基于Au-MoO3-CS納米復(fù)合膜修飾的HCV NS5A電化學(xué)免疫傳感器的研究.pdf

1、目的：
　　HCV的感染人群廣，區(qū)域大，發(fā)病后不能引起人們的足夠重視而容易導(dǎo)致長(zhǎng)期的肝疾病的趨勢(shì)，但是HCV感染的早發(fā)現(xiàn)早隔離早治療對(duì)于疾病蔓延趨勢(shì)的遏制和病情的控制至關(guān)重要。HCV非結(jié)構(gòu)5A蛋白監(jiān)測(cè)在丙型肝炎病毒感染的診斷、病情發(fā)展以及預(yù)后判斷有很重要的作用。電化學(xué)免疫傳感器由于其具有價(jià)格低廉、操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、靈敏度高、檢測(cè)線低、易于商品化和集成化非常合適作為大量標(biāo)本的篩查。本研究的目的在于，利用納米材料的優(yōu)良性能，制備電化學(xué)

2、免疫傳感器用于HCV NS5A蛋白的高靈敏而準(zhǔn)確檢測(cè)。
　　方法：
　　1.制備Au/MoO3-殼聚糖(CS)復(fù)合納米材料。將MoO3納米粒子超聲分散于CS溶液制得混合溶液，加入HAuCl4溶液，HAuCl4在CS的還原作用下原位合成AuNPs在MoO3納米粒子表面上得到Au-MoO3/CS復(fù)合納米材料。用SEM對(duì)制備好的納米復(fù)合材料進(jìn)行表征。將此納米復(fù)合材料修飾滴涂于GCE表面后，利用金巰基的結(jié)合，把單克隆抗體(MAb)修

3、飾在納米復(fù)合材料上。
　　2.在檸檬酸三鈉的還原作用下，將HAuCl4還原生成的AuNPs生長(zhǎng)于介孔硅MCM-41的表面，將多克隆抗體(PAb)和HRP依靠金-巰鍵的結(jié)合作用修飾于介孔硅的表面，利用夾心法對(duì)HCV NS5A蛋白進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)于傳感器修飾過程和電化學(xué)性能用CV和EIS進(jìn)行表征，并對(duì)此免疫傳感器的性能進(jìn)行了考察。
　　結(jié)果：
　　制備的納米復(fù)合材料中，AuNPs生長(zhǎng)在MoO3納米顆粒的表面，MoO3納米顆粒均

4、勻分散于CS溶液中。所制得的納米復(fù)合材料具有良好的導(dǎo)電性、成膜性和生物相容性，用此膜作為MAb/Ag/PAb的固定基質(zhì)所制得的電化學(xué)免疫傳感器，對(duì)HCV NS5A蛋白顯示了良好的檢測(cè)效果，線性范圍為1 ng·mL-1到50μg·mL-1，除此之外，此生物傳感器還具有良好的重復(fù)性和穩(wěn)定性，重復(fù)性能優(yōu)異，RSD為4.5％。
　　結(jié)論：
　　所制成的HCV NS5A免疫傳感器具有良好的穩(wěn)定性，特異性，選擇性和低的檢測(cè)限等優(yōu)異性能，