美拉德反應(yīng)與地黃炮制機(jī)理的關(guān)系研究.pdf

1、地黃是一種大宗常用中藥材，依據(jù)炮制方法不同，有鮮地黃、生地黃、熟地黃、地黃炭等多種入藥形式，其性味功效顯著不同，是經(jīng)加工炮制而藥性發(fā)生顯著改變的典型。熟地黃和地黃炭是地黃的兩種主要炮制品，炮制后其物質(zhì)基礎(chǔ)應(yīng)當(dāng)發(fā)生了改變，但至今人們對(duì)這一過程仍然知之甚少。
　　 2010年藥典規(guī)定了熟地黃中毛蕊花糖苷的質(zhì)控指標(biāo)，其要求與生地黃相同，這顯然不能反映其炮制目的。生產(chǎn)上仍然沿用“黑如漆，甘如飴”的傳統(tǒng)感官標(biāo)準(zhǔn)，致使產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊。其問

2、題的關(guān)鍵在于對(duì)地黃炮制機(jī)理認(rèn)識(shí)不足。前人研究發(fā)現(xiàn)，熟地黃炮制過程中產(chǎn)生了5-HMF，氨基酸大部分消失，結(jié)合其中含有大量單糖和寡糖，炮制過程涉及高溫，我們認(rèn)為地黃炮制過程中發(fā)生了美拉德反應(yīng)，美拉德反應(yīng)導(dǎo)致的成分改變或美拉德反應(yīng)產(chǎn)物可能是地黃炮制品性味功效不同的物質(zhì)基礎(chǔ)。由于熟地黃和地黃炭的炮制過程均涉及加熱，本論文從美拉德反應(yīng)的角度對(duì)其炮制過程進(jìn)行了探討。此外，熟地黃的主要作用是滋陰補(bǔ)血，炎癥性貧血是臨床常見貧血類型，因此本論文初步探討了

3、熟地黃對(duì)炎癥性貧血大鼠的影響。主要結(jié)果如下:
　　 1.將生地黃切片蒸制不同時(shí)間(0～60h)，發(fā)現(xiàn)其水提液在420nm波長(zhǎng)處光吸收(A420nm)逐漸增加，pH值逐漸下降，其變化為炮制時(shí)間的指示函數(shù);炮制12h后，游離氨基酸含量從初始的0.296％直線下降到0.087％，其后維持低水平;5-HMF含量逐漸增加，12h后呈線性上升;梓醇、蔗糖、棉子糖和水蘇糖持續(xù)減少，分別于12、16、16和24h后不能檢出;果糖、葡萄糖（包括半

4、乳糖）和甘露三糖含量逐漸增加，在24h時(shí)達(dá)到最高，其后果糖和甘露三糖含量有下降趨勢(shì);毛蕊花糖苷含量隨炮制進(jìn)行逐漸下降，至炮制60h時(shí)其含量降至最初含量的1/3。
　　 2、地黃炭炒制過程中，樣品重量、水溶性浸出物和梓醇含量持續(xù)下降，飲片體積、A420nm和HMF含量先升后降，pH值前期無明顯變化，后期逐漸上升。樣品達(dá)到傳統(tǒng)炮制標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，A420nm和5-HMF均處于最高水平。
　　 3、用完全弗氏佐劑免疫大鼠尾基部。給藥組

5、分別給予低、中和高劑量熟地黃（0.54，1.08，2.16g/kg體重）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)中低劑量熟地黃對(duì)造模大鼠部分貧血和氧化損傷指標(biāo)有改善作用，而高劑量熟地黃則使大鼠病情加重，部分指標(biāo)如RBC、HGB、HCT、血清總鐵結(jié)合力、肝臟與腎臟中非血紅素鐵含量等惡化。
　　 4、用完全弗氏佐劑免疫大鼠尾基部，每周取正常和造模大鼠血液、組織檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)造模大鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白含量始終處于正常范圍之內(nèi)，但血清鐵、血清總鐵結(jié)合力、轉(zhuǎn)鐵飽和度下降