兔自體靜脈移植修復淚小管吻合口愈合研究.pdf

1、目的 嚴重的眼瞼外傷多合并淚小管斷裂，尤其是下淚小管斷裂，如不能手術吻合和保持通暢，可引起終身溢淚，嚴重影響患者的工作及生活。淚小管吻合術是目前治療淚小管斷裂的標準方法。但對于創(chuàng)傷嚴重，瘢痕增生明顯，淚小管部分缺損及局部解剖結構破壞的二次手術病例，則無法直接對端吻合。上世紀六十年代起，陸續(xù)有報道采用自體靜脈移植修復淚小管，但這些報道多為臨床應用病例分析，未見相關實驗研究。 本實驗采用剪切方法，建立兔淚小管斷裂模型，使用自

2、體靜脈搭橋移植及直接對端吻合修復淚小管斷裂，觀察自體靜脈移植及直接吻合的吻合口局部病理改變。 材料與方法 1 動物與分組成年健康日本大耳白兔64只，體重2.0～2.5kg，雌雄兼用，無眼部疾患及頭面部異常。隨機抽取4只設為正常對照組(8眼)，剩余60只兔(120眼)左右眼隨機分為靜脈移植組及直接吻合對照組(每組60眼)。 2 手術方法剪斷或切斷淚小管，建立淚小管斷裂模型。以硅膠管作為支撐，直接吻合組行淚小管兩斷端

3、對端吻合修復淚小管斷裂，靜脈移植組采用自體靜脈移植修復淚小管斷裂，將自體耳緣靜脈兩端與淚小管兩斷端分別吻合。正常對照組不進行手術處理。 3 觀察項目和時間點術后1d、3d、5d、7d、14d及28d，拔除術中置入硅膠管，行熒光素排泄試驗、淚道沖洗試驗，觀察并記錄淚道通暢情況。于上述6個時間點，行標本大體觀察及常規(guī)HE染色(病理組織學觀察)，觀察淚小管吻合口區(qū)局部的病理改變，免疫組化染色分層計數(shù)吻合口區(qū)上皮細胞及成纖維細胞的增殖細胞核抗原

4、(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)陽性率，以觀察吻合口區(qū)細胞增殖情況。正常對照組觀察項目同上，數(shù)據(jù)作為正常對照使用。 4 統(tǒng)計學分析實驗數(shù)據(jù)均用x±s表示，使用SPSS11．0軟件包進行統(tǒng)計分析。靜脈移植組與直接吻合組比較使用配對t檢驗，靜脈移植組、直接吻合組及正常對照組比較采用單因素方差分析，以α=0.05為檢驗水準。 結果 1 淚小管斷裂修復術后淚道通暢情況靜脈

5、移植組于淚小管修復術后第7天，直接吻合組于術后5天，淚道恢復導淚功能。靜脈移植組熒光素排泄試驗陽性時間，與直接吻合組及正常對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 2 淚小管斷裂修復術后吻合口愈合情況2．1大體觀察結果術后1、3天，兩手術組吻合口有明顯紅腫、滲出物。術后5天，靜脈移植組仍見吻合口裂隙，直接吻合組吻合口已模糊。術后7天，兩手術組吻合口均不明顯。術后28天，僅能通過縫線判斷吻合口位置。 2．2病理組織學

6、觀察結果靜脈移植組：淚小管修復術后3天，吻合口處移植血管內(nèi)皮細胞開始脫落，與此同時淚小管上皮細胞向缺損處移行；術后5天，吻合口處移植血管出現(xiàn)平滑肌細胞退化及成纖維細胞增生；術后7天，吻合口區(qū)由新生淚小管上皮完全覆蓋；術后28天，上皮層形態(tài)基本穩(wěn)定，但上皮下成纖維細胞增殖仍較活躍。 直接吻合組：術后5天吻合口區(qū)淚小管上皮完全覆蓋，14天基本恢復形態(tài)，術后28天上皮下可見大量膠原纖維。 2. 3 免疫組化觀察結果術后3天，上皮細胞及

7、成纖維細胞的PCNA陽性率均開始明顯增加。靜脈移植組于淚小管修復術后7天，直接吻合組于術后5天，上皮細胞及成纖維細胞的PCNA陽性率均達到高峰。以后，上皮細胞及成纖維細胞的PCNA陽性率逐漸下降。 術后5天，靜脈移植組上皮細胞及成纖維細胞的PCNA陽性率均低于直接吻合組(P<0.01)。術后28天，靜脈移植組成纖維細胞的PCNA陽性率高于直接吻合組及正常對照組(P<0.05)。 結論 1．兔淚小管剪切傷后，直接吻