RUNX2及Ⅵ型膠原蛋白在胸椎黃韌帶骨化中表達研究.pdf

1、目的：研究Runx2和Ⅵ型膠原在胸椎黃韌帶骨化組織及正常黃韌帶組織中的表達情況，并探討兩者在胸椎黃韌帶骨化進程中的關系及各自的臨床意義。
　　 方法：將采集病例分為兩組，其中TOLF組（骨化黃韌帶組織取自TOLF患者）20例（男6例/女14例），年齡42-65歲，平均53歲;正常對照組（正常黃韌帶組織取自外傷致胸段或胸腰段椎體骨折及胸椎間盤突出患者）8例（男5例/女3例)，年齡18-65歲，平均47歲。采用HE染色方法對TOLF

2、組患者與正常人的胸椎黃韌帶中彈力纖維、膠原纖維形態(tài)變化進行觀察，并對資料結果進行統(tǒng)計分析;用免疫組織化學及免疫熒光方法對TOLF組患者與正常人胸椎黃韌帶中Runx2及Ⅵ型膠原的表達情況進行觀察并對資料結果進行統(tǒng)計分析。
　　 結果：
　　 1、HE染色在正常組中可見彈力纖維直徑大致相等，排列緊密而規(guī)則，其間有少量的膠原纖維和散在的成纖維細胞。在TOLF組中可見彈性纖維排列紊亂、數(shù)量減少，膠原纖維增加，可見成軟骨細胞和軟骨

3、細胞。正常組和TOLF組的成纖維細胞計數(shù)兩組比較有顯著性差異（t=9.399，P＜0.05）。
　　 2、免疫組化可見TOLF組中Runx2在軟骨細胞及成纖維細胞胞漿或胞核中均有較高表達，結果顯示Runx2在20例黃韌帶組織中的陽性表達率為100％，其中低表達(+)為5％(1/20)，中等表達(++)為35％(7/20)，強表達(+++)為60％(12/20);在正常組中的陽性表達率為75％，其中無表達為25％(2/8)，低表達

4、(+)為75％(6/8)，無中等表達(++)及強表達(+++);Runx2在骨化組織中的表達水平明顯高于正常對照組織，表達陽性率兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(x2=23.80，P＜0.001)。Ⅵ型膠原陽性信號主要定位于成纖維細胞及軟骨細胞的胞漿、胞膜及韌帶基質(zhì)中，結果顯示Ⅵ型膠原蛋白在20例黃韌帶組織中的陽性表達率95％，其中無表達為5％(1/20)，低表達(+)為5％(1/20)，中等表達(++)為25％(5/20)，強表達(+++)為

5、65％(13/20);在8例正常黃韌帶組織中的陽性表達率為87.5％，其中無表達為12.5％(1/8)，低表達(+)為75％(6/8)，中等表達(++)12.5％(1/8)，無高表達;Ⅵ型膠原蛋白在骨化組織中的表達水平明顯高于正常對照組織(x2=17.27，P＜0.001)。
　　 3、免疫熒光檢測結果:Runx2定位于軟骨細胞及成纖維細胞胞漿或胞核中，其表達在正常對照組(19.89±1.01)與TOLF組(58.73±1.36

6、)相比，組間比較存在顯著性差異(t=72.81，P＜0.001)，表達明顯低于骨化組;Ⅵ型膠原定位于成纖維細胞及軟骨細胞的胞漿、胞膜及韌帶基質(zhì)中，其表達TOLF組(64.74±0.89)與正常組（22.77±1.12）相比，組間比較存在顯著性差異(t=104.79，P＜0.001)，表達明顯高于正常對照組。
　　 結論：
　　 1、TOLF黃韌帶中彈力纖維結構紊亂、數(shù)量減少，膠原纖維增加是導致黃韌帶骨化的主要原因;證實Ⅵ