阿魏酸鈉對新西蘭兔自體移植靜脈作用的實驗研究.pdf

1、目的:
　　以阿魏酸鈉為干擾因素,觀察其對兔自體移植靜脈的作用并探討其可能的作用機制。
　　方法:
　　1.動物分組和手術(shù)造模選擇健康成年新西蘭兔24只,雌雄各半,體重2.0~2.5kg。每只動物取其右側(cè)頸外靜脈移植到同側(cè)頸總動脈,建立自體靜脈移植模型后隨機分為空白對照組(n=12)和阿魏酸鈉實驗組(n=12)。實驗組動物術(shù)后第一天開始給予阿魏酸鈉100mg/kg/只/日溶于生理鹽水灌胃,至取標本前一日,空白對照組給予

2、同等量生理鹽水灌胃做空白對照。
　　2.標本取樣與實驗方法分別于術(shù)后14天、28天切取移植靜脈。通過蘇木素-伊紅染色觀察組織形態(tài),并測定其內(nèi)膜厚度,分別用免疫組織化學(xué)方法和用TUNEL法檢測移植靜脈內(nèi)膜增殖細胞核抗原(PCNA)的表達情況和內(nèi)膜中原位凋亡細胞比例。
　　3.數(shù)據(jù)處理圖像使用計算機圖像分析系統(tǒng)進行分析。SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理實驗數(shù)據(jù),兩組間比較采用t檢驗,按檢驗水準α=0.05,顯著性水平P<0.05有統(tǒng)

3、計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.實驗動物及移植血管的大體觀察
　　所有動物均存活至實驗完成。取材時切口愈合良好,無傷口及深部感染,所有靜脈移植血管都保持通暢,兩組移植靜脈無閉塞。
　　2.組織形態(tài)
　　HE染色光鏡下觀察空白對照組移植術(shù)后14天移植靜脈內(nèi)膜中即可見平滑肌細胞體積增大數(shù)量增加;術(shù)后28天移植靜脈內(nèi)膜中平滑肌細胞進一步增多,平滑肌細胞間質(zhì)及膠原纖維明顯增多。實驗組術(shù)后14天移植靜脈平滑肌細胞增多

4、不明顯;術(shù)后28天移植靜脈平滑肌細胞略有增多,分泌型平滑肌細胞有所增加。
　　3.免疫組化基因表達
　　術(shù)后14天,對照組內(nèi)膜增殖細胞核抗原陽性細胞百分比為(37.02±1.29)％,較實驗組陽性細胞百分比(21.77±2.27)%明顯增加;術(shù)后28天兩組內(nèi)膜增殖細胞核抗原的陽性細胞數(shù)均增加,對照組內(nèi)膜增殖細胞核抗原陽性細胞百分比為(57.14±1.88)%,較實驗組(31.81±1.49)%明顯增加(P<0.05)。

5、>　　4.TUNEL法測定細胞原位凋亡
　　移植靜脈14天和28天時內(nèi)膜中陽性細胞所占比例實驗組分別為(7.96±0.07)%和(3.40±0.17)%,對照組分別為(4.34±0.25)%和(1.95±0.10)%,實驗組比對照組明顯增多,兩組間比較具有顯著意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.阿魏酸鈉不僅能減少自體移植靜脈血管平滑肌中PCNA的表達而且能增強自體移植靜脈平滑肌細胞的凋亡。
　　3.阿魏酸