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1、目前血液來(lái)源緊張及輸血相關(guān)傳染病的發(fā)生使得臨床輸血治療面臨巨大的挑戰(zhàn),尋找更為安全、充足的血液來(lái)源一直以來(lái)都是輸血醫(yī)學(xué)研究的重要方向。干細(xì)胞技術(shù)的不斷發(fā)展使得我們有可能在體外將干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為紅細(xì)胞作為血液替代來(lái)源,然而目前的技術(shù)條件下生產(chǎn)制備干細(xì)胞來(lái)源的成熟紅細(xì)胞產(chǎn)品面臨很多困難,而干細(xì)胞來(lái)源的紅系祖細(xì)胞同樣可以作為非應(yīng)急性(或擇期)輸血的血液替代產(chǎn)品。本研究擬利用臍帶血造血干/祖細(xì)胞作為起始細(xì)胞,體外誘導(dǎo)其向紅系祖細(xì)胞分化,并添
2、加小分子化合物對(duì)誘導(dǎo)擴(kuò)增體系進(jìn)行優(yōu)化,初步探討利用生物反應(yīng)器規(guī)?;苽淠殠а獊?lái)源的紅系祖細(xì)胞的技術(shù)方法。本課題研究首先建立了無(wú)血清體系中高效誘導(dǎo)臍帶血造血干/祖細(xì)胞向紅系祖細(xì)胞分化的技術(shù)方法,誘導(dǎo)效率超過(guò)90%,對(duì)獲得的紅系祖細(xì)胞進(jìn)行了多方面的鑒定,并對(duì)誘導(dǎo)的紅系祖細(xì)胞的不同分化階段進(jìn)行了動(dòng)力學(xué)分析。為了進(jìn)一步優(yōu)化誘導(dǎo)擴(kuò)增體系,實(shí)現(xiàn)規(guī)?;瘮U(kuò)增臍帶血造血干/祖細(xì)胞來(lái)源的紅系祖細(xì)胞,本研究嘗試在誘導(dǎo)擴(kuò)增體系中添加一種小分子化合物“二甲基乙二
3、酰基甘氨酸”(Dimethyloxalylglycine,DMOG),在體外模擬低氧微環(huán)境,提高紅系祖細(xì)胞誘導(dǎo)擴(kuò)增效率。在前述建立的紅系祖細(xì)胞誘導(dǎo)擴(kuò)增體系的基礎(chǔ)上,本研究初步嘗試了利用WAVE波浪式生物反應(yīng)器結(jié)合Fed-batch培養(yǎng)模式誘導(dǎo)擴(kuò)增紅系祖細(xì)胞,力求實(shí)現(xiàn)體外規(guī)?;瘮U(kuò)增臍帶血造血干/祖細(xì)胞來(lái)源的紅系祖細(xì)胞。這些研究結(jié)果將為最終實(shí)現(xiàn)臍帶血造血干/祖細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為紅系祖細(xì)胞作為非應(yīng)急性(或擇期)輸血的血液替代來(lái)源奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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