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文檔簡介
1、目的:
口腔潰瘍(oralulce,OU)是一種常見的口腔黏膜疾病,病因復(fù)雜,一般人群的患病率可高達(dá)25%以上。其中,以復(fù)發(fā)性口腔潰瘍最為常見,病程一般為7~10天,發(fā)作期間有比較劇烈的灼痛,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。目前對其發(fā)生的分子生物學(xué)機(jī)制了解不多,一般認(rèn)為其發(fā)病及愈合過程有多種因子參與,臨床上治療主要以消炎、止痛、防腐、促進(jìn)愈合等對癥治療為主。許多研究證明表皮生長因子(Epidermal growth factor,
2、EGF)及其受體(Epidermal growth factor receptor,EGFR)在損傷黏膜重建中起重要作用。康復(fù)新液是目前臨床上廣泛應(yīng)用的中藥制劑,對OU有良好療效,能顯著促進(jìn)肉芽組織生長,促進(jìn)血管新生,加速壞死組織脫落,迅速修復(fù)各類潰瘍及創(chuàng)傷創(chuàng)面。康復(fù)新的有效成分為多種氨基酸、多元醇類及肽類等,其成分復(fù)雜,作用機(jī)制不清,本研究探討其治療OU可能的分子機(jī)制。
1.動物實驗
10只健康SD雄性大鼠
3、為對照組A組,30只已經(jīng)建模雄性大鼠,隨機(jī)分B、C、D共4組,每組10只。A組為正常對照組,B、C、D組分別為30%冰醋酸誘發(fā)的黏膜口腔潰瘍模型對照組、表皮生長因子治療組和康復(fù)新液治療組。實驗開始第3d起,B組外用生理鹽水;C組外用表皮生長因子;D組外用康復(fù)新液治療,3次/d,共7d。觀察、記錄大鼠黏膜情況。第10d處死大鼠,取黏膜組織,均分為兩部分,一部分固定于4%中性多聚甲醛溶液中,常規(guī)切片后用免疫組織化學(xué)方法檢測EGF、EGFR在
4、口腔潰瘍實驗?zāi)P图罢?谇火つそM織中的表達(dá)特征和分布規(guī)律,并進(jìn)行計數(shù)和統(tǒng)計學(xué)分析;一部分放置于-70℃冰箱保存,提取總RNA并反轉(zhuǎn)錄后,用PCR技術(shù)檢測A、B、C、D四組黏膜組織中EGF、EGFRmRNA的表達(dá)水平,進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
2.臨床應(yīng)用
選擇2007年4月至2011年12月就診于我院口腔科符合輕型復(fù)發(fā)性口腔潰瘍診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者100例,隨機(jī)分為治療組50例,對照組50例。治療組給予康復(fù)新液含漱,每次1
5、0ml(x)10min,3次/d;對照組用西瓜霜噴劑治療,3次/d。觀察病人的平均潰瘍期的改變和疼痛指數(shù)改變,并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
結(jié)果:
1.動物實驗結(jié)果
(1)黏膜大體標(biāo)本:B組大鼠口腔黏膜可見明顯充血水腫,有大小不一的典型潰瘍分布。C組和D組大鼠口腔黏膜潰瘍面明顯縮小變淺,可見黏膜輕度充血水腫。有些無明顯潰瘍面,考慮潰瘍已愈合。
(2)HE染色及免疫組化結(jié)果:光鏡下見B組黏膜組
6、織中上皮細(xì)胞水腫明顯,部分脫落,表面大量纖維性滲出,黏膜下大量炎性細(xì)胞浸潤,其中以淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞為主。EGF和EGFR在A組口腔黏膜中分布于細(xì)胞全層,以棘層和顆粒層細(xì)胞最為明顯,EGF陽性表達(dá)主要位于胞漿及間質(zhì)中,EGFR陽性表達(dá)主要位于細(xì)胞膜及胞漿;B組黏膜組織中EGF和EGFR表達(dá)量明顯減少(p<0.05)。C、D組EGF和EGFR表達(dá)量比B組明顯增加,與A組表達(dá)量無明顯差異(p>0.05)。
(3)PCR檢測四
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