(dá)水平較單純應(yīng)激組升高(P<0.05)。
　　結(jié)論
　　小平臺-水環(huán)境法可成功構(gòu)建大鼠應(yīng)激性潰瘍模型;黏附連接相關(guān)蛋白VCL、FAK在應(yīng)激性潰瘍的發(fā)生中表達(dá)下降,由此推